Современные представления о развитии патологии центральной нервной системы (ЦНС) предполагают наличие механизмов, противодействующих повреждению и обеспечивающих нейропротекцию и репарацию. Многофакторность патогенеза рассеянного склероза (РС) с участием воспаления и нейродегенерации, длительность и вариабельность его течения с периодами ремиссий на ранних этапах свидетельствуют о сложности и многообразии процессов нейропластичности при этом заболевании. Известно, что модуляторами этих процессов являются нейротрофические и ростовые факторы. Из­учение их состояния при РС открывает перспективы новых терапевтических стратегий.

Известно, что нейротрофические факторы поддерживают выживание нейронов, обеспечивают трофическую поддержку поврежденных аксонов, индуцируют рост нервных волокон в направлении клеток-мишеней, влияют на пролиферацию и дифференцировку олигодендроцитов, активность миелинизации и ремиелинизации [1, 2], регулируют выраженность и скорость апоптоза [3].

Одним из нейротрофических ростовых факторов является нейротрофический фактор мозга (BDNF), который экспрессируется в фибробластах, астроцитах, нейронах, тромбоцитах, а также в леммоцитах [4]. Источником этого фактора в сыворотке являются тромбоциты, которые связывают, накап­ливают и высвобождают молекулы BDNF. Содержание BDNF в сыворотке периферической крови можно рассматривать в качестве показателя, отражающего уровень синтеза BDNF ЦНС [5].

Ключевым фактором дифференцировки развивающихся нейронов и глиальных клеток является также цилиарный нейротрофический фактор (CNTF), относящийся к ограниченному семейству нейропоэтических цитокинов. Интерес к изучению CNTF вызван его свойством способствовать выживанию нейронов. Молекулы CNTF локализованы внутри клетки и при ее разрушении оказываются во внеклеточной среде, в результате чего можно судить о степени и выраженности деструкции. CNTF оказывает важную роль при повреждении и способен влиять на выживаемость нейронов сетчатки, гиппокампа, спинальных ганглиев.

Есть данные, что уровень BDNF в сыворотке крови пациентов с РС снижен по сравнению со здоровыми, но содержание этого фактора имеет тенденцию к увеличению после обострения [6, 7]. По другим данным, концентрации BDNF в сыворотке пациентов с ремиттирующим РС не различается в периоды обострения и ремиссии [8]. По данным P. Sarchielli и соавт. [9], содержание данного фактора в цереброспинальной жидкости в фазе клинической стабильности у больных РС достоверно выше показателей в контрольной группе. Таким образом, имеющиеся сведения противоречивы. Данные об изменении CNTF при РС в доступной нам литературе отсутствуют.

Цель данной работы - изучить концентрацию нейротрофических факторов BDNF и CNTF в сыворотке крови у больных РС и провести клинико-биохимическое сопоставление содержания изучаемых нейротрофических факторов с клинической картиной заболевания.

Были обследованы 43 пациента, 19 женщин и 24 мужчины, с диагнозом РС согласно пересмотренным критериям МакДональда (2010). В исследование были включены пациенты с ремиттирующим типом течения заболевания, со стабильным состоянием в течение последних 30 дней, не получавшие в течение последнего месяца гормонотерапии.

Средний возраст пациентов был 36 (27; 42) лет. Начало заболевания пришлось на возраст 26 (20; 31) лет, средняя длительность болезни составила 9 (4; 12) лет.

Клиническое обследование пациентов включало анализ анамнестических данных, неврологический осмотр с оценкой выраженности неврологического дефицита, которая производилась по расширенной шкале инвалидизации Куртцке (Expanded Disability Status Scale - EDSS). Для оценки выраженности тревоги и депрессии использовалась шкала HADS (Hospital Anxiety and Depression Scale). Уровень астении оценивался по шкале MFI-20 (The Multidimensional Fatigue Inventory). Для исследования когнитивных функций использовался слуховой тест на сложение в заданном темпе PASAT-3 (Paced Auditory Serial Attention Task).

Все пациенты были обследованы также с помощью магнитно-резонансной томографии (МРТ), у 17 пациентов был произведен подсчет очагов в режимах T1, T2 и при введении гадолиния.

Концентрации BDNF и CNTF в сыворотке крови пациентов были определены методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием наборов фирмы «R&D Systems» (USA) согласно предложенной методике производителей.

Статистическая обработка материала осуществлялась с помощью программы Statistica 6.0 с использованием непараметрических методов. Количественные признаки охарактеризованы медианой, верхним и нижним квартилями. Для сравнения двух независимых признаков использовался критерий Манна-Уитни. Корреляционный анализ осуществлялся с помощью рангового коэффициента корреляции Спирмена r (с учетом уровня достоверности величины p). При p≤0,05 различия считались достоверными.

Была оценена скорость прогрессирования болезни, которая равнялась 0,39 (0,33; 0,50) балла в год. Большая часть пациентов, несмотря на молодой возраст, являлись инвалидами. Вторую группу инвалидности имели 16 (37,2%) человек, инвалидами третьей группы были 12 (27,9%) человек. Не имели группы инвалидности 15 (34,9%) больных. Дебют РС проявился в виде чувствительных нарушений у 12 человек, пирамидных - у 8, мозжечковых - у 6, зрительных - у 3, нарушений черепных нервов - у 2, тазовых нарушений - у 2, полисимптомный дебют отмечен у 10 больных. Суммарный балл инвалидизации по шкале EDSS к моменту начала исследования был равен 4,0 (3; 4,5). Степень неврологического дефицита коррелировала с длительностью заболевания (p=0,000).

