Полянская Н.К.

Воронежская областная клиническая офтальмологическая больница

Фурсова Н.Ю.

Воронежская областная клиническая офтальмологическая больница

Карпов С.И.

Воронежский государственный университет

Диагностика механической травмы роговицы с использованием инфракрасной спектроскопии

Авторы:

Полянская Н.К., Фурсова Н.Ю., Карпов С.И.

Подробнее об авторах

Журнал: Вестник офтальмологии. 2013;129(1): 49‑52

Прочитано: 678 раз


Как цитировать:

Полянская Н.К., Фурсова Н.Ю., Карпов С.И. Диагностика механической травмы роговицы с использованием инфракрасной спектроскопии. Вестник офтальмологии. 2013;129(1):49‑52.
Polianskaia NK, Fursova NIu, Karpov SI. Mechanical corneal injury diagnosis using infrared spectroscopy. Russian Annals of Ophthalmology. 2013;129(1):49‑52. (In Russ.)

Рекомендуем статьи по данной теме:
Ис­кусствен­ный ин­тел­лект в дер­ма­то­ло­гии: воз­мож­нос­ти и пер­спек­ти­вы. Кли­ни­чес­кая дер­ма­то­ло­гия и ве­не­ро­ло­гия. 2024;(3):246-252
Диф­фе­рен­ци­аль­ная ди­аг­нос­ти­ка кок­ци­диоидо­ми­ко­за, ма­ни­фес­ти­ро­ван­но­го пе­ри­фе­ри­чес­ким об­ра­зо­ва­ни­ем лег­ко­го. Хи­рур­гия. Жур­нал им. Н.И. Пи­ро­го­ва. 2024;(8):77-85
Ком­прес­си­он­ная элас­тог­ра­фия как но­вый ме­тод ультраз­ву­ко­вой ви­зу­али­за­ции в диф­фе­рен­ци­аль­ной ди­аг­нос­ти­ке хро­ни­чес­ко­го тон­зил­ли­та. Вес­тник ото­ри­но­ла­рин­го­ло­гии. 2024;(4):20-25
Сим­птом цен­траль­ной ве­ны в диф­фе­рен­ци­аль­ной ди­аг­нос­ти­ке рас­се­ян­но­го скле­ро­за. Жур­нал нев­ро­ло­гии и пси­хи­ат­рии им. С.С. Кор­са­ко­ва. Спец­вы­пус­ки. 2024;(7-2):58-65
Па­то­ге­не­ти­чес­кие ас­пек­ты хро­ни­чес­кой та­зо­вой бо­ли при эн­до­мет­ри­озе: пер­спек­ти­вы ди­аг­нос­ти­ки (об­зор ли­те­ра­ту­ры). Проб­ле­мы реп­ро­дук­ции. 2024;(4):112-120
Прог­рес­си­ру­ющая муль­ти­фо­каль­ная лей­ко­эн­це­фа­ло­па­тия у ВИЧ-по­зи­тив­ных па­ци­ен­тов. Жур­нал нев­ро­ло­гии и пси­хи­ат­рии им. С.С. Кор­са­ко­ва. 2024;(8):39-46
Воз­мож­нос­ти ис­поль­зо­ва­ния ал­го­рит­мов гра­ди­ен­тно­го бус­тин­га для прог­но­зи­ро­ва­ния ос­лож­не­ний у па­ци­ен­тов с хи­рур­ги­чес­ким пе­ри­то­ни­том. Опе­ра­тив­ная хи­рур­гия и кли­ни­чес­кая ана­то­мия (Пи­ро­гов­ский на­уч­ный жур­нал). 2024;(3):5-13
Роль анам­не­за в пос­та­нов­ке гас­тро­эн­те­ро­ло­ги­чес­ко­го ди­аг­но­за у де­тей. До­ка­за­тель­ная гас­тро­эн­те­ро­ло­гия. 2024;(3):73-79
Диаг­нос­ти­чес­кие шка­лы ос­тро­го ап­пен­ди­ци­та у де­тей. Хи­рур­гия. Жур­нал им. Н.И. Пи­ро­го­ва. 2024;(10):80-87
Ис­поль­зо­ва­ние ис­кусствен­но­го ин­тел­лек­та в сов­ре­мен­ной сто­ма­то­ло­гии в Рос­сий­ской Фе­де­ра­ции. Сто­ма­то­ло­гия. 2024;(5):42-45

В последние годы с развитием экспериментальных методов повысился интерес к изучению физиологических жидкостей, содержащих биомаркеры, позволяющих проводить диагностирование и мониторинг развития болезней. Слезная жидкость (СЖ) - сложная биологическая среда, содержащая электролиты, белки, липиды, муцины, некоторые низшие органические кислоты и продукты метаболизма. Слезная пленка состоит из трех слоев: внутреннего - муцинового, среднего - водного, который содержит электролиты, белки и различные метаболиты, и внешнего - липидного. Как отмечено в ряде работ, капли СЖ могут содержать вещества, характеризующие определенные глазные болезни и даже системные заболевания [13]. В СЖ выделено до 60 фракций белков [1, 3]. Развитие современных методов анализа позволило расширить это число более чем до 100 и, очевидно, имеется еще больше [13]. При бактериальном конъюнктивите, после экстракции катаракты, при ношении контактных линз содержание общего белка умеренно повышается [7, 9]. В СЖ находятся факторы неспецифической защиты - лактоферрин, церулоплазмин, лизоцим (20-29% белка слезы обладает выраженным бактерицидным свойством на грамположительную флору), комплемент, β-лизин, пропердин [9, 12], иммуноглобулин, серум альбумин, липокалин, липофилин [13]. Большинство современных физико-химических методов анализа предполагает проведение хроматографических и масс-спектрометрических исследований, которые позволяют получить наиболее полную и достоверную информацию. Зачастую данные исследования весьма длительны и требуют наличия дорогостоящего оборудования и высококвалифицированных аналитиков. Это делает указанные способы исследования практически неприменимыми в медицине.

Механическая травма органа зрения является одной из основных причин утраты зрения и глаза как органа. Течение посттравматического процесса в 14-28% случаев осложняется хроническим воспалительным процессом, а в 7-25% - развитием внутриглазной инфекции, что в некоторых случаях (до 50%) приводит к резкому снижению зрения и трудоспособности лиц, получивших травму [2]. Ранняя диагностика и возможность прогнозирования характера течения и исходов травм глаза является актуальным направлением научных исследований в офтальмотравматологии. В последние годы возросло число публикаций, посвященных различным методам исследования СЖ.

В практической медицине возникла необходимость разработки простых исследований наряду со сложными высокоточными методами химического анализа СЖ. Достаточно широкое применение при различной глазной патологии нашло кристаллографическое исследование СЖ [6, 10,]. Инфракрасная (ИК) спектрометрия используется для диагностики сосудистых заболеваний органа зрения [4] и воспалительных процессов, протекающих в роговице, оценки эффективности проводимого лечения проникающих ранений [5]. К технически более простым и достаточно объективным, информативным методам относится ИК-спектроскопия [8], которая основана на изучении качественного состава и полуколичественном (относительная погрешность определения может составлять 10%, что значительно меньше количественного) анализе СЖ по спектрам поглощения кристаллических структур, образующихся при ее выпаривании. Как уже отмечено ранее, при нарушении обмена веществ в организме, повреждениях и заболеваниях органов зрения происходит изменение секреции белка в СЖ, направленные на восстановление возникшего дисбаланса. Метод спектрометрии часто используется в клинической практике, однако в случае травм роговицы наряду с изменением белкового состава возможно попадание липидов в СЖ [11], что необходимо учитывать при диагностике непроникающих (НРГ) и особенно проникающих (ПРГ) ранений глаза, при которых очевидно нарушение целостности слоев слезной пленки.

Целью настоящей работы являлась разработка способа экспресс-диагностики механической травмы роговицы с использованием ИК-спектроскопического анализа СЖ.

В рамках реализации указанной цели возможно решение следующих задач:

- дифференциальная диагностика характера ранений роговицы (проникающих, непроникающих);

- определение тактики, объема хирургического вмешательства при травмах роговицы, прогнозирование течения посттравматического процесса и своевременная профилактика осложнений.

Материал и методы

Проводился анализ СЖ до и после лечения у пациентов с НРГ - 1-я группа, 25 человек (25 глаз) и ПРГ - 2-я группа, 25 человек (25 глаз). Контрольную группу составили 20 человек (40 глаз). Клинически у больных с травмой роговицы наблюдались: слезотечение, светобоязнь, повреждения в различных зонах роговицы в виде точечных, линейных, зигзагообразных ран с адаптированными краями, передняя камера была от 2,5 до 3 мм, зрачок 3 мм, реакция на свет живая, хрусталик и подлежащие отделы без патологии. Острота зрения от 0,08 до 0,5 н/к в зависимости от локализации раны. Всем больным проводились офтальмо-, эхо-, диафано- и биомикроскопия, обзорная рентгенография орбит. Результаты флюоресцеиновой пробы не у всех пациентов были четкими.

Для получения ИК-спектров образцов СЖ применяли специально разработанную методику (оформлена заявка на изобретение). Для регистрации ИК-спектров использовали в качестве оптически прозрачной подложки пластины монокристаллического кремния. Микрошприцем наносили 20 мкл СЖ на пластины кремния. После испарения при комнатной температуре жидкой фазы и кристаллизации компонентов СЖ на поверхности кремния регистрировали ИК-спектры образцов на ИК-спектрометре Bruker Vertex-70 с преобразованием Фурье. Полученные ИК-спектры количественно обрабатывали методом базисной линии с помощью программы OPUS. Сопоставление интенсивности полос поглощения, а также статистическую обработку данных проводили в оболочке табличного процессора Microsoft Excel. В качестве аналитического сигнала использовали величины относительных оптических плотностей (Si/S3), взяв площадь одной из полос в качестве полосы сравнения (S3). В этом качестве выбрали полосу со средней интенсивностью при 1446-1452 см-1. Ее интенсивность и сдвиг по шкале волновых чисел сравнительно слабо зависит от состояния СЖ.

Результаты и обсуждение

Ранее в работе Н.К. Полянской [8] демонстрировалась возможность диагностики заболеваний роговицы и контроля над процессом лечения с применением типового ИК-спектрометра и общедоступного программного обеспечения. Методология исследования заключалась в проведении анализа ИК-спектров СЖ до, в процессе и после лечения пациентов с различной патологией заболевания роговицы, количественном определении содержания общего белка и сопоставлении полученных данных с результатами анализа в контрольной группе здоровых лиц. Эти исследования проводились при тяжелых деструктивных заболеваниях роговицы. Представленный подход может быть реализован и при диагностике глазного травматизма для дифференциальной диагностики проникающих, непроникающих ранений роговицы при отсутствии клинических данных. Данная методика позволяет определить тактику, объем хирургических вмешательств при механических травмах роговицы. На рис. 1

Рисунок 1. Типичный ИК-спектр СЖ контрольной группы здоровых лиц.
изображен типичный ИК-спектр СЖ лиц контрольной группы. Для здоровых характерно естественное содержание белковых молекул в СЖ, выражающееся в относительной интенсивности Si/S3 характеристичных полос поглощения СЖ. В табл. 1
представлены площади пиков на ИК-спектрах контрольной группы.

Анализ ИК-спектров СЖ показал, что для полученных образцов в контрольной группе присутствуют аналогичные полосы, при 1652 см-1, 1403 см-1, соответствующие деформационным колебаниям - NH-группы первичных амидов белка, и 1548 см-1, 1260 см-1, соответствующие деформационным колебаниям - NH-группы во вторичных амидах [3]. Различия проявились в общей и относительной интенсивности соответствующих полос. Чем больше интенсивность полосы около 1650 см-1, тем выше содержание белковых веществ в СЖ. Интенсивность характеристичной полосы (обусловливает наличие веществ в ИК-спектре) наиболее адекватно соотносится с площадью пика (S) в ИК-спектре. При изменении структуры и соотношения количеств различных белковых веществ, обусловленных динамикой биохимических процессов, сопровождающих разные стадии заболевания, посттравматические изменения, интенсивность поглощения характеристичных полос, а значит, и соотношение площадей характеристичных пиков изменяются в различной степени.

Нами выявлены особенности ИК-спектров СЖ при травмах различного характера и установлена корреляция между тяжестью ранения и характером ИК-спектров СЖ. Так, при НРГ и ПРГ может значительно меняться состав СЖ, поскольку кроме белков в нее могут попадать липиды (слезные липиды, липиды на предшествующей поверхности роговичного эпителия и др.) [11]. Таким образом, состав слезы может меняться в широких пределах.

На рис. 2

Рисунок 2. Диаграмма соотношений относительных интенсивностей полос Si/S1454 СЖ в 1-й, 2-й, 3-й группах.
изображена диаграмма соотношений относительных интенсивностей полос Si/S1454 СЖ. В табл. 2
приведены нормированные величины Si/S1454 характеристических полос поглощения СЖ пациентов с НРГ, ПРГ и контрольной группы. При непроникающих ранениях резко возрастают соотношения площадей пиков S4/S3 и S5/S3 - в 2-2,5 раза, а соотношение S1/S3, немного ниже, чем в контрольной группе (см. рис. 2, табл. 2). Для иллюстрации данных показателей приводим клинические примеры.

Клинический пример 1. Пациент С., 35 лет, госпитализирован с диагнозом: правый глаз - глубокая непроникающая рана роговицы, инородное тело роговицы. Достоверных данных о характере повреждения роговицы (проникающее или непроникающее) клинически получить не удалось. У больного наблюдались: умеренное слезотечение, светобоязнь, в параоптической зоне роговицы зигзагообразная рана с адаптированными краями, передняя камера 3 мм, зрачок 3 мм, реагировал на свет живо, хрусталик и подлежащие отделы без патологии. Острота зрения была 0,2 н/к. Флюоресцеиновая проба нечеткая. При госпитализации проведен экспресс-анализ СЖ (рис. 3, табл. 3).

Рисунок 3. ИК-спектры СЖ пациентов с НРГ. П., С., Т. — пациенты.
Для характеристичной полосы 1548 см-1 S4/S3=5,20, для 1649 см-1 S5/S3=8,86, что указывает на высокое содержание белков в СЖ. Полученные результаты позволили уточнить непроникающий характер травмы и избежать хирургического вмешательства, на фоне консервативного комплексного лечения процесс завершился выздоровлением. Острота зрения при выписке составила 1,0.

При проникающих ранениях возможно попадание в СЖ кроме белковых молекул и других компонентов.

В этих случаях возможно изменение относительных интенсивностей полос 1652, 1548, 1403, 1260 см-1. В данных условиях можно наблюдать увеличение содержания белков в СЖ по сравнению с таковым в контрольной группе (табл. 4).

При проникающих ранениях роговицы наблюдается увеличение соотношений площадей пиков (Si/S3)/(Si/S3)k для S4/S3 в 1,3-2,0 раза и S5/S3 в 1,2-1,5 раза, а также для S2/S3 в 1,5-1,7 раза. Наибольший разброс данных наблюдается для относительной интенсивности полосы 1260 см-1. Резкие колебания относительной интенсивности S1/S3 могут быть обусловлены изменениями в содержании липидов, полосы которых лежат в области 1242 см-1 [11].

Клинический пример 2. Пациент М., 62 года, поступил в стационар с диагнозом: левый глаз - проникающая рана роговицы с контузионным компонентом. При поступлении клинически достоверно глубину повреждения роговицы определить не удалось. У больного наблюдались: умеренное слезотечение, светобоязнь, в параоптической зоне роговицы линейная рана с адаптированными краями, передняя камера была 2,5 мм, зрачок 3 мм, реагировал на свет живо, хрусталик и подлежащие отделы без патологии. Острота зрения была 0,3 н/к. Флюоресцеиновая проба нечеткая. Проведен экспресс анализ СЖ (см. табл. 4). Отношения Si/S3 для характеристичной полосы 1548 см-1 S4/S3=2,46, для 1649 см-1 S5/S3=4,81, что указывает на высокое содержание белков в СЖ по сравнению с таковым в контрольной группе. Относительное содержание белков при проникающем ранении ниже, чем при непроникающем, и обусловлено разбавлением СЖ внутриглазной жидкостью (влагой передней камеры). Анализ СЖ позволил диагностировать наличие проникающего ранения роговицы. Проведена первичная хирургическая обработка с последующей интенсивной противовоспалительной терапией, в том числе с применением антибактериальных препаратов широкого спектра действия в 1-е сутки после травмы. Это привело к выздоровлению и сокращению сроков стационарного лечения. Острота зрения при выписке составила 0,9-1,0.

Выводы

1. Разработан метод экспресс-диагностики механической травмы роговицы на основе ИК-спектроскопии СЖ.

2. Дифференциальная диагностика в зависимости от характера ранения позволяет определить тактику консервативного или хирургического лечения.

3. Выбор адекватного метода лечения и объем позволяют снизить риск развития осложнений в посттравматическом периоде и ускорить сроки реабилитации пациентов.

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо со ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail

Мы используем файлы cооkies для улучшения работы сайта. Оставаясь на нашем сайте, вы соглашаетесь с условиями использования файлов cооkies. Чтобы ознакомиться с нашими Положениями о конфиденциальности и об использовании файлов cookie, нажмите здесь.