Антибактериальный эффект иммуномодулятора на основе композиции мурамилпептидов при хроническом генерализованном пародонтите

В настоящее время активно изучаются механизмы врожденного иммунитета, играющие ключевую роль в патогенезе пародонтита. Система врожденного иммунитета основана на клеточных механизмах быстрого распознавания патогенных микробов как инородных тел и их уничтожения.

При лечении тяжелых форм пародонтита остается крайне актуальной проблема поиска иммунотропных препаратов, стимулирующих собственный антибактериальный ответ организма [1, 2]. Одним из инструментов управления системой врожденного иммунитета могут быть иммуномодуляторы микробного происхождения, содержащие в своем составе патоген-ассоциированные молекулярные паттерны (PAMPs), распознавание которых NOD1- и NOD2- рецепторами клеток врожденного иммунитета ведет к активации системы врожденного иммунитета [3, 4].

Эпителий слизистой оболочки пародонта наряду с другими клетками, участвующими в иммунном ответе, экспрессирует образ-распознающие рецепторы врожденного иммунитета (toll- и NOD-рецепторы). Это способствует выделению большого количества эффекторных молекул (цитокинов, хемокинов, противомикробных пептидов), которые запускают воспалительный ответ в пародонте в целях уничтожения патогенов.

Новый иммуномодулирующий препарат на основе композиции мурамилпептидов обладает свойствами активирования показателей врожденного иммунитета как через повышение функциональной активности естественных киллеров (NK-клеток), так и путем стимулирования образования альфа- и бета-дефензинов — антимикробных пептидов нейтрофилов, активируя клеточный и гуморальный иммунитет [5].

Препарат не действует непосредственно на микроорганизмы, поэтому исключается возможность формирования антибиотикорезистентной микробиоты, что в настоящее время является одной из существенных проблем в медицине.

Иммунопатологические процессы в тканях пародонта усугубляются из-за мощного иммуноподавляющего действия пародонтопатогенной микробиоты, которое нарастает по мере утяжеления процесса в пародонте [6].

Самыми агрессивными микроорганизмами биопленки при пародонтите являются Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum [6].

Наличие Porphyromonas gingivalis в пародонтальном кармане является предиктором прогрессирования заболевания, и между количеством этого микроорганизма и глубиной кармана установлена высокая степень положительной корреляции [6].

В последнее время в поле зрения ученых попал пародонтопатоген Fusobacterium nucleatum, который играет роль в поражении жизненно важных органов [7, 8].

Представленная информация обосновывает цель настоящего исследования — изучить возможность повышения эффективности лечения хронического генерализованного пародонтита за счет включения в лечебный комплекс нового отечественного иммуномодулирующего препарата на основе композиции мурамилпептидов.

В исследование были включены 40 пациентов в возрасте от 25 до 64 лет с хроническим генерализованным пародонтитом тяжелой степени.

Критериями исключения пациентов из исследования были:

1. Наличие острых или находящихся в стадии обострения хронических инфекционных заболеваний (включая СПИД, гепатит В и С, сифилис, туберкулез); сахарный диабет; аутоиммунные заболевания; онкологические заболевания; сердечно-сосудистые заболевания; заболевания крови и кроветворных органов; длительная гормональная терапия кортикостероидами; беременность и кормление грудью; психические заболевания, а также проявления инфекционных заболеваний на момент осмотра.

2. Отягощенный аллергологический анамнез.

Пациенты были разделены в 2 равные группы: основную и контрольную. Мы намеренно не применяли градацию пациентов по возрастным и гендерным группам, поскольку в целях последующей статистической обработки в соответствии с требованиями количественного формирования групп наблюдения это потребовало бы большого количества пациентов, что сделало бы невыполнимой работу в рамках одного исследования.

В основной группе пациентам снимали зубные отложения с помощью ультразвукового аппарата Piezon-Master-400 и полировали поверхности корней зубов с помощью пародонтальных боров SCALING & ROOTPLANNING, а также проводили обучение правилам гигиены рта с последующим контролем. В течение первой недели контроль гигиены осуществлялся 1 раз в 3 дня, затем 1 раз в неделю, пока не удавалось добиться идеального уровня гигиены рта. Пациентам основной группы назначали внутримышечные инъекции препарата на основании мурамилпептидов (полимурамил) по схеме: 5 внутримышечных инъекций в дозе 200 мкг в течение 5 дней, 1 инъекция в день. Пациентам контрольной группы проводили обучение правилам гигиены рта, снятие зубных отложений, полирование поверхностей корней зубов.

Клиническое состояние пародонта определяли на основании пародонтальных индексов: индекса кровоточивости Muhlemann в модификации Cowell (1975), индекса РМА в модификации Parma (1960), а также с помощью определения индекса зубного налета Sillness—Loe (1963).

