Сайт издательства «Медиа Сфера»
содержит материалы, предназначенные исключительно для работников здравоохранения. Закрывая это сообщение, Вы подтверждаете, что являетесь дипломированным медицинским работником или студентом медицинского образовательного учреждения.

Парфенов А.И.

ГБУЗ "Московский клинический научно-практический центр" Департамента здравоохранения Москвы

Болдырева О.Н.

Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова Минздрава России

Ручкина И.Н.

ГБУЗ "Московский клинический научно-практический центр" Департамента здравоохранения Москвы

Князев О.В.

ГБУЗ "Московский клинический научно-практический центр" Департамента здравоохранения Москвы

Сагынбаева В.Э.

ЦНИИ гастроэнтерологии Департамента здравоохранения Москвы

Щербаков П.Л.

ГБУЗ "Московский клинический научно-практический центр" Департамента здравоохранения Москвы

Хомерики С.Г.

Московский клинический научно-практический центр Департамента здравоохранения Москвы, Центральный НИИ гастроэнтерологии, Москва

Лазебник Л.Б.

ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» Минздрава России, Москва, Россия

Коноплянников А.Г.

ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов» Министерства науки и высшего образования Российской Федерации, Москва, Россия

Значение молекул адгезии для оценки эффективности терапии язвенного колита и болезни Крона

Авторы:

Парфенов А.И., Болдырева О.Н., Ручкина И.Н., Князев О.В., Сагынбаева В.Э., Щербаков П.Л., Хомерики С.Г., Лазебник Л.Б., Коноплянников А.Г.

Подробнее об авторах

Журнал: Терапевтический архив. 2014;86(2): 32‑38

Просмотров: 2832

Загрузок: 271


Как цитировать:

Парфенов А.И., Болдырева О.Н., Ручкина И.Н., и др. Значение молекул адгезии для оценки эффективности терапии язвенного колита и болезни Крона. Терапевтический архив. 2014;86(2):32‑38.
Parfenov AI, Boldyreva ON, Ruchkina IN, et al. Value of adhesion molecules for evaluating the efficiency of therapy for ulcerative colitis and Crohn's disease. Therapeutic Archive. 2014;86(2):32‑38. (In Russ.)

Рекомендуем статьи по данной теме:
Под­дер­жи­ва­ющая им­му­но­суп­рес­сив­ная те­ра­пия при бо­лез­ни Кро­на: при­вер­жен­ность па­ци­ен­та и ее вли­яние на эф­фек­тив­ность ле­че­ния. Кли­ни­чес­кий слу­чай. До­ка­за­тель­ная гас­тро­эн­те­ро­ло­гия. 2024;(2):90-96
Кли­ни­чес­кие осо­бен­нос­ти те­че­ния ве­не­ри­чес­кой лим­фог­ра­ну­ле­мы. Кли­ни­чес­кая дер­ма­то­ло­гия и ве­не­ро­ло­гия. 2024;(3):313-320
Сов­ре­мен­ные ме­то­ды ле­че­ния пе­ри­аналь­ных сви­щей на фо­не бо­лез­ни Кро­на. Вос­ста­но­ви­тель­ные би­отех­но­ло­гии, про­фи­лак­ти­чес­кая, циф­ро­вая и пре­дик­тив­ная ме­ди­ци­на. 2024;(2):49-56
Вли­яние дли­тель­нос­ти ди­аг­нос­ти­чес­ко­го по­ис­ка на ис­ход за­бо­ле­ва­ния при бо­лез­ни Кро­на. Хи­рур­гия. Жур­нал им. Н.И. Пи­ро­го­ва. 2024;(7):36-44
Вза­имос­вязь эн­до­те­ли­аль­ной дис­фун­кции и сис­тем­но­го вос­па­ле­ния у па­ци­ен­тов с яз­вен­ным ко­ли­том. Про­фи­лак­ти­чес­кая ме­ди­ци­на. 2024;(7):85-93
Ин­су­ли­но­ре­зис­тен­тность как фак­тор кар­ди­овас­ку­ляр­но­го рис­ка у па­ци­ен­тов с яз­вен­ным ко­ли­том. До­ка­за­тель­ная гас­тро­эн­те­ро­ло­гия. 2024;(3):42-49
Осо­бен­нос­ти про­яв­ле­ний оро­фа­ци­аль­ной и со­ма­ти­чес­кой бо­ли у па­ци­ен­тов с бо­лез­нью Кро­на и яз­вен­ным ко­ли­том. Рос­сий­ский жур­нал бо­ли. 2025;(1):10-15
Диаг­нос­ти­чес­кая зна­чи­мость мик­ро­би­оты ки­шеч­ни­ка и ее ме­та­бо­ли­тов в оцен­ке сер­деч­но-со­су­дис­то­го рис­ка у па­ци­ен­тов с яз­вен­ным ко­ли­том. До­ка­за­тель­ная гас­тро­эн­те­ро­ло­гия. 2025;(1):39-46
Це­ли­акия у муж­чин 18—27 лет: но­вые дан­ные о час­то­те и кли­ни­чес­ких осо­бен­нос­тях. До­ка­за­тель­ная гас­тро­эн­те­ро­ло­гия. 2025;(1):55-62
Воз­мож­нос­ти те­ра­пии па­ци­ен­тов с нев­рал­ги­чес­кой ами­от­ро­фи­ей. Жур­нал нев­ро­ло­гии и пси­хи­ат­рии им. С.С. Кор­са­ко­ва. 2025;(3):39-45