Медиана общей астении равнялась 12 (9-15) баллам, она была выявлена у 21 (48,3%) пациента.

У 10 (23,3%) человек наблюдалась пониженная активность, среднее значение которой равнялось 10 (9; 12) баллам. Физическая астения присутствовала у 19 (44,2%) пациентов, среднее ее значение составляло 12 (8; 15) баллов. Наличие психической астении обнаружено у 8 (18,6%) человек, среднее ее значение равнялось 10 (7; 11) баллам. У 8 (18,6%) пациентов было обнаружено снижение мотивации со средним значением 10 (9-10) баллов. Медиана суммарного балла по шкале MFI-20 была равна 55 (43; 64), усталость по этому показателю была выявлена у 13 (30,2%) человек.

Сопоставлена степень неврологического дефицита с выраженностью астении. Корреляционный анализ показал достоверную связь между степенью инвалидизации по шкале EDSS и выраженностью астении по шкале MFI-20 и ее подшкалами. Балл по EDSS коррелировал с общим баллом астении (r=0,43, p=0,004), физической астенией (r=0,51, p=0,000), снижением мотивации (r=0,48, p=0,001), пониженной активностью (r=0,34 p=0,02). Психическая астения не коррелировала с балльной оценкой по EDSS (r=0,06, p=0,69).

Клинически выраженная тревога по шкале HADS выявлена у 9 (20,9%) человек, субклиническая тревога отмечена у 10 (23,3%). У 24 (55,8%) пациентов тревога отсутствовала. Наличие клинически выраженной депрессии отмечено у 5 (11,6%) пациентов, субклинической депрессии - у 6 (14%). У 32 (74,4%) пациентов депрессии не было. Тревога коррелировала со значением EDSS (r=0,33, p=0,03).

Концентрация BDNF в сыворотке крови колебалась в диапазоне 1,66-28,32 нг/мл. Среднее значение показателя составило 7,9 (5,21; 14,7) нг/мл, что было существенно (p=0,0001) ниже контрольного значения. У женщин концентрация BDNF была достоверно (р=0,02) ниже, чем у мужчин: 6,58 (3,71; 8,69) и 8,94 (7,36; 8,05) нг/мл соответственно. Содержание BDNF в сыворотке не зависело от возраста (r=0,05, p=0,72), длительности заболевания (r=0,08, p=0,61) и его тяжести по шкале EDSS (r= –0,03, p=0,82). Скорость прогрессирования заболевания также не оказывала влияния на содержание BDNF в сыворотке (r= –0,26, p=0,13). Был выполнен корреляционный анализ связи содержания BDNF с уровнем тревоги и депрессии. Концентрация BDNF в сыворотке крови пациентов обратно коррелировала с выраженностью депрессии (r= –0,31, p=0,04), а достоверной связи между концентрацией BDNF и тревогой обнаружено не было (r=0,17, p=0,28). Не выявлено также взаимосвязи между BDNF и когнитивными функциями по тесту PASAT-3 (r= –0,03, p=0,83). При проведении корреляционного анализа связи уровня BDNF с основными проявлениями астении обнаружилась достоверная обратная связь между концентрацией BDNF и физической астенией (r= –032, p=0,04).

Содержание CNTF в сыворотке крови больных РС варьировало в диапазоне от 1,60 до 425,60 пг/мл. Медиана концентрации CNTF составила 69,9 (31,2; 123,3) пг/мл. У здоровых данный нейротрофический фактор в сыворотке крови отсутствует. У женщин содержание CNTF составило 67,40 (7,90; 135,90) пг/мл, а у мужчин - 84,38 (36,15; 103,45) пг/мл (p=0,89). Скорость прогрессирования заболевания не оказывала влияния на концентрацию CNTF (r=0,105, p=0,551). Не обнаружено также достоверной связи между концентрацией CNTF в сыворотке крови с возрастом (r=0,058, p=0,708), длительностью заболевания (r=0,015, p=0,923) и уровнем инвалидизации по шкале EDSS (r=0,276, p=0,073). Концентрация CNTF коррелировала с результатами оценки когнитивных функций, которая проводилась с использованием теста PASAT (r=0,30, p=0,046).

При проведении корреляционного анализа между концентрацией BDNF и количеством очагов на МРТ в режимах T1 (r=0,03, p=0,89), T2 (r=0,16, p=0,55) и при введении контраста (r=0,35, p=0,60) связи не выявлено. Также отсутствовали корреляции между концентрацией CNTF и количеством очагов на МРТ в режимах T1 (r=0,39, p=0,12), T2 (r=0,22, p=0,38) и при введении гадолиния (r=0,27, p=0,29).

Настоящее исследование показало, что у пациентов с РС концентрация BDNF в сыворотке крови значительно ниже контрольного значения, что указывает на недостаточность механизмов, противостоящих мозговому повреждению при этом заболевании. Ассоциация этого показателя с некоторыми клиническими проявлениями РС, такими как усталость и депрессия, подтверждает участие недостаточности нейротрофических процессов в патогенезе заболевания и совпадает с известными данными о том, что снижение экспрессии мозгового нейротрофического фактора может служить объективным маркером нейрональной дисфункции, связанной с эмоциональными расстройствами [4].

Поскольку цилиарный нейротрофический фактор CNTF в сыворотке крови не экспрессируется у здоровых людей, то высокий средний показатель этого нейропептида при РС, с одной стороны, указывает на морфологическое повреждение, с другой - отражает активацию нейротрофической функции, направленной на повышение выживаемости нейронов. Увеличение CNTF и ассоциированные с ним результаты оценки когнитивных функций свидетельствуют о вовлеченности его в процессы, связанные с восстановлением когнитивного дефицита при РС.