У всех пациентов изучали содержимое пародонтального кармана и проводили культуральное исследование, включающее выявление условно патогенных микроорганизмов с их идентификацией. Проводили ПЦР-диагностику содержимого пародонтального кармана на базе ООО «Научно-производственной фирмы (НПФ) «Литех» с использованием теста качественного анализа, который позволил установить наличие патогена и его локализацию в клинически значимом титре. Амплификацию видоспецифических фрагментов ДНК Porphyromonas gingivalis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Treponema denticola, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas endodontalis, Tannerella forsythia осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием готовых специфических праймеров в многоканальном амплификаторе «Терцик МС2» (НПФ «ДНК-Технология», Россия).

Математическую и статистическую обработку полученных данных проводили в электронных таблицах Excel офисного пакета Microsoft с использованием встроенных стандартных математических и статистических подпрограмм.

Критериями успешного лечения пародонтита считали:

1. Снижение значений клинических индексов, отсутствие визуальных признаков воспаления: гиперемии, отека десны, снижение кровоточивости десны при зондировании (при определении индекса Muhlemann).

2. Уменьшение или полное устранение представителей пародонтопатогенной микробиоты из пародонтального кармана.

Наиболее распространенными среди обнаруженных пародонтопатогенов были бактерии Porphyromonas gingivalis (80%), Tanerella forsythia (80%), затем Aggregatibacter actinomycetemcomitans (60%), Fusobacterium nucleatum (60%), Porphyromonas endodontalis (50%) и Treponema Denticola (65%). Исходная частота выявления микроорганизмов в среднем составила от 45% до 80% от общего количества исследуемых пациентов.

Porphyromonas gingivalis является наиболее устойчивым микроорганизмом у пациентов с пародонтитом тяжелой степени, и до лечения он идентифицировался в содержимом пародонтальных карманов 80% обследованных пациентов обеих групп. Tanerella forsythia обнаружили у 80% пациентов основной и в 75% случаев контрольной группы.

Aggregatibacter actinomycetemcomitans исходно выявили у 60% больных основной и контрольной групп, Prevotella intermedia — у 50% в основной и 45% — в контрольной группе.

Fusobacterium nucleatum обнаружили в 60% случаев в основной группе и в 50% — в контрольной. Treponema denticola — в 65% в основной и контрольной. Porphyromonas endodontalis — в 50% случаев и в основной, и в контрольной группах.

Спустя 7 дней после начала лечения в основной группе пациентов состав пародонтопатогенной микробиоты пародонтальных карманов значительно изменился: Aggregatibacter actinomycetemcomitans выявили в 35% случаев, в то время как в контрольной группе — в 50% случаев. Через 21 день в основной группе этот микроорганизм обнаружили у 25%, а в контрольной — у 45% пациентов (рис. 1, 2 на цв. вклейке).

Рис. 1. Динамика частоты обнаружения пародонтопатогенных микроорганизмов в пародонтальных карманах пациентов основной группы, %.

Рис. 2. Динамика частоты обнаружения пародонтопатогенных микроорганизмов в пародонтальных карманах пациентов контрольной группы, %

Еще более показательной была разница содержания Porphyromonas gingivalis в основной и контрольной группах. В основной группе через 7 дней после начала лечения частота его обнаружения снизилась с 80 до 40%, а через 21 день — до 30%. В контрольной группе через 7 дней его определили у 50% пациентов, а через 21 день данный показатель увеличился до 60%.

Таким образом, иммуномодулятор на основе композиции мурамилпептидов, применяемый в основной группе, стимулировал собственные антибактериальные механизмы макроорганизма, а в контрольной группе антимикробного воздействия оказалось недостаточно, и через 21 день снова произошел рост пародонтопатогенной флоры (рис. 2).

В контрольной группе с 7-го до 21-го дня после начала лечения вторично произошел рост и других пародонтопатогенов. Так, Tanerella forsythia обнаружен у 75% в начале лечения, 70% — на 7-й день и 75% — на 21-й день. В основной группе Tanerella forsythia, который был исходно выявлен в 65% случаев, на 7-й и на 21-й день определили всего в 20% случаев.

Исходное содержание Porphyromonas endodontalis у пациентов контрольной группы выявили в 50% случаев. На 7-й день оно снизилось до 40% — на 21-е сутки данный показатель остался неизменным. В основной группе Porphyromonas endodontalis, который исходно обнаружили у 50% пациентов, через 7 дней выявили только у 25%, а через 21 день — у 20% (рис. 1, 2).

Главной мишенью действия препарата на основе мурамилпептидов являются иммунотропные клетки, основная функция которых состоит в распознавании и уничтожении патогенов и нормализации клинического состояния. Активированные моноциты и макрофаги начинают синтезировать про- и противовоспалительные цитокины; следствием этого является активация как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета.

В группе с применением нового препарата на основе комплекса мурамилпептидов помимо снижения клинических проявлений воспаления в тканях пародонта происходит существенное подавление пародонтопатогенной микробиоты. Такой эффект объясняется способностью композиции мурамилпептидов мобилизовать механизмы врожденного иммунитета по отношению к основным пародонтопатогенным микроорганизмам. Обнаруженное в ходе исследования антибактериальное свойство препарата позволяет пересмотреть безусловную необходимость традиционных назначений пациентам антибиотиков, которые наряду с положительным действием вызывают ряд серьезных побочных эффектов.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

The authors declare no conflict of interests.