В патогенезе воспаления при язвенном колите (ЯК) и болезни Крона (БК) большое внимание уделяется молекулам адгезии [1-3]. Они вызывают миграцию клеток из сосудистого русла в очаг воспаления, т.е. способствуют усилению воспалительной инфильтрации слизистой оболочки и миграции лимфоцитов в лимфатические узлы. Активность эндотелиальных клеток и их участие в развитии воспаления не менее важны, чем влияние клеток воспалительного инфильтрата, и зависит как от их основных функций, так и взаимодействия между лейкоцитарными и эндотелиальными молекулами адгезии и цитокинами в разные фазы воспаления.

Известны 3 семейства молекул адгезии: интегрины (гетеродимерные молекулы, функционирующие как клеточно-субстратные, так и межклеточные адгезивные рецепторы); селектины, лектинподобный домен которых обеспечивает адгезию лейкоцитов к эндотелиальным клеткам; адгезивные рецепторы суперсемейства иммуноглобулинов, участвующие в межклеточной адгезии, в том числе эндотелиальных клеток мелких сосудов.

Семейство интегринов. Наиболее важным для миграции клеток считается интегрин sVCAM-1, который связывается с ICAM-1 и ICAM-2 с помощью цепей LFA-1 (αLβ2). Экспрессия ICAM-1 индуцируется с помощью sVCAM-1. Интегрин (sVCAM-1) экспрессируется на лимфоцитах, лейкоцитах, эозинофилах. Он играет первостепенную роль в миграции нейтрофилов в очаге воспаления. Провоспалительные цитокины, особенно α-фактор некроза опухоли (α-ФНО), интерлейкины (ИЛ) 1, 4, 13 стимулируют выработку интегрина sVCAM-1 из лейкоцитов, вызывая его миграцию в очаг воспаления [4-7].

Селектины. Описаны 3 семейства селектинов: L, P и Е [8-11].

L-селектин экспрессируется на лимфоцитах и имеет прямое отношение к их миграции. Данный белок также представлен на лейкоцитах, нейтрофилах, моноцитах и других миелоидных клетках. L-селектин опосредует эффект «катящихся» нейтрофилов вдоль сосудистой стенки микроциркуляторного русла - феномен, который многие исследователи рассматривают как первый «шаг» адгезии лейкоцитов к эндотелию, что в свою очередь приводит к их накоплению в зоне воспаления.

Р-селектин экспрессируется на эндотелиальных клетках. Появление P-селектина на поверхности происходит очень быстро и также быстро снижается его уровень до базального в короткое время после стимуляции. Выработку Р-селектина стимулируют тромбин, гистамин, Н2О2. Он может действовать совместно с E-селектином, осуществляя на местах в ранний период воспаления специфическую адгезию нейтрофилов и моноцитов в участках острого процесса.

E-селектин экспрессируется эндотелиальными клетками после стимуляции цитокинами ИЛ-1α, α-ФНО.

