Опыт использования депротеинизированного гемодеривата крови телят для фармакологической коррекции микроциркуляторных нарушений при хронических заболеваниях вен

Читать метаданные

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Оценить влияние депротеинизированного гемодеривата крови телят на содержание некоторых маркеров эндотелиальной дисфункции (ЭД) в плазме крови у пациентов с хронической венозной недостаточностью.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Проведено лабораторное исследование маркеров ЭД у 34 пациентов с проявлениями хронического заболевания вен (ХЗВ) классов С4—С5 по СЕАР, длительно страдающих варикозной болезнью, в том числе у 14 (41%) мужчин и 20 (59%) женщин. Средний возраст пациентов составил 49,0±6,5 года. Продолжительность ХЗВ варьировала от 3 до 24 лет (в среднем 8,9±4,3 года). Класс С4 ХЗВ по СЕАР выявлен у 19 (56%) больных, остальные 15 (44%) пациентов отнесены к классу С5. Депротеинизированный дериват крови телят вводили внутривенно в дозе 400 мг (10 мл) 1 раз в сутки на протяжении 10—14 сут. Уровни маркеров ЭД оценивали исходно (при поступлении) и после окончания курса терапии. Исследовали следующие биомаркеры: sE-селектин, sP-селектин, sICAM-1 и sVCAM-1.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Выявлено статистически значимое дискордантное изменение уровней селектинов — повышение уровня sE-селектина и снижение уровня sP-селектина, что можно рассматривать как первый этап купирования воспалительного ответа за счет снижения «быстрых» селектинов и временного сохранения активности Е-селектинов на фоне восстановления функции эндотелия микрососудов. Тенденция к уменьшению воспалительных эндотелий-опосредованных реакций подтверждается значимым снижением уровней sICAM-1 и sVCAM-1.

ВЫВОДЫ

При ХЗВ классов С4—С5 на фоне курсового приема депротеинизированного гемодеривата крови телят отмечается положительная динамика со стороны маркеров функции эндотелия — снижаются уровни sP-селектина, sICAM-1 и sVCAM-1 на фоне повышения уровня sE-селектина.

Ключевые слова:

хроническая венозная недостаточность

микроциркуляция

эндотелиальная дисфункция

депротеинизированный гемодериват крови телят

Авторы:

Гудымович В.Г.

ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России

Стойко Ю.М.

ФГБУ «Национальный медико-хирургический центр им. Н.И. Пирогова» Минздрава России

SPIN РИНЦ: 8835-0076
Scopus AuthorID: 57217151957
ORCID: 0000-0002-3394-5858

Федорович А.А.

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр терапии и профилактической медицины» Минздрава России;
ФГБУН Государственный научный центр Российской Федерации — Институт медико-биологических проблем Российской академии наук Минобрнауки России

ORCID: 0000-0001-5140-568X

Дата поступления:

18.08.2021

Дата принятия в печать:

30.09.2021

Список литературы:

