
Современные подходы к дактилоскопии микробиома
Журнал: Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2025;43(4-2):33-41.
DOI: 10.17116/molgen20254304233
Прочитано: 1127 раз
Резюме
Исследования микробиома становятся все более актуальными как для медицины, так и для других социально значимых областей, включая сельское хозяйство, пищевую безопасность и экологию. Многие исследования ассоциируют дисбиотические изменения в микробиоме кишечника и других органов человека с развитием патологических состояний. В частности, показано, что изменения в составе микробиоты кишечника связаны с развитием сердечно-сосудистых и респираторных заболеваний, которые являются лидирующими причинами смерти в мире. Разработка методик для экспресс-скрининга комплексных изменений микробиома могут в будущем стать методиками выбора для ранней диагностики и мониторинга прогрессирования и эффективности терапии микробиом-ассоциированных заболеваний в клинико-диагностических центрах. В этой обзорной статье рассмотрены основные из предложенных на данный момент подходов к дактилоскопии микробиома, включая денатурирующий градиентный гель-электрофорез, температурный градиентный гель-электрофорез, полиморфизм длины терминального рестрикционного фрагмента, анализ межгенных спейсеров рибосомальной РНК, анализ конформационного полиморфизма одноцепочечной ДНК, ПЦР с гетерогенностью длины ампликона, цитометрическую дактилоскопию и высокоразрешающий анализ кривых плавления. Проведен сравнительный анализ преимуществ и недостатков этих методик, оценка потенциала их практического применения для экспресс-скрининга изменений композиции микробиома, а также предложены направления для дальнейших разработок в данной области.
Ключевые слова
- микробиом
- дактилоскопия микробиома
- экспресс-диагностика
- высокоразрешающий анализ кривых плавления
- цитометрическая дактилоскопия
- мониторинг изменений состава микробиома
- персонализированная медицина
Дата поступления: 01.10.2025
Дата принятия в печать: 15.10.2025
Дата публикации: 08.12.2025
- Singh AP. Genomic Techniques Used to Investigate the Human Gut Microbiota. IntechOpen eBooks. Published online June 16, 2021. https://doi.org/10.5772/intechopen.91808
- Amy Arabella Singh, Okpeku M. EMERGING METHODS OF HUMAN MICROBIOME ANALYSIS AND ITS FORENSIC APPLICATIONS: Reviews. Forensic science international Reports. 2024;9:100355-100355. https://doi.org/10.1016/j.fsir.2024.100355
- Sharma P, Bano A, Singh SP, Dubey NK, Chandra R, Iqbal HMN. Microbial fingerprinting techniques and their role in the remediation of environmental pollution. Cleaner Chemical Engineering. 2022;2:100026. https://doi.org/10.1016/j.clce.2022.100026
- Hou K, Wu ZX, Chen XY, et al. Microbiota in Health and Diseases. Signal Transduction and Targeted Therapy. 2022;7(135). https://doi.org/10.1038/s41392-022-00974-4
- Stadlbauer V, Engertsberger L, Komarova I, et al. Dysbiosis, gut barrier dysfunction and inflammation in dementia: a pilot study. BMC Geriatrics. 2020;20(1). https://doi.org/10.1186/s12877-020-01644-2
- Maini Rekdal V, Bess EN, Bisanz JE, Turnbaugh PJ, Balskus EP. Discovery and inhibition of an interspecies gut bacterial pathway for Levodopa metabolism. Science. 2019;364(6445):eaau6323. https://doi.org/10.1126/science.aau6323
- Horvath A, Rainer F, Bashir M, et al. Biomarkers for oralization during long-term proton pump inhibitor therapy predict survival in cirrhosis. Scientific Reports. 2019;9(1). https://doi.org/10.1038/s41598-019-48352-5
- Vich Vila A, Collij V, Sanna S, et al. Impact of commonly used drugs on the composition and metabolic function of the gut microbiota. Nature Communications. 2020;11(1):362. https://doi.org/10.1038/s41467-019-14177-z
- Synthetic gut microbiome: Advances and challenges. Computational and Structural Biotechnology Journal. 2021;19:363-371. https://doi.org/10.1016/j.csbj.2020.12.029
- Pandey P, Chowdhury D, Wang Y. Denaturing Gradient Gel Electrophoresis Approach for Microbial Shift Analysis in Thermophilic and Mesophilic Anaerobic Digestions. Gels. 2024;10(5):339-339. https://doi.org/10.3390/gels10050339
- Bayle S, Martinez-Arribas B, Jarraud S, et al. Development of a DGGE method to explore Legionella communities. Heliyon. 2020;6(1). https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2019.e03149
- Viglasky V. Polyacrylamide temperature gradient gel electrophoresis. Methods in Molecular Biology (Clifton, NJ). 2013;1054:159-171. https://doi.org/10.1007/978-1-62703-565-1_10
- Mohammadi P, Hamidkhani A, Asgarani E. Comparative Analysis of Denaturing Gradient Gel Electrophoresis and Temporal Temperature Gradient Gel Electrophoresis Profiles as a Tool for the Differentiation of Candida Species. Jundishapur Journal of Microbiology. 2015;8(10): e22249. https://doi.org/10.5812/jjm.22249