С использованием молекул адгезии происходит миграция лейкоцитов к месту повреждения (воспаления) тканей. Она осуществляется в три этапа: 1 - адгезия к активированным эндотелиальным клеткам, к поверхности лейкоцитов; 2 - проникновение через эпителий; 3 - перемещение в направлении очага инфекции или воспаления под влиянием хемотаксиса [12, 13]. В процессе адгезии лейкоцитов в настоящее время выделяют 3 фазы. Первая фаза характеризуется тем, что движение лейкоцитов по венуле замедляется. Они как бы катятся по эндотелию, постепенно замедляя свое движение. Этот процесс обычно связан с взаимодействием селектинов, тормозящих движение лейкоцитов. Вторая фаза - активация, при которой лейкоциты подвергаются воздействию цитокинов, хемокинов и других агентов. Третья фаза - прикрепление. Она характеризуется полной остановкой движения, прикреплением лейкоцитов к клеткам эндотелия сосудов и подготовкой к проникновению в межэндотелиальное пространство. Этот эффект возникает благодаря взаимодействию многочисленных молекул адгезии. Сигналы, поступающие в лейкоцит при таком взаимодействии, оказывают дополнительное активирующее действие. Фазность экспрессии молекул адгезии на поверхности эпителиальных клеток определяет и фазность миграции клеток различного типа в очаг поражения. Так, считается, что именно ранняя экспрессия Е-селектина на поверхности эндотелиальных клеток обеспечивает адгезию к ним нейтрофилов. В дальнейшем именно нейтрофилы первыми мигрируют в очаг воспаления. Для моноцитов и некоторых лимфоцитов, мигрирующих после нейтрофилов, важную роль играет экспрессия на их поверхности молекул р2-интегринов (LFA-1 и CR-3). Они связываются с эндотелиальными адгезинами ICAM-1 и ICAM-2, которые в свою очередь экспрессируют sVCAM-1. Таким образом, нейтрофилы появляются в очаге острого воспаления на его ранней стадии; отчасти это обусловлено индукцией цитокинами экспрессии Е-селектина на поверхности эндотелия в этой области. Стимуляция клеток эндотелия in vitro такими цитокинами, как α-ФНО или ИЛ-1, индуцирует экспрессию Е-селектина спустя 4-12 ч, а через 24 ч она прекращается. Экспрессия Р-селектина происходит в течение очень короткого времени, при воздействии на эндотелий тромбина, гистамина, фактора активации тромбоцитов, компонентов системы комплемента и некоторых других стимулов.

В условиях in vitro индуцированная экспрессия ICAM-1 наблюдается в период от 8 до 96 ч после стимуляции, что соответствует более позднему поступлению в очаг воспаления лимфоцитов и моноцитов. Экспрессия sVCAM-1, как и ICAM-1, индуцируется в области воспаления, причем индукция этих двух молекул происходит синхронно.

В большинстве случаев острого воспаления внутрисосудистые перемещения лейкоцитов и их эмиграция занимают несколько часов. Как правило, первыми в очаг воспаления выходят нейтрофилы, они обнаруживаются в воспаленной ткани уже через 6-24 ч. Несколько позднее эмигрируют моноциты и лимфоциты (24-48 ч). Такая асинхронность эмиграции клеток обусловлена неодновременным появлением молекул адгезии и хемотаксических факторов, специфичных для разных лейкоцитов.

Исследования роли молекул адгезии в воспалении проводились главным образом у больных с системной красной волчанкой [14], различными формами ишемической болезни сердца [15]. Значительно меньше работ посвящено этой проблеме у больных с воспалительными заболеваниями кишечника (ВЗК). Так, В.В. Павленко и соавт. [16] оценили значение растворимых изоформ молекул адгезии клеток (ICAM-1, ICAM-2 и L-селектин) в период рецидива ЯК. Авторы установили, что концентрация ICAM-1, ICAM-2 и L-селектина в сыворотке крови имеет существенное значение для оценки активности иммунопатологического процесса при этом заболевании.

Цель исследования заключалась в определении значения молекул адгезии интегрина sVCAM-1 и селектинов P, E и L для оценки прогноза и эффективности терапии язвенного колита (ЯК) и болезни Крона (БК).