Rabe E, Puskas A, Scuderi A, Fernandez Quesada F; VCP Coordinators. Epidemiology of chronic venous disorders in geographically diverse populations: results from the Vein Consult Program. Int Angiol. 2012;31(2):105-115.
Jantet G. RELIEF study: first consolidated European data. Reflux assEssment and quaLity of lIfe improvement with micronized Flavonoids. Angiology. 2000;51(1):31-37. https://doi.org/10.1177/000331970005100107
Guekh A, Skoog I, Edmundson S, Zakharov V, Korczyn AD. ARTEMIDA Trial (A Randomized Trial of Efficacy, 12 Months International Double-Blind Actovegin): A Randomized Controlled Trial to Assess the Efficacy of Actovegin in Poststroke Cognitive Impairment. Stroke. 2017;48(5):1262-1270. https://doi.org/10.1161/STROKEAHA.116.014321
Reichl F-X, Holdt LM, TeupserD, Schütze G, Metcalfe AJ, Hicke R, Högg C, Bloch W. Comprehensive Analytics of Actovegin and Its Effect on Muscle Cells. Int J Sports Med. 2017;38(11):809-818. https://doi.org/10.1055/s-0043-115738
Buchmayer F, Pleiner J, Elminger MW, Lauer G, Nell G, Sitte H. Actovegin: a biological drug for more than 5 decades. Wien Med Wochenschr. 2011;161 (3-4):80-88. https://doi.org/10.1007/s10354-011-0865-y
Reichel H, Weiss C, Leichtweiss HP. The effects of a blood extract on the oxygen uptake of isolated artificially perfused kidneys and skeletal muscles in rats. Arzneim-Forsch. 1965;15(756):757.
Kuninaka T, Senga Y, Senga H, Weiner M. Nature of enhanced mitochondrial oxidative metabolism by a calf blood extract. J Cell Physiol. 1991; 146(1):148-155.
Tisato V, Zauli G, Voltan R, Gianesini S, di Iasio MG, Volpi I, Fiorentini G, Zamboni P, Secchiero P. Endothelial cells obtained from patients affected by chronic venous disease exhibit a pro-inflammatory phenotype. PloS One. 2012;7(6):1-13.
Шевченко Ю.Л., Стойко Ю.М., Гудымович В.Г. Дисфункция и повреждение эндотелия (патофизиология, диагностика, клинические проявления и лечение). М.: Лика; 2015.
Шевченко Ю.Л., Стойко Ю.М., Гудымович В.Г., Черняго Т.Ю. Гликокаликс — определяющий фактор в развитии эндотелиальной венозной дисфункции и возможности ее коррекции. Ангиология и сосудистая хирургия. 2020;26(4):71-76.
Ibegbuna V, Nicolaides AN, Sowade O, Leon M, Geroulakos G. Venous elasticity after treatment with Daflon 500 mg. Angiology. 1997;48(1):45-49.
Jünger M, Steins A, Hahn M, Häfner HM. Microcirculatory Dysfunction in Chronic Venous Insufficiency (CVI). Microcirculation. 2000;7(6 Pt 2):3-12. https://doi.org/10.1111/j.1549-8719.2000.tb00145.x
Reichl FX, Högg C, Liu F, Schwarz M, Teupser D, Hickel R, Bloch W, Schweikl H, Thomas P, Summer B. Actovegin reduces PMA-induced inflammation on human cells. European Journal of Applied Physiology. 2020; 120:1671-1680. https://doi.org/10.1007/s00421-020-04398-2
Mansilha A, Sousa J. Pathophysiological mechanisms of chronic venous disease and implications for venoactive drug therapy. International Journal of Molecular Sciences. 2018;19(6):1669.
Fedorovich AA. Non-invasive evaluation of vasomotor and metabolic functions of microvascular endothelium in human skin. Microvascular Research. 2012;84(1):86-93. https://doi.org/10.1016/j.mvr.2012.03.011
Elmlinger MW, Kriebel M, Ziegler D. Neuroprotective and Anti-Oxidative Effects of the Hemodialysate Actovegin on Primary Rat Neurons in Vitro. Neuromolecular Med. 2011;13(4):266-274. https://doi.org/10.1007/s12017-011-8157-7
Асташкин Е.И., Глезер М.Г., Винокуров М.Г., Егорова Н.Д., Орехова Н.С., Новикова А.Н., Грачев С.В., Юринская М.Н., Соболев К.Э. Актовегин снижает уровень радикалов кислорода в образцах цельной крови пациентов с сердечной недостаточностью и подавляет развитие некроза перевиваемых нейронов человека линии SK-N-SH. Доклады Академии наук. 2013;448(2):232-235. https://doi.org/10.7868/S0869565213020278
Федорович А.А., Соболева Г.Н. Состояние системы микроциркуляции у больных с артериальной гипертензией в сочетании с ишемической болезнью сердца и нарушениями когнитивных функций на терапии Актовегином. Регионарное кровообращение и микроциркуляция. 2015;3(55):40-51.

Закрыть метаданные

Введение

Хронические заболевания вен (ХЗВ) относят к одной из наиболее распространенных групп заболеваний как в практике сосудистого хирурга, так и среди населения в целом. Масштабное международное эпидемиологическое исследование Vein Consult Program включило 91 545 пациентов из 20 стран мира, объединив данные, полученные врачами-терапевтами при первичном осмотре, а также результаты специализированного обследования врачами-флебологами. ХЗВ были выявлены у 83,6% лиц, включенных в исследование [1].

Хроническая венозная недостаточность (ХВН) как патологический синдром в основе своего развития имеет нарушение венозного оттока вследствие недостаточности клапанного аппарата вен с развитием рефлюкса либо возникновения препятствия в вышерасположенных отделах венозного русла, обусловленного тромбозом или экстравазальной компрессией. Однако, как показали результаты исследования RELIEF, в которое вошли более 10 тыс. пациентов из 23 стран, у пациентов с ХЗВ классов С0—С4 (CEAP) рефлюкс имел место только в 43% случаев [2]. Полученные результаты показывают, что у большинства пациентов на начальных стадиях ХЗВ преобладают не структурные, а функциональные нарушения венозной гемодинамики.

Понимание патофизиологических основ развития ХЗВ обусловило разработку медицинского компрессионного трикотажа, а достижения фармацевтической промышленности существенно расширили возможности медикаментозного лечения этой категории больных. Сегодня специалисты располагают целым арсеналом медикаментозных средств, которые включают декстраны, дезагреганты, антикоагулянты, ферментные и противовоспалительные препараты, флеботоники и препараты, улучшающие тканевый метаболизм. Наибольшее распространение в клинической практике получили веноактивные препараты на растительной основе (флавоноиды, сапонины и др.) и их синтетические аналоги, а роль средств метаболического механизма действия изучена недостаточно.

Несмотря на весьма продолжительное (более 20 лет) практическое использование депротеинизированного деривата крови телят в неврологии, комбустиологии, офтальмологии, спортивной медицине и полученный весьма обнадеживающий эффект от его применения для заживления трофических язв артериального и венозного генеза [3—8], данные о его эффективности у пациентов с ХЗВ в научной литературе представлены недостаточно.

Цель исследования — оценка эффективности депротеинизированного деривата крови телят при ХЗВ.

Материал и методы

Провели лабораторное исследование маркеров эндотелиальной дисфункции у пациентов, находившихся на лечении в стационаре одного дня Центрального клинико-диагностического комплекса ФГБУ «НМХЦ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России в период с 09.09.19 по 10.10.20 с проявлениями ХЗВ классов С4—С5, которые длительно страдали варикозной болезнью нижних конечностей. В группу вошли 34 пациента (14 мужчин и 20 женщин). Критерии включения и исключения представлены в табл. 1.

Таблица 1. Критерии включения в исследование и исключения из исследования

Критерии включения	Критерии исключения
Общесоматические критерии
Мужчины и женщины в возрасте от 20 до 70 лет	Ожирение с индексом массы тела более 40 кг/м²
	Сопутствующие общесоматические заболевания в стадии субкомпенсации и декомпенсации
	Психоневрологические заболевания
	Беременность
	Хроническая ишемия нижних конечностей
Социальные критерии
Добровольное информированное согласие на участие в исследовании	Отказ пациента участвовать в исследовании
Специальные критерии
Варикозная болезнь нижних конечностей (ВБНК)	Предшествующее оперативное вмешательство или склеротерапия на венах нижней конечности, подвергающейся лечению
	Тромбофлебит поверхностных вен в анамнезе
	Бессимптомная варикозная болезнь
	Вторичное варикозное расширение вен; ангиодисплазия; новообразования; лимфедема нижней конечности
	Наличие онкопатологии
	Использование лекарственных средств из группы флебопротекторов
	Злоупотребление алкоголем, лекарствами или употребление наркотиков в анамнезе

При госпитализации помимо стандартного обследования осуществляли забор крови из кубитальной вены пациента в утреннее время, непосредственно перед оперативным вмешательством, для определения лабораторных показателей эндотелиальной дисфункции (ЭД). Перед использованием размороженные образцы крови перемешивали, образцы сыворотки крови оставались стабильными как минимум в течение 8 мес при температуре 20°C. Уровни показателей маркеров ЭД оценивали врачи-лаборанты службы клинической лабораторной диагностики НМХЦ им. Н.И. Пирогова при помощи метода иммуноферментного анализа согласно инструкциям производителя иммуноферментных наборов. Исследовали следующие биомаркеры с помощью соответствующих наборов:

— sE-селектин (иммуноферментный набор для количественного определения растворимого sE-селектина человека BMS205 Human sE-selectin ELISA);

— sP-селектин (иммуноферментный набор для количественного определения растворимого человеческого sP-селектина BMS219-4 Human sP-selectin ELISA Kit);

— sICAM-1 (иммуноферментный набор BMS201 Human sICAM-1 ELISA Kit);

— sVCAM-1 (иммуноферментный набор BMS201 Human sICAM-1 ELISA Kit).

Депротеинизированный дериват крови телят вводили внутривенно в дозе 400 мг (10 мл) 1 раз в сутки на протяжении 10—14 сут. Уровни маркеров ЭД оценивали исходно (при поступлении) и после окончания курса терапии.

Статистический анализ. Обработку данных производили с применением программы Statistica 12.0 (StatSoft Inc., США). Для проверки нормальности распределения в совокупности использовали тест Шапиро—Уилка. Сравнение количественных показателей из совокупностей с нормальным распределением выполняли при помощи t-критерия Стьюдента для двух зависимых и независимых выборок. Количественные данные представлены в виде средних значений и ошибки среднего (M±m) или медианы (Ме) с межквартильным диапазоном [Q₁; Q₃]. При распределении данных, отличном от нормального, для проверки статистических гипотез при сравнении числовых данных для двух независимых групп применяли U-критерий Манна—Уитни. Различия между группами считали значимыми при p<0,05.

Результаты

Среди пациентов 14 (41%) мужчин и 20 (59%) женщин. Возраст пациентов — от 39 до 67 лет (средний возраст 49 лет). Длительность заболевания составляла от 3 до 24 лет (в среднем 8,9±4,3 года). Класс С4 ХЗВ по СЕАР выявлен у 19 (56%) больных, остальные 15 (44%) пациентов отнесены к классу С5 ХЗВ. Результаты исследования маркеров ЭД приведены в табл. 2.

Таблица 2. Динамика маркеров эндотелиальной дисфункции у пациентов с ХВН классов С4—С5 на фоне лечения депротеинизированным дериватом крови телят

Маркер	До лечения (нг/мл)		После лечения (нг/мл)		p
Маркер	Me	Q₁; Q₃	Me	Q₁; Q₃	p
sP-селектин	117	98; 204	96	66; 149	<0,05
sICAM-1	271	162; 310	223	104; 292	<0,05
sVCAM-1	304	235; 410	297	207; 341	<0,05
sE-селектин	48,5	44,7; 50,4	53,25	48,2; 55,6	<0,05

Обсуждение

В ходе проведенного исследования изучена динамика уровней некоторых специфических маркеров сосудистого эндотелия, таких как:

— sICAM-1 (молекула межклеточной адгезии 1-го типа) — молекула клеточной адгезии, присутствующая в низкой концентрации на мембранах лейкоцитов и эндотелиальных клеток. Синтез sICAM-1 в нормальных условиях практически не происходит, но резко увеличивается при активации эндотелия. В нескольких исследованиях продемонстрирована сверхэкспрессия sICAM-1 при варикозной болезни [9];

— sVCAM-1 (молекула адгезии сосудистого эндотелия 1-го типа) — белок, входящий в суперсемейство иммуноглобулинов, играет значительную роль в иммунной системе человека. VCAM-1 участвует в адгезии лейкоцитов и эндотелиальных клеток, передаче сигналов. Аналогично sICAM-1 синтез sVCAM-1 в нормальных условиях не происходит, но резко увеличивается при активации эндотелия;

— sP-селектин — белок клеточной поверхности, относится к классу молекул клеточной адгезии, находится в особых гранулах эндотелиальных клеток и активированных тромбоцитов. sP-селектин не вырабатывается в нормальных условиях, его синтез увеличивается при активации эндотелия;

— sE-селектин — гликопротеин, находящийся на клеточной поверхности, относится к классу молекул клеточной адгезии; рецептор к некоторым углеводным лигандам лейкоцитов крови. Вырабатывается клетками эндотелия в случае воспалительного повреждения ткани, способствует рекрутированию нейтрофилов из циркулирующей крови к месту повреждения. Согласно классификации, предложенной Ю.Л. Шевченко и соавт. [10], относится к веществам, накапливающимся в эндотелии и выделяющимся из него при стимуляции.

Результаты настоящего исследования показали статистически значимое дискордантное изменение уровней селектинов: повышение уровня sE-селектина и снижение уровня sP-селектина. Это можно рассматривать как первый этап купирования воспалительного ответа за счет снижения «быстрых» селектинов и временного сохранения активности Е-селектинов на фоне восстановления функции эндотелия микрососудов. Тенденция к уменьшению воспалительных эндотелий-опосредованных реакций подтверждается значимым снижением уровней sVCAM-1 и sICAM-1.

Некоторые веноактивные средства также увеличивают венозную сократимость и повышают венозный тонус у лиц с риском прогрессирования ВБНК [11, 12]. Предоставлены данные о том, что веноактивные препараты снижают концентрацию плазменных маркеров воспаления (TNF-α и других цитокинов), активацию эндотелия (ICAM, VCAM), гипертрофию сосудов и ангиогенез (VEGF), а также высвобождение протеаз, участвующих в разрушении внеклеточного матрикса и ремоделировании венозной ткани [13, 14].

Исходя из вышеизложенного, представляется крайне важным продолжить поиск средств, которые эффективно устраняют эндотелиальную дисфункцию, улучшая кровоснабжение тканей на уровне микроциркуляторного русла [15]. Представителями этой группы являются не только флеботоники, но и высокоочищенный гемодериват крови телят, состоящий из более чем 200 биологически активных компонентов, включая аминокислоты, биогенные амины и полиамины, сфинголипиды, инозитолфосфоолигосахариды, продукты обмена жиров и углеводов, свободные жирные кислоты. Также в его состав входят витамины, большое число микроэлементов и макроэлементов [3].

Обнаружено, что добавление депротеинизированного деривата крови телят к культуре активированных лейкоцитов статистически значимо уменьшает выработку важнейшего провоспалительного медиатора — IL-1β [16]. Эндотелиопротективный эффект препарата приводит к непосредственному улучшению микроциркуляторных процессов в коже. В острых фармакологических тестах с участием здоровых добровольцев [17] и при курсовом приеме у пациентов с артериальной гипертензией [13] продемонстрировано достоверное уменьшение степени гидратации интерстициального пространства (отека). В качестве еще одного положительного механизма действия препарата можно рассматривать восстановление микроциркуляции в системе vasa-vasorum магистральных венозных сосудов. Улучшение трофического обеспечения венозной стенки может способствовать восстановлению гемодинамики на уровне магистральных венозных сосудов, что приводит к снижению посткапиллярного сопротивления [18].

Ограничения. К ограничениям настоящего исследования относятся его несравнительный характер и небольшой размер выборки.

Заключение

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования — Ю.М. Стойко

Сбор и обработка материала — В.Г. Гудымович, А.А. Федорович

Написание текста — В.Г. Гудымович

Редактирование — Ю.М. Стойко

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

The authors declare no conflict of interest.