Сравнительное изучение влияния Кортексина, Церебролизина и Актовегина на состояние памяти, мозговое кровообращение и структуру гиппокампа у крыс с хроническим нарушением мозгового кровообращения

Кортексин, Церебролизин и Актовегин содержат комплекс естественных биологически активных веществ, обеспечивающих защиту нейронов, способствующих нейропластичности и нейрогенезу, улучшающих энергетический обмен и трофику головного мозга (ГМ). Кортексин и Церебролизин содержат полипептиды ГМ крупного рогатого скота или свиней и оказывают выраженное нейропротективное действие при нарушениях мозгового кровообращения [1—4]. Кортексин — российский полипептидный препарат, который в отличие от Церебролизина изготавливают из коры ГМ. Актовегин — высокофильтрованный экстракт крови телят, улучшающий метаболизм ткани мозга [5—8].

Цель исследования — оценить влияние курсовой терапии препаратами Кортексин, Церебролизин и Актовегин на состояние памяти, мозговое кровообращение и структуру гиппокампа у крыс с хроническим нарушением мозгового кровообращения (ХНМК).

Эксперимент выполнен на 144 самцах крыс, масса тела 300—350 г (Филиал «Столбовая» ФГБУН «Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства» РАМН (Московская обл.)) в соответствии с Директивой 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза. Протокол исследования одобрен Региональным независимым этическим комитетом, регистрационный номер ИРБ 00005839 IORG 0004900 (OHRP), протокол №132 от 20 мая 2019г.

ХНМК моделировали посредством стенозирования общих сонных артерий (ОСА) на 50%. В качестве анестезии использовали золетил/ксилазил в дозе 20/8 мг/кг (в/б). Схема операции представлена на рис. 1 и подробно описана в предыдущих работах [9], дизайн исследования представлен на рис. 2. Исследование включало моделирование ХНМК, контроль развития неврологического дефицита через 40 дней, два 10-дневных периода лечения (лекарственные препараты вводили ежедневно, однократно внутримышечно), разделенных 10-дневным перерывом. В конце каждого периода животных тестировали в водном лабиринте Морриса (ВЛМ), тестах условной реакции пассивного избегания (УРПИ) и экстраполяционного избавления (ТЭИ). В ВЛМ оценивали обучаемость и сохранение пространственной памяти в процессе 4-дневного обучения поиску затопленной платформы [10]. В тестах УРПИ и ТЭИ определяли сохранность навыка пассивного избегания и активного избавления от аверсивной среды, обучение которым проводили до моделирования патологии [11]. В конце эксперимента определяли уровень мозгового кровотока методом лазерной допплерографии («Biopac Systems Inc.», США). После эвтаназии ГМ извлекали и исследовали патоморфологические изменения в CA1 и CA4 зонах гиппокампа. Морфометрию проводили на окрашенных по методу Ниссля срезах. Степень поражения оценивали по трем категориям: нормальные нейроны (НН); слабоизмененные нейроны (СН) с сохранением ядра, но со структурными или тинкториальными нарушениями компонентов цитоплазмы (набухание, гиперхроматоз, хроматолиз, центральная тинкториалъная ацидофилия); грубоизмененные нейроны (ГН) — выраженное сморщивание, гомогенизирующее изменение нейронов, клетки-тени. Кортексин и Церебролизин вводили в дозах, составляющих ¹/₃ терапевтической дозы (ТД), ТД и 3 ТД, Актовегин — только в ТД [12—14] (табл.1).

Рис. 1. Общий принцип моделирования стеноза общих сонных артерий: ОСА — общая сонная артерия; НСА — наружная сонная артерия; ВСА — внутренняя сонная артерия; СМА — средняя мозговая артерия.

Рис. 2. Дизайн исследования.

Таблица 1. Характеристика групп животных

Примечание. n — число животных.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием Microsoft Office Excel 2016 («Microsoft», США) и Prism 6 («GraphPad Software Inc.», США), критерия Данна и t-критерия Стьюдента с поправкой Бонферрони. Данные представлены в виде среднего значения и стандартной ошибки (M±m).