Материалы и методы

В отделении патологии кишечника ЦНИИГ обследовали 40 больных с ВЗК: 26 с ЯК и 14 с БК. Средний возраст больных составил 39,3±2,3 года (М±σ) - от 19 до 65 лет. У 13 больных ЯК был левосторонним, у 3 - субтотальным и у 10 - тотальным. В соответствии с Венской классификацией у 6 больных БК воспалительный процесс локализовался в терминальном отделе подвздошной кишки (L1), у 3 - в толстой кишке (L2) и у 5 - в тонкой и толстой кишках (L3). Фенотип БК у всех больных соответствовал воспалительной (люминальной) форме (В1).

У всех больных наблюдалось хроническое рецидивирующее гормонозависимое течение ВЗК длительностью от 5 до 8 лет (5,5±3,4 года). Индекс активности ЯК по Rachmilewitz в среднем составлял 9±1 балл. Индекс активности болезни Крона (CDAI) находился в пределах от 150 до 280 баллов.

В зависимости от особенностей терапии больные разделены на 3 группы. В 1-ю группу вошли 10 больных (ЯК у 7, БК у 3), которые длительно получали азатиоприн (АЗА) в дозе 2 мг/кг и глюкокортикостероиды (ГКС), во 2-ю группу - 16 больных (ЯК у 7 и БК у 9), получавшие инфликсимаб (ИНФ) в дозе 5 мг/кг по стандартной схеме (0, 2, 6 и далее каждые 8 нед), в 3-ю группу - 14 больных (ЯК у 11 и БК у 3), которым вводили мезенхимальные стромальные стволовые клетки (МССК) в количестве 150·108. МССК вводили капельно внутривенно в 200 мл изотонического раствора натрия хлорида с добавлением гепарина (10 ед/мл).

У всех больных при поступлении в клинику до и после лечения исследовали уровень лейкоцитов, палочкоядерный сдвиг, скорость оседания эритроцитов (СОЭ), С-реактивный белок (СРБ), определяли концентрацию молекул адгезии (L-селектин, Е-селектин, Р-селектин, а также интегрин sVCAM-1).

Исследования крови выполняли на полуавтоматическом гематологическом анализаторе ADVIA 60 («Bayer Health Care») и биохимическом анализаторе Olympus AU 400 c использованием специальных реактивов («Olympus», Германия). Уровень интегрина sVCAM-1, селектинов (ELAM) L, P, Е в сыворотке крови исследовали иммуноферментным методом с использованием тест-систем «Протеиновый контур» (С.-Петербург), Orgentec (Германия), Евроиммун, Ведалаб (Франция). Всем больным выполняли колонофиброскопию (КФС) с илеоскопией и гистологическим исследованием слизистой оболочки пораженных отделов кишечника. Эндоскопическое исследование осуществляли на видеосистеме Фуджинон EC-450WI5. Гистологическое исследование проводили с помощью световой микроскопии (система автоматического анализа видеоизображений «Cito-W», Dia-Morph).

Статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью программы Статистика 6,0 с применением методов малых выборок: для анализа количественных признаков использовали критерий Стьюдента и парный критерий Стьюдента.

Результаты и обсуждение

У больных 1-й группы, получавших АЗА и ГКС, полная клиническая и эндоскопическая ремиссия не наступила: сохранялась диарея - стул до 2-3 раз в сутки с примесью крови, боли в животе в проекции ободочной кишки, лихорадка в вечернее время до 37,1-37,3 °С, масса тела увеличилась не более чем на 2-3 кг. В клинических анализах крови сохранялись увеличенная СОЭ (13±6,13 мм/ч), лейкоцитоз (8,93±1,21 тыс.), СРБ (15,02±7,87 мг/л) (табл. 1).

При эндоскопическом исследовании у всех больных сохранялись признаки активного воспаления слизистой оболочки кишки (СОК). CDAI составил 280±80 баллов. При морфологическом исследовании сохранялась воспалительная инфильтрация собственной пластинки, лейкоцитарная инфильтрация в подслизистом слое.

На рис. 1 показано влияние лечения на уровень молекул адгезии у больных 1-й группы.

Рисунок 1. Влияние стандартной терапии ГКС+АЗА на уровень молекул адгезии у больных с ВЗК. * - р<0,05; нд - различия недостоверны здесь и на рис. 3, 5.
Синтез растворимых молекул адгезии в сыворотке крови в нормальных условиях не происходит. Экспрессия наступает только при патологической активизации воспалительного процесса.

Исходный уровень селектинов у всех больных был повышенным: концентрация Е-селектина составляла в среднем 12,4±3,0 нг/мл , L-селектина -10,6±0,6 нг/мл, интегрина sVCAM-1 - 27,2±7,3 нг/мл, Р-селектина - 9,7±1,4 нг/мл. Через 2 мес лечения уровень Р-селектина снизился до 6,6±1,4 нг/мл (р<0,01). Уровень остальных молекул адгезии существенно не изменился. Так, концентрация Е-селектина составляла 11,4±2,5 нг/мл (р=0,35), L-селектина - 9,2±1,8 нг/мл (р=0,01), sVCAM-1 - 28,2±5,3 нг/мл (р=0,7).

У больных, получавших ИНФ, через 2 мес наступила клиническая и эндоскопическая ремиссия: стул стал оформленный 2-3 раза в сутки, исчезла примесь крови, стихли боли в животе, снизилась до нормы температура тела, масса тела увеличилась на 2-3 кг. У всех больных удалось снизить постепенно дозу преднизолона до 15-20 мг/сут вплоть до полной отмены при условии сохранения ремиссии ВЗК. В клинических анализах крови число лейкоцитов уменьшилось с 10±1,03 до 6,68±0,71 тыс., СОЭ снизилась с 35,43±7,30 до 17,86±3,16 мм/ч, исчез палочкоядерный сдвиг с 5,30±0,78 до 1,73±0,29%, уровень СРБ снизился до нормы с 13,89±2,58 до 4,33±0,86 мг/л. CDAI составил 200±40 баллов.

У всех больных уменьшились воспалительные изменения по данным как эндоскопии, так и гистологического исследования CОК (рис. 2).

Рисунок 2. Слизистая оболочка толстой кишки у больного колитом Крона. а - активная фаза: лейкоцитарная инфильтрация собственной пластинки, распространение инфильтрации на слизистый и подслизистый слой; б - фаза ремиссии после терапии ИНФ: уменьшение воспалительной инфильтрации собственной пластинки, положительная динамика - лейкоцитарная инфильтрация в подслизистом слое.

На рис. 3 отражено влияние лечения ИНФ на уровень молекул адгезии у больных 2-й группы.

Рисунок 3. Влияние терапии ИНФ на уровень молекул адгезии у больных с ВЗК. * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001.
До лечения уровень каждого из селектинов, как и у больных 1-й группы, был повышен: Е-селектин - 8,5±1,4 нг/мл, L-селектин - 9,9±0,6 нг/мл, интегрин sVCAM-1 - 17,3±5,8 нг/мл и Р-селектин - 11,3±0,8 нг/мл. После лечения достоверно снизилась концентрация Р-селектина, Е-селектина, и sVCAM-1 до 8,9±1,0 (р<0,05), 5,5±1,7 (р<0,01) и 9,5±4,4 нг/мл (р<0,001) соответственно. Уровень L-селектина немного снизился, но остался повышенным - 9,6±0,8 нг/мл (р>0,1).

У больных 2-й группы при эндоскопическом исследовании через 2 мес после введения МССК отмечалось уменьшение воспалительных изменений СОК (табл. 2).

При гистологическом исследовании также констатировано уменьшение воспаления: крипты приобретали обычную глубину и форму, эпителиальная выстилка их содержала большее количество бокаловидных клеток (рис. 4).
Рисунок 4. Слизистая оболочка толстой кишки у больного ЯК. а - активная фаза: диффузная лейкоцитарная инфильтрация собственной пластинки, деформация крипт; б - фаза ремиссии после введения МССК: уменьшение воспалительной инфильтрации собственной пластинки, восстановление формы крипт, на отдельных участках отмечается атрофия крипт.

У 14 больных 3-й группы, получивших МССК, также достигнута клиническая и эндоскопическая ремиссия (табл. 3).

Прекратилась диарея, исчезла примесь крови в кале, стихли боли в животе, исчезла лихорадка, у всех больных увеличилась масса тела на 3-5 кг. В клиническом анализе крови число лейкоцитов уменьшилось с 12,76±1,24 до 6,98±0,92 тыс., СОЭ - с 27,9±8,80 до 5,63± 1,34 мм/ч, исчез палочкоядерный сдвиг с 9,60±1,17 до 2,55±0,68%. Уровень СРБ снизился с 20,77±8,40 до 3,69±0,81 мг/л. CDAI составил 150±30 баллов.

Уровень молекул адгезии у больных с ВЗК до и после введения МССК представлен на рис. 5.

Рисунок 5. Влияние введения МССК на уровень молекул адгезии у больных с ВЗК. * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001.
До лечения уровень каждого из селектинов был повышенным: Е-селектин - 10,1±3,3 нг/мл, L-селектин - 9,05±0,5 нг/мл, интегрин sVCAM-1 - 13,9±4,4 нг/мл и Р-селектин - 12,2±1,8 нг/мл. После введения МССК достоверно снизился уровень Р-селектина (6,9±1,1 нг/мл; р<0,001), Е-селектина (5,7± 1,3 нг/мл; р<0,001); незначительно снизился уровень интегрина sVCAM-1 (12,2±2,2 нг/мл; р>0,1); концентрация L-селектина практически не изменилась (8,9±0,5 нг/мл; р<0,05).

В табл. 4 отражена концентрация молекул адгезии в сыворотке крови у больных 3 групп до и после лечения.

Согласно представленным данным после стандартной терапии уровни Е-селектина, L-селектина и sVCAM-1 оставались повышенными, незначительно снизился уровень Р-селектина. После индукционной терапии ИНФ достоверно снизился уровень Р-селектина, Е-селектина, интегрина sVCAM-1, отражающих острую фазу воспаления СОК. Концентрация L-селектина незначительно снизилась, так как данный показатель отражает хроническое воспаление СОК. При введении МССК достоверно снизился уровень Р-селектина, Е-селектина и обозначилась тенденция к снижению уровня интегрина sVCAM-1. Концентрация L-селектина практически не изменилась. Различия уровней молекул адгезии в группах до и после лечения оказались достоверными. Достоверны различия между концентрациями молекул адгезии у больных, получавших ИНФ и МССК, по сравнению с показателями у больных, получавших ГКС и АЗА.

Заключение

При стандартной терапии у больных с ВЗК наряду с сохраняющимися клинико-лабораторными и эндоскопическими признаками активности воспаления остается повышенным уровень молекул адгезии, что подтверждает недостаточный противовоспалительный эффект ГКС и АЗА. Применение ИНФ способствовало как наступлению клинико-эндоскопической ремиссии ВЗК, так и достоверному снижению уровней P-селектина, E-селекти­на и интегрина sVCAM-1, участвующих в формировании и подавлении воспалительной реакции в СОК. Введение МССК вызывает достоверное снижение уровней Р-селектина, Е-селектина и тенденцию к снижению интегрина sVCAM-1, так как последний обеспечивает более позднее поступление в очаг воспаления лимфоцитов и моноцитов, что требует длительного применения МССК с целью достижения более глубокой ремиссии заболевания.

Уровни P-селектина, E-селектина, интегрина sVCAM-1, отражающие острую фазу воспаления, снижались после индукционной терапии ИНФ. Уровень L-селектина, являясь отражением хронического аутоиммунного воспаления, после введения МССК и индукционной терапии ИНФ практически не снижался. Поэтому концентрация L-селектина может служить маркером хронического воспаления и показателем продолжительности противовоспалительной терапии, что имеет прогностическое значение.

Таким образом, P-селектин, E-селектин, L-селектин, интегрин sVCAM-1 являются современными маркерами воспаления и могут использоваться для оценки качества клинико-эндоскопической ремиссии и прогноза течения ВЗК.

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо со ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail

Мы используем файлы cооkies для улучшения работы сайта. Оставаясь на нашем сайте, вы соглашаетесь с условиями использования файлов cооkies. Чтобы ознакомиться с нашими Положениями о конфиденциальности и об использовании файлов cookie, нажмите здесь.