Псориаз является комплексным воспалительным заболеванием кожи, в которое вовлечены такие процессы, как гиперпролиферация кератиноцитов и их аберрантная дифференцировка, ангиогенез дермы и другие [1].
При образовании псориатических бляшек обнаруживаются такие гистологические изменения, как утолщение эпидермиса (гиперкератоз, акантоз) вследствие ускоренной пролиферации кератиноцитов, уменьшение или полное отсутствие гранулярного слоя и сохранение ядер в корнеоцитах (паракератоз) вследствие аберрантной дифференцировки кератиноцитов, заметное расширение капиллярной сети в сосочковом слое дермы, приводящие к визуально наблюдаемой эритеме, а также появление плотного воспалительного инфильтрата, состоящего из кластеров CD4+ T-хелперов и антиген-презентирующих дендритных клеток (DCs) в дерме и CD8+ T-клеток и нейтрофилов в эпидермисе [2].
Псориаз, как известно, имеет сильный генетический компонент с предполагаемой наследуемостью 66% [3]. В проявлении патологии задействованы большие группы взаимодействующих генов с измененной экспрессией [4—6], изменение определенных участков хромосом (CNVs), локусы, ассоциированные с псориазом [7—9]. Однако запуск патологического процесса осуществляется не только совокупным эффектом перечисленных генетических факторов, но и внешними триггерами и эпигенетическими механизмами.
Важным фактором эпигенетической регуляции является метилирование ДНК. Метилирование ДНК — один из основных элементов контроля экспрессии генов в клетках млекопитающих. Это регулируемый процесс и предполагается, что он играет важную роль в регуляции экспрессии генов [10]. Нарушение механизма метилирования ДНК существенно влияет на развитие различных патологий.
В своей работе мы провели анализ статуса метилирования генов Т-лимфоцитов у здоровых индивидуумов и больных псориазом до лечения.
C помощью микрочипов Illumina был проведен анализ статуса метилирования в геномах Т-клеток, полученных от больных псориазом и здоровых волонтеров.
В результате были выявлены локусы, дифференциально метилированные в CD3+ клетках больных псориазом и у здоровых индивидуумов. Среди наиболее метилированных локусов в CD3+ клетках больных псориазом выделяются гены киназ FRK, JAK1, AKAP7, DYRK1A, PRKCA, RPS6KA2.
Чипы Illumina Infinium HumanMethylation450 BeadChip анализировали с помощью модуля Methylation 1.9.0 Illumina GenomeStudio. Illumina Infinium HumanMethylation450 BeadChip — новые чипы, позволяющие проанализировать более 450 000 метилированных CpG сайтов внутри человеческого генома.
Ген FRK относится к группе киназ типа TYR. Играет роль в подавлении роста во время G1- и S-фаз клеточного цикла, и активная его транскрипция во время псориатического процесса вполне логична, так как при псориазе происходит гиперпролиферация кератиноцитов.
Скорее всего, наблюдаемое при псориазе массовое метилирование CpG-островков (неметилированных в норме) обусловлено, по-видимому, не собственно реакцией de novo, а скорее механизмом спрединга, результаты активности которого закрепляются поддерживающим метилированием в ряду поколений гиперпролиферирующих кератиноцитов. Но, тем не менее, полученные результаты свидетельствуют о явной роли метилирования генов FRK, JAK1, AKAP7, DYRK1A, PRKCA, RPS6KA2 в CD3+ клетках в развитии псориатического процесса [10].
Таким образом, экспериментально была установлена определяющая роль метилирования генов в развитии псориаза. Полученные результаты позволят расширить круг фармакологических препаратов, способствующих подавлению псориатических проявлений за счет включения в их число средств, задействованных в реакции трансметилирования.
Одним из таких препаратов является адеметионин (Гептрал). Гептрал — аналог внутриклеточного адеметионина, относящегося к группе гепатопротекторов и обладающего также антидепрессивной активностью. Оказывает холеретическое и холекинетическое действие, обладает детоксикационными, регенерирующими, антиоксидантными, антифиброзирующими и нейропротективными свойствами. Восполняет дефицит S-аденозил-L-метионина (адеметионина) и стимулирует его выработку в организме, содержится во всех средах организма. Наибольшая концентрация адеметионина отмечена в печени и мозге.