- Rafaela V, Keller R, Carolina A, Rodrigues J. Temperature Gradient Gel Electrophoresis as a Valuable Accessory Tool for Assessment of Dysbiosis in Crohn’s Disease. Advances in Microbiology. 2016;06(08):549-554. https://doi.org/10.4236/aim.2016.68055
- Fan L, Zhu S, Liu D, Ni J. Decolorization of 1-amino-4-bromoanthraquinone-2-sulfonic acid by a newly isolated strain of Sphingomonas herbicidovorans. International Biodeterioration & Biodegradation. 2009;63(1):88-92. https://doi.org/10.1016/j.ibiod.2008.07.004
- Gryta A, Frąc M. Methodological Aspects of Multiplex Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism-Technique to Describe the Genetic Diversity of Soil Bacteria, Archaea and Fungi. Sensors. 2020;20(11):3292. https://doi.org/10.3390/s20113292
- Connon SA, Adisorn Tovanabootr, Dolan ME, Vergin KL, Giovannoni SJ, Semprini L. Bacterial community composition determined by culture-independent and -dependent methods during propane-stimulated bioremediation in trichloroethene-contaminated groundwater. 2005;7(2):165-178. https://doi.org/10.1111/j.1462-2920.2004.00680.x
- Kiesel B, Balcke GU, Dietrich J, Vogt C, Geyer R. Microbial community shifts as a response to efficient degradation of chlorobenzene under hypoxic conditions. Biodegradation. 2008;19(3):435-446. https://doi.org/10.1007/s10532-007-9149-z
- Koch C, Günther S, Desta AF, Hübschmann T, Müller S. Cytometric fingerprinting for analyzing microbial intracommunity structure variation and identifying subcommunity function. Nature Protocols. 2013;8(1):190-202. https://doi.org/10.1038/nprot.2012.149
- Zimmermann J, Hübschmann T, Schattenberg F, et al. High‐resolution microbiota flow cytometry reveals dynamic colitis‐associated changes in fecal bacterial composition. European Journal of Immunology. 2016;46(5):1300-1303. https://doi.org/10.1002/eji.201646297
- Koch C, Müller S. Personalized microbiome dynamics — Cytometric fingerprints for routine diagnostics. Molecular Aspects of Medicine. 2018;59:123-134. https://doi.org/10.1016/j.mam.2017.06.005
- Susanna van Gelder, Röhrig N, Florian Schattenberg, et al. A cytometric approach to follow variation and dynamics of the salivary microbiota. Methods. 2017;134-135:67-79. https://doi.org/10.1016/j.ymeth.2017.08.009
- Kupschus J, Janssen S, Hoek A, et al. Rapid detection and online analysis of microbial changes through flow cytometry. Cytometry Part A: The Journal of the International Society for Analytical Cytology. 2023;103(5):419-428. https://doi.org/10.1002/cyto.a.24704
- Wang Y, Wei J, Zhang W, et al. Gut dysbiosis in rheumatic diseases: A systematic review and meta-analysis of 92 observational studies. eBioMedicine. 2022;80. https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2022.104055
- Schmiester M, Maier R, Riedel R, et al. Flow cytometry can reliably capture gut microbial composition in healthy adults as well as dysbiosis dynamics in patients with aggressive B-cell non-Hodgkin lymphoma. Gut microbes. 2022;14(1):2081475. https://doi.org/10.1080/19490976.2022.2081475
- Erali M, Voelkerding KV, Wittwer CT. High resolution melting applications for clinical laboratory medicine. Experimental and Molecular Pathology. 2008;85(1):50-58. https://doi.org/10.1016/j.yexmp.2008.03.012
- Gundry CN, Vandersteen JG, Reed GH, Pryor RJ, Chen J, Wittwer CT. Amplicon Melting Analysis with Labeled Primers: A Closed-Tube Method for Differentiating Homozygotes and Heterozygotes. Clinical Chemistry. 2003;49(3):396-406. https://doi.org/10.1373/49.3.396
- Tong SYC, Giffard PM. Microbiological Applications of High-Resolution Melting Analysis. Journal of Clinical Microbiology. 2012;50(11):3418-3421. https://doi.org/10.1128/jcm.01709-12
- Wittwer CT, Reed GH, Gundry CN, Vandersteen JG, Pryor RJ. High-resolution genotyping by amplicon melting analysis using LCGreen. Clinical Chemistry. 2003;49(6 Pt 1):853-860. https://doi.org/10.1373/49.6.853
- Borkowska M, Michał Kułakowski, Myszka K. High-Resolution Melting Analysis Potential for Saccharomyces cerevisiae var. boulardii Authentication in Probiotic-Enriched Food Matrices. BioTech. 2024;13(4):48-48. https://doi.org/10.3390/biotech13040048
- Parlapani FF, Syropoulou F, Tsiartsafis A, et al. HRM analysis as a tool to facilitate identification of bacteria from mussels during storage at 4°C. Food Microbiology. 2020;85:103304. https://doi.org/10.1016/j.fm.2019.103304
- Syropoulou F, Parlapani FF, Bosmali I, Madesis P, Boziaris IS. HRM and 16S rRNA gene sequencing reveal the cultivable microbiota of the European sea bass during ice storage. International journal of food microbiology. 2020;327:108658. https://doi.org/10.1016/j.ijfoodmicro.2020.108658
- Anisimova EA, Mirgazov DA, Dodonova EA, Elizarova IA, Pankova EV, Osyanin KA. Use of HRM-Analysis of the Melting Curves Obtained after Amplification of VNTR-Loci for Identification and Differentiation of Brucella Strains. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2024;(4):42-49. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2023-4-42-49
- Ania Ahani Azari, Reza Amanollahi, Razi Jafari Jozani, Trott DJ, Farhid Hemmatzadeh. High-resolution melting curve analysis: a novel method for identification of Mycoplasma species isolated from clinical cases of bovine and porcine respiratory disease. Tropical Animal Health and Production. 2019;52(3):1043-1047. https://doi.org/10.1007/s11250-019-02098-4
- Miller M, Zorn J, Brielmeier M. High-Resolution Melting Curve Analysis for Identification of Pasteurellaceae Species in Experimental Animal Facilities. Tseng CP, ed. PLOS ONE. 2015;10(11):e0142560. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0142560
- Sanaz Dehbashi, Hamed Tahmasebi, Alikhani MY, Fariba Keramat, Arabestani MR. Optimization and development of high-resolution melting curve analysis (HRMA) assay for detection of New Delhi metallo-β-lactamase (NDM) producing Pseudomonas aeruginosa. AIMS Microbiology. 2022;8(2):178-192. https://doi.org/10.3934/microbiol.2022015
- Kuang Z, Huang H, Chen L, et al. Development of a High-Resolution Melting Method for the Detection of Clarithromycin-Resistant Helicobacter pylori in the Gastric Microbiome. Antibiotics. 2024;13(10):975-975. https://doi.org/10.3390/antibiotics13100975
- Aralar A, Goshia T, Ramchandar N, et al. Universal Digital High-Resolution Melt Analysis for the Diagnosis of Bacteremia. The Journal of molecular diagnostics : JMD. 2024;26(5):349-363. https://doi.org/10.1016/j.jmoldx.2024.01.013
- Hossein Kafi, Emaneini M, Halimi S, Hossein Ali Rahdar, Fereshteh Jabalameli, Reza Beigverdi. Multiplex high-resolution melting assay for simultaneous detection of five key bacterial pathogens in urinary tract infections: A pilot study. Frontiers in Microbiology. 2022;13. https://doi.org/10.3389/fmicb.2022.1049178
- Khosravi AD, Hossein Meghdadi, Hashemzadeh M, Alami A, Tabandeh MR. Application of a new designed high resolution melting analysis for mycobacterial species identification. BMC Microbiology. 2024;24(1). https://doi.org/10.1186/s12866-024-03361-x
- Boussina A, Lennart Langouche, Obirieze AC, et al. Machine learning based DNA melt curve profiling enables automated novel genotype detection. BMC Bioinformatics. 2024;25(1). https://doi.org/10.1186/s12859-024-05747-0
- Вихрова С.Ю., Лобанова М.А., Демкин В.В., Казаков А.А., Балаж И.А. Профилирование микробиома кишечника человека на основе высокоразрешающего анализа кривых плавления продуктов амплификации участка гена 16S рРНК. Биотехнология. 2025;41(4):51-54. https://doi.org/10.56304/S0234275825040155
Рекомендуем статьи по данной теме:
Предиктивная эпилептология: формирование новой парадигмы управления эпилептическими приступами.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2026;126(5):14-20
Роль генетических полиморфизмов в развитии и прогрессировании варикозной болезни.Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. 2026;19(3):46-52
Полиморфизм гена OPRD1 (rs4654327) как потенциальный предиктор эффективности терапии пролонгированным налтрексоном при алкогольной зависимости.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2026;126(4):56-61
Антибиотикотерапия у детей при заболеваниях ЛОР-органов.Российская ринология. 2026;34(1):54-62
Особенности микробиоты слизистой оболочки гортани у пациентов с хроническим гиперпластическим ларингитом (обзор литературы).Вестник оториноларингологии. 2026;91(1):64-69
Нарушения репаративной регенерации при остром аппендиците у пациентов разного возраста.Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2026;(2):73-84
Применение искусственного интеллекта в профилактике хронических неинфекционных заболеваний: систематический обзор публикаций 2022—2025 гг.Профилактическая медицина. 2025;28(12):21-30
Классификация немелкоклеточного рака легкого по версии ВОЗ, 2021: от морфологии к персонализированной терапии.Архив патологии. 2026;88(1):60-67
Роль кишечной микробиоты в процессах старения.Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2025;(11-2):67-73
Микробиота кишечника: роль в здоровье человека и потенциал для персонализированной медицины.Доказательная гастроэнтерология. 2024;13(4):81-88