Тест ВЛМ проводили с 6-го по 10-й день после начала лечения, а затем с 6-го по 10-й день после отмены лечения и с 6-го по 10-й день после повторного курса терапии: ежедневно 4 раза в день животное помещали в определенные зоны бассейна по одинаковой схеме и фиксировали латентный период нахождения площадки (табл. 2). На протяжении всего эксперимента в ВЛМ животные группы плацебо значимо дольше искали затопленную платформу по сравнению с интактной группой (p<0,05). В конце первого курса лечения на 4-й день площадку быстрее находили животные интактной группы и получавшие Кортексин в дозе 1 или 3 мг/кг (p<0,05), Церебролизин (2,5 или 7,5 мл/кг; p<0,05) или Актовегин.

Таблица 2. Среднее время нахождения площадки за 4 попытки в ВЛМ у животных с ХНМК в 3 экспериментальных периодах (с, M±m)

Примечание. Здесь и в табл. 3—6: 1-й период — через 10 сут лечения; 2-й период — через 10 сут после периода отмены лечения; 3-й период — через 10 сут повторного периода лечения; ^# — различия статистически значимы по сравнению с интактной группой при p<0,05, t-критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони; * — различия статистически значимы по сравнению с группой плацебо при p<0,05, t-критерий Стьюдента с поправкой Бонферрони.

В период отмены лечения (см. табл. 2) в группах, получавших Кортексин в дозах 0,3, 1,0 и 3,0 мг/кг, а также Церебролизин в дозе 2,5 мл/кг и Актовегин, отмечено, что в отличие от контрольных животные затрачивали на поиск платформы значимо меньше времени. В группе, получавшей Кортексин, в отличие от Церебролизина, эффективность не зависела от дозы.

В конце повторного курса лечения (см. табл. 2) значительное улучшение показателей в ВЛМ относительно контрольной группы наблюдалось у животных, которым вводили Кортексин, Церебролизин или Актовегин в 1 или 3 ТД. Перерывы в тестировании не приводили к угасанию памятного следа, что отмечалось у животных, получавших плацебо. Таким образом, в результате проведенного исследования было отмечено положительное сопоставимое влияние курсового введения Кортексина или Церебролизина на формирование и воспроизведение памятного следа в ВЛМ.

Формирование и проверку выработки навыков в тестах УРПИ и ТЭИ проводили за 24 ч до моделирования ХНМК. Все животные, включенные в исследование, успешно воспроизводили выученные навыки до операции: не заходили в темный отсек, в котором на этапе обучения получали электроболевое воздействие (УРПИ) и быстро выполняли экстраполяционную задачу в ТЭИ (табл. 3 и 4). Через 39 дней после моделирования ХНМК проводили оценку сохранности памятного следа в тестах УРПИ и ТЭИ, затем повторяли тестирование 3 раза: после 10 дней лечения, 10 дней отмены и 10 дней повторной терапии.

Таблица 3. Среднее время захода и число животных с ХНМК, зашедших в темный отсек установки УРПИ (с, M±m)

Примечание. N — количество животных, зашедших в темный отсек.

Таблица 4. Среднее время решения задачи в ТЭИ животными с ХНМК на всех этапах исследования (с, M±m)

Группа	Латентный период подныривания
	обучение	до операции	до лечения	период после начала лечения
				1-й	2-й	3-й
Интактная (n=15)	15,5±4,61	9,5±2,81	3,3±0,50	3,9±0,60	3,3±0,51	3,3±0,50
Плацебо (n=13)	14,8±4,19	11,0±2,83	11,9±3,28#	9,9±1,10#	7,7±0,52#	5,5±0,98
Кортексин (0,3 мг/кг; n=14)	17,9±3,85	9,7±3,40	9,9±4,62	3,9±0,62*	5,5±1,34	4,7±0,85
Кортексин (1 мг/кг; n=15)	15,8±6,13	13,0±4,48	11,0±4,64	3,6±0,52*	3,3±0,36*	3,9±0,57
Через 39 дней после моделирования ХНМК и до начала лечения по результатам выполнения тестов УРПИ и ТЭИ все группы животных с ХНМК были сопоставимы между собой (см. табл. 3). При повторном воспроизведении навыков через 10 дней терапии, а также через 10 дней отмены лечения в опытных группах наблюдалась тенденция к удлинению времени захода в темный отсек установки УРПИ (см. табл. 3). Статистически значимые различия величины латентного периода захода в темный отсек относительно контрольной группы наблюдались только в конце повторного курса лечения в группах, получавших Кортексин в дозах 1 или 3 мг/кг, или Церебролизин (2,5 мл/кг). В контрольной группе число животных, заходящих в темный отсек установки, увеличивалось с каждым тестированием, и в последней сессии большинство животