Основные и дополнительные иммуногистохимические маркеры прижизненности странгуляционной механической асфиксии

По данным сводных отчетов о деятельности региональных бюро судебно-медицинской экспертизы, механическая асфиксия (МА) в Российской Федерации стабильно занимает третье место в структуре смертности населения от внешних воздействий. По данным отечественных и зарубежных авторов [1, 2], из всего спектра МА наиболее часто в экспертной практике встречается странгуляционная асфиксия (СА).

Одной из проблем судебной медицины является дифференциальная диагностика МА от других видов смерти, а также установление объективных критериев, позволяющих различать ее разновидности. В ряде случаев МА судебно-медицинским экспертам достаточно сложно установить прижизненность образования странгуляционной борозды (СБ). Так, далеко не всегда обнаруживают кровоизлияния в валиках и дне С.Б. Кроме того, нередко самоповешение симулируется при других видах смерти.

В современной морфологии все большее значение находят методы иммуногистохимической (ИГХ) диагностики, что связано с преимуществами перехода исследований на молекулярный уровень с традиционных тканевого и клеточного. Эти методы на примере исследования случаев МА продемонстрировали свою эффективность в оценке прижизненности асфиксии и образования СБ [1—3].

Цель исследования — уточнить эффективность дополнительных методов диагностики прижизненности образования СБ, а также рассмотреть вопросы установления темпа наступления смерти и типа асфиксии.

Материалом послужили 17 случаев (13 мужчин и 4 женщины) классической странгуляционной МА в возрасте от 8 до 28 лет. Повешение происходило на фоне различной степени алкоголемии (от 0 до 3,4‰) с формированием типичных косовосходящих полужестких СБ. В качестве группы сравнения изучили 3 случая утопления (2 мужчин и женщина) в возрасте 45, 50 и 44 лет соответственно и случай удавления руками женщины 44 лет. В 2 случаях утопления в крови погибших обнаружили этанол в концентрации 3 и 2,3‰. Группу контроля (15 наблюдений) составили 10 случаев смерти от острых форм ишемической болезни сердца (все мужчины в возрасте от 56 до 73 лет) и 5 случаев от травматического шока (все мужчины в возрасте от 23 до 54 лет), не имевших алкоголя в крови.

Исследование всех трупов проводили по традиционной методике в 1-е сутки посмертного периода. Во всех случаях МА изымали участки СБ с подлежащими мягкими тканями, изучали кожу вне зон СБ, а также кусочки легких, находившихся вне зоны посмертного гипостаза. Кроме того, в группе контроля проводили моделирование посмертной СБ путем локальной компрессии кожи в течение нескольких часов.

В качестве специальных лабораторных исследований использовали стандартные методики гистологического и ИГХ-исследований с поликлональными антителами к общему цитокератину, фибриногену, иммуноглобулину ламбда, фибронектину и CD-117. Применяли окраски по Шпильмайеру и толуидиновым синим [2].

В дерме и подкожной основе валиков группы прижизненных СБ наблюдали достоверно высокую экспрессию фибриногена по сравнению с помертными СБ и участками контрольной интактной кожи. Иммуноглобулин ламбда был несколько больше представлен в прижизненных СБ, но несколько меньше, чем фибриноген. В группе МА у повешенных в зонах мелкоочагового отека легких фибриноген не обнаружили. Экспрессия фибронектина была слабой и локализовалась только в венулах подкожной основы.

В зоне СБ при окраске по Шпильмайеру отметили компрессию коллагеновых волокон с иногда заметной гомогенной окраской эпидермиса. При окраске на общие цитокератины выявлили значительную дезорганизацию цитоскелета клеток эпидермиса, при этом в интактной коже такого не наблюдали.

В отличие от острых форм ишемической болезни сердца (ИБС) в случаях странгуляционной МА, удавлении руками и утоплениях антиген CD-117 имел значительную очаговую экспрессию в клетках межальвеолярных перегородок, доказывая дифференцирующую роль маркера острой альвеолярной гипоксии (см. рис. 1, 2).

При утоплении и удавлении руками экспрессия фибриногена в альвеолах была несколько выше, чем при странгуляционной МА. В случаях травматического шока в легких нередко отмечали картину развернутого респираторного дистресс-синдрома взрослых. По нашему мнению, эти отличия отражают различия в темпе умирания людей из этих групп, так как при классической МА выпотевание фибриногена в альвеолы не успевает развиться.

При посмертной странгуляции в легких отмечали морфологическую картину, характерную для других видов смерти.

В решении проблем установления прижизненности СБ, а также дифференциальной диагностики разновидностей МА и отличия ее от других видов смерти все большее значение имеет ИГ-диагностика. Обнаружение фибриногена можно рассматривать как субстанцию раннего реагирования на повреждение и как маркер прижизненности образования странгуляционной М.А. Иммуноглобулин ламбда имеет такую же специфичность, но с менее выраженной реакцией. Эти маркеры сохраняют свою значимость даже при отсутствии классических признаков прижизненности СБ.

Активация тучных клеток может быть отмечена как неспецифическая реакция на острую интраальвеолярную гипоксию с помощью ИГХ-реакции на антиген CD-117.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о новых маркерах прижизненности странгуляционной МА, использование которых должно способствовать совершенствованию диагностики данного вида смерти. В перспективе возможна разработка усовершенствованного алгоритма диагностики МА с использованием иммуногистохимических методов для установления вида, темпа и ее прижизненности.

Дальнейшие усилия по дифференциальной диагностике МА должны быть направлены на поиски дополнительных критериев прижизненности СБ и в целом МА как методами ИГХ, так и с помощью морфометрии [4]. Так, например, X. Feng и соавт. [5] продемонстрировали роль активации глюкозо-регулирующего пептида 78 (GRP 78) в нейронах мозга как раннего маркера прижизненности странгуляционной МА.

Выявление и дальнейшее изучение нейроморфологических маркеров МА, по нашему мнению, представляется перспективным как в отношении установления вида смерти, так и определения ее рода, в частности ИГХ-маркеров суицидального поведения. Также перспективны исследования СБ, в частности изучение ранних реакций цитоскелета клеток эпидермиса и дермы на экстремальное механическое воздействие.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.