Антиоксидантная терапия для коррекции нитрозативного стресса при воспалительных заболеваниях полости носа

Развивающийся при воспалительных заболеваниях полости носа нитрозативный стресс реализуется за счет высокореактивных метаболитов оксида азота (NO), повышенная концентрация которых существенно влияет на секрецию и пролиферацию клеток эпителия, механизмы апоптоза и мукоцилиарного клиренса [1—3]. По данным авторов, умеренное повышение концентрации NO стимулирует секрецию слизи и активирует движения ресничек мерцательного эпителия (МЭ), что способствует мукоцилиарному клиренсу, элиминации патогенов [1, 4, 5]. Кроме того, активные радикалы азота участвуют во всех фазах воспалительного процесса: индуцируют нейтрофильный и макрофагальный фагоцитоз бактерий и некротического детрита, влияют на продукцию факторов ангиогенеза, усиливают секрецию цитокинов, стимулирующих рост фибробластов [6—9].

Радикалы азота могут оказывать как защитное, так и повреждающее действие на клетки. Значительное и длительное повышение содержания метаболитов NO нарушает репаративные процессы при воспалении за счет токсического повреждения эпителия. В результате разрушаются межклеточные связи, усиливается отек из-за пареза сосудов и увеличения их проницаемости [3, 10]. При недостатке метаболитов NO снижается синтез коллагена в ране, уменьшается прочность рубца, что также приводит к извращению нормального хода репаративной регенерации [7, 8].

Известно, что антиоксиданты снижают концентрацию активных радикалов азота, тем самым открывают возможность регуляции биоактивности NO [11—13].

Таким образом, динамическое исследование концентрации метаболитов NO в носовом секрете (НС) является важным показателем активности воспаления, эффективности антиоксидантной терапии.

Цель исследования — оценить состояние нитрозативного стресса и эффективность антиоксидантной терапии у больных с воспалительными заболеваниями полости носа.

После получения информированного согласия в исследование были включены 72 пациента с острым риносинуситом (ОРС) средней степени тяжести и 84 пациента после септопластики с вазотомией нижних носовых раковин в возрасте 18—50 лет как мужского, так и женского пола. Больные были распределены на 4 группы по фактору, вызвавшему воспаление (инфекция, травма), и методу лечения (рисунок).

Клинические группы включенных в исследование пациентов.

Стандартное лечение ОРС и постоперационный уход осуществляли согласно утвержденным клиническим рекомендациям. Также для улучшения репарации слизистой оболочки (СО) полости носа всем больным местно был добавлен репарант — 0,25% р-р дезоксирибонуклеата натрия — Деринат (ООО «ФЗ Иммунолекс», Россия). В качестве препарата с антиоксидантными свойствами для больных 2-й и 4-й групп был выбран 15% раствор диметилового эфира 1,1-диметил-3-оксобутилфосфоновой кислоты — Димефосфон (ОАО «Татхимпрепараты», Россия) в связи с возможностью его топического применения: применяли на турундах в полость носа дважды в день по 15 мин в течение 5 сут. В контрольную группу включили 33 практически здоровых лица в возрасте 18—50 лет.

Соблюдение биоэтических норм в ходе клинического исследования, соответствие этическим стандартам Хельсинкской декларации 1975 г. и ее пересмотренным вариантам (2000 г., 2008 г., 2013 г.) подтверждено заключением комиссии (протокол №3 от 09.06.2021, ГУ ЛНР «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки» ЛНР).

В НС при первичном осмотре, затем на 5, 10, 21-е сутки определяли общую концентрацию нитратов, восстановленных до нитритов цинковой пылью и сернокислым марганцем, и нитритов путем диазотирования с добавлением реактива Грисса фотометрическим методом.

Статистический анализ полученных данных проводили с помощью программы Statistica 8.0 (StatSoft, Inc., США). Гипотезу нормальности распределения в выборках проверяли с помощью критерия W Шапиро—Уилка. Непараметрические количественные данные описаны медианой (Me) и интерквартильным размахом [Q₁; Q₃]. При сравнении двух независимых групп использовали непараметрический критерий Манна—Уитни, зависимых групп — критерий Вилкоксона (p≤0,05).

Установлено, что в НС практически здоровых людей суммарная концентрация метаболитов NO составляла 1056,7 [984,4; 1132,1] мкМ. У больных ОРС обеих групп значения статистически значимо (p_1,2=0,001) превышали контрольные показатели без статистически значимых отличий между группами (таблица).

Динамика изменений концентрации метаболитов оксида азота в носовом секрете больных, Me [Q₁; Q₃], мкМ

Примечание. * — для сравнения между исследуемой и контрольной группами.

На 5-е сутки наблюдения концентрации метаболитов NO в НС у больных ОРС статистически значимо (p₁=0,005; p₂<0,001) снизились в обеих группах, причем во 2-й группе до контрольных значений (p=0,78). Между группами отмечалась статистически значимая (p_1—2=0,0001) разница (см. таблицу).

На 10-е сутки наблюдения концентрация метаболитов NO в НС больных ОРС статистически значимо (p=0,03) оставалась в 1-й группе выше контроля и значений во 2-й группе (p_1—2=0,0002). Следует обратить внимание, что на 21-е сутки наблюдения в 1-й группе без коррекции нитрозативного стресса после повышения на ранних сроках отмечалось снижение концентрации нитратов и нитритов: регистрировалась статистически значимая разница с контрольной группой (p=0,002).

В НС больных 3-й и 4-й групп до операции установлено, что концентрация метаболитов NO достоверно (p_3,4=0,0001) была меньше контрольных значений без статистически значимых отличий между группами (p_3—4=0,95). На 5-е сутки после операции отмечалось достоверное (p_3,4=0,0001) повышение концентрации метаболитов NO в НС в обеих группах. Наименьшие проявления нитрозолирующего стресса регистрировались в 4-й группе, где концентрация метаболитов NO не превышала контрольных значений (p=0,85) и отмечалась статистически достоверная (p_3—4=0,009) разница с 3-й группой (см. таблицу).

К 10-м суткам постоперационного периода отмечалось достоверное (p=0,005) снижение концентрации метаболитов NO в НС в 3-й группе до контрольных значений (p=0,56), в 4-й группе концентрация оставалась стабильной, на уровне контрольных значений. В 4-й группе на 21-е сутки постоперационного периода, как и в 1-й группе пациентов с ОРС было зарегистрировано достоверное (p=0,005) снижение концентрации метаболитов NO в НС до значений ниже контрольных.

Подводя итог, отмечаем, что в 1-й и 3-й группах, где больным не был назначен антиоксидант, на 5-е сутки отмечалась повышенная концентрация метаболитов NO в НС. На поздних сроках (21-е сутки) нитросидергическая система истощалась после активации, что проявлялось снижением концентрации нитратов и нитритов ниже контрольных значений. По данным литературы, длительное ухудшение метаболизма NO предрасполагает к хронизации воспалительного процесса, замедляет репаративную регенерацию [7, 13—15]. Во 2-й и 4-й группах, где проводилась медикаментозная коррекция нитрозативного стресса, у больных уже на 5-е сутки отмечалась нормализация концентрации активных радикалов без угнетения нитросидергической системы на поздних сроках.

У больных хроническим ринитом до операции было выявлено снижение концентрации метаболитов NO в НС, что говорит о нарушении гомеостаза СО носа, т.к. NO необходим для продукции эпителиальной слизи, ускорения движения ресничек эпителия, осуществления полноценного мукоцилиарного клиренса [3, 16]. По данным литературы, снижение содержания NO в выдыхаемом воздухе также отмечается при других заболеваниях, сопровождающихся резким угнетением мукоцилиарного клиренса (цилиарная дискинезия, муковисцидоз, дефицит α1-антитрипсина) [17—19]. На 5-е сутки после операции у пациентов отмечалось повышение концентрации метаболитов NO, что, по данным других авторов, приводит к вторичному повреждению эпителия, способствует сосудистым расстройствам в зоне альтерации, вызывает тканевую гипоксию, отек, усиливает метаболические сдвиги [3, 4]. Назначение антиоксиданта после операции в 4-й группе позволило уменьшить проявления нитрозативного стресса в раннем послеоперационном периоде. Антиоксидантная терапия должна быть назначена как можно раньше после воздействия повреждающего фактора, но длительность назначения необходимо контролировать исследованием метаболитов NO в динамике, поскольку значительное и длительное угнетение выработки NO может ухудшать регенерацию СО. Подобный подавляющий эффект антиоксидантной терапии был выявлен в эксперименте [20]. Зависимость эффективности назначения ингибиторов синтазы NO от стадии воспаления отмечена и другими авторами [11, 15, 21, 22].

1. У пациентов с ОРС и постоперационных больных на ранних сроках наблюдения отмечался рост концентрации метаболитов NO с последующим постепенным истощением нитросидергической системы.

2. Назначение антиоксидантной терапии в раннем периоде воспалительной реакции позволило уменьшить проявления нитрозативного стресса.

3. Динамическое исследование концентрации метаболитов NO в НС необходимо для коррекции длительности антиоксидантной терапии с целью избегания резкого и длительного угнетения выработки NO и ухудшения регенерации СО.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования — Берест И.Е., Селезнёв К.Г., Тананакина Т.П.

Сбор и обработка материала — Берест И.Е., Решетникова О.С.

Статистическая обработка данных — Берест И.Е., Тананакина Т.П.

Написание текста — Берест И.Е.

Редактирование — Берест И.Е., Решетникова О.С., Селезнёв К.Г., Тананакина Т.П.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.