Выполняет ключевую роль в метаболических процессах организма, принимает участие в важных биохимических реакциях: трансметилировании, транссульфатировании, трансаминировании.
В реакциях трансметилирования адеметионин является донором метильной группы для синтеза фосфолипидов клеточных мембран, нейротрансмиттеров, нуклеиновых кислот, белков, гормонов и так далее. В реакциях транссульфатирования адеметионин является предшественником цистеина, таурина, глютатиона (обеспечивая окислительно-восстановительный механизм клеточной детоксикации), коэнзима ацетилирования (включается в биохимические реакции цикла трикарбоновых кислот и восполняет энергетический потенциал клетки).
Клинические исследования проводились на базе ГКБ № 14 им. В.Г. Короленко в период 2012—2013 гг. За указанный период времени под нашим наблюдением на стационарном лечении находились 253 пациента, из них 103 мужчины и 150 женщин. У 116 (46%) человек был установлен диагноз распространенный экссудативный псориаз и псориатический артрит, у 92 (36%) — распространенный экссудативный псориаз, у 22 (9%) — псориатическая эритродермия и псориатический артрит, у 12 (5%) — псориатическая эритродермия, и у 11 (4%) лиц — ладонно-подошвенная форма псориаза.
Первичное обследование пациентов включало общеклиническое исследование, дерматологический осмотр и оценку PASI, определение биохимических параметров крови, клинических лабораторных показателей крови, общеклиническое исследование мочи, рентгенологическое исследование. Оценка PASI и дерматологического индекса качества жизни (ДИКЖ) пациентов производилась до и после проведения терапии.
До начала терапии биохимические исследования крови показали, что у мужчин, страдающих псориазом, по сравнению с женщинами отмечается более высокая частота и выраженность изменений аминотрансфераз (АЛТ — в 2,3 раза и в 1,1 раза выше нормы соответственно, АСТ — в 1,9 раза и в 1,1 раза выше нормы соответственно), общего билирубина (в 1,4 раза выше нормы и в пределах нормы соответственно). Повышение уровня общего билирубина отмечено у 56% мужчин, повышение концентрации АЛТ в сыворотке крови — у 44%, АСТ — у 51%. После курса лечения псориаза отмечалось более значительное снижение этих показателей у мужчин (АСТ — в 1,5—2 раза, АЛТ — в 2 раза, общий билирубин — в 1,3 раза) по сравнению с женщинами, у которых эти показатели изначально были повышены незначительно.
Поскольку в анамнезе у большинства мужчин отмечалось нарушение диетического режима питания и наличие вредных привычек, связанных со злоупотреблением алкоголем и табакокурением, можно предположить, что значительное повышение уровня трансаминаз и билирубина у мужчин до начала лечения связано с данным фактором.
Участники исследования с признаками печеночной патологии были разделены на две группы: больные 1-й группы в качестве гепатопротектора получали препарат Гептрал, пациенты 2-й группы — эссенциале форте Н.
Как видно из табл. 1, у больных 1-й группы, получавших Гептрал, все биохимические показатели крови снизились практически до нормальных значений, в то время как в группе, получавшей эссенциале форте Н, АСТ и АЛТ оставались все еще значительно повышены.
Как показывают данные в табл. 2, в 1-й группе пациентов индекс PASI уменьшился в 4,2 раза, в то время как у больных 2-й группы — в 3 раза.
Результаты изменения оценки ДИКЖ пациентов на фоне терапии представлены на рисунке. Как мы видим, средний балл ДИКЖ до начала терапии в 1-й группе, принимавшей Гептрал, составлял 15,6 балла, а во 2-й группе пациентов, получавших эссенциале форте Н — 16,1 балла. После проведенной терапии ДИКЖ в обеих группах вырос до 37,2 и 29,8 балла соответственно.
Таким образом, проведенное исследование показало высокую эффективность действия Гептрала не только на биохимические показатели крови (АЛТ, АСТ, общий билирубин и другие), но и на положительную динамику клинической картины.