Микробное сообщество рта — одно из самых сложных по составу микроорганизмов [1—3]. На любом участке слизистой оболочки рта (СОР) можно обнаружить большое количество микроорганизмов [4—6]. Сложность состава микробной флоры рта определяет необходимость использования не только культуральных методов идентификации микроорганизмов, но и современных методов, основанных на анализе ДНК микробной клетки (полимеразная цепная реакция — ПЦР) [7—9]. В связи с этим нами была проведена ПЦР-диагностика биопсийного материала очагов поражения у пациентов с буллезными заболеваниями СОР.

Цель исследования — изучение методом тканевой ПЦР видового состава микробиоты очагов поражения СОР у пациентов с буллезными поражениями.

Материал и методы

В настоящем исследовании для изучения видового состава микробной флоры у больных с pemphigus vulgaris, pemphigoid bullosa и буллезной формой ruber lichen planus СОР был использован метод ПЦР-диагностики биопсийного материала. С учетом, что биопсия является инвазивным методом диагностики, у всех пациентов с буллезными заболеваниями СОР, принимающих участие в данном исследовании, было получено информированное согласие.

Всего обследован 51 человек: с pemphigus vulgaris —14, с pemphigoid bullosa — 17 и с буллезной формой ruber lichen planus СОР — 20. Были определены 4 вида микроорганизмов: Fusobacterium, Streptococcus pneumoniae, Candida albicans, Ureaplasma spp. и вирусы — Human Papillomavirus 16 (HPV-16), Epstein—Barr virus (EBV) и Citomegalovirus (CMV).

Результаты и обсуждение

При исследовании биопсийного материала методом ПЦР у всех пациентов с буллезными заболеваниями СОР отмечен высокий процент выделения Str.pneumoniae: у больных с pemphigus vulgaris — 52,6%, при буллезной форме ruber lichen planus — 57,1% и pemphigoid bullosa — 46,7% (рис. 1, а). На втором месте по частоте выявления была C. albicans. В 36,8% грибы рода Candida были обнаружены у больных с pemphigus vulgaris, в 33,3% — у пациентов с pemphigoid bullosa. У пациентов с буллезной формой ruber lichen planus СОР грибы рода Candida выявлены в 28,6% случаев. Фузобактерии определялись значительно реже, наибольший процент (10,6%) был у больных с pemphigus vulgaris. У пациентов с pemphigoid bullosa СОР в 12,5% случаев выявлена Ureaplasma spp.

Рис. 1. Частота выявления микроорганизмов (а) и вирусов (б) у пациентов с буллезными заболеваниями слизистой оболочки рта.

Одновременно в том же субстрате были определены герпетические вирусы (рис. 1, б). Видно, что у пациентов с буллезными заболеваниями СОР чаще определялись EBV и HPV 16. У больных с pemphigus vulgaris и pemphigoid bullosa EBV выявлялись в 71,4 и 37,5% случаев соответственно, а при буллезной форме ruber lichen planus — в 80%. У пациентов с pemphigoid bullosa СОР HPV-16 определен в 50,0%, а CMV — в 12,5% случаев.

При исследовании микробиоты буллезных поражений в значительном числе случаев были установлены ассоциации микроорганизмов и вирусов. Ассоциации Str. pneumoniae и C. albicans у пациентов с pemphigus vulgaris встречались часто в 26,3% случаев, pemphigoid bullosa — в 20,0% (рис. 2, а), у пациентов с буллезной формой ruber lichen planus в 14,3% случаев. У больных с pemphigus vulgaris СОР в 31,6% случаев была отмечена ассоциация Str. pneumoniae, C. albicans и EBV (рис. 2, б). У пациентов с буллезной формой ruber lichen planus СОР в 28,6% случаев были выделены ассоциации Str. pneumoniae, EBV и CMV (рис. 2, в).

Рис. 2. Ассоциации микроорганизмов и герпетических вирусов у пациентов с pemphigoid bullosa (а), pemphigus vulgaris (б) и ruben lichen planus (буллезная форма; в) слизистой оболочки рта.

Заключение

По результатам исследования с применением метода полимеразной цепной реакции биопсийного материала, взятого из очагов поражения слизистой оболочки рта, установлено, что чаще всего при pemphigus vulgaris наряду с микроорганизмами выявлялись Epstein—Barr virus и Citomegalovirus. Это подтверждает высказанное раннее предположение о значении вирусов в отягощении клинического течения данного заболевания и расценивается как один из пусковых механизмов аутоиммунного конфликта, что проявляется специфической клинической картиной данного заболевания. Полученные данные позволили нам проводить пациентам с pemphigus vulgaris наряду с кортикостероидной терапией противомикробное и противовирусное лечение.

У пациентов с pemphigoid bullosa наблюдалось сочетание Str. pneumoniae и Epstein—Barr virus. В сравнении с другими буллезными поражениями слизистой оболочки рта при буллезной форме ruber lichen planus наиболее часто выявляли ассоциации Epstein—Barr virus с микроорганизмами. Полученные данные свидетельствуют о выраженном негативном воздействии на гуморальный и клеточный звенья иммунитета у пациентов с буллезными заболеваниями слизистой оболочки рта. Дисбаланс иммунной системы проявляется в снижении функциональной активности естественных киллеров, макрофагов и способствует выраженным иммунотоксическим изменениям, проявляющимся на слизистой оболочки рта в виде эрозий и пузырей у пациентов, страдающих буллезными заболеваниями.

Использование метода тканевой диагностики с применением полимеразной цепной реакции имеет большое клиническое значение в прогнозировании течения патологического процесса и выборе наиболее эффективного способа лечения у пациентов с буллезными заболеваниями слизистой оболочки рта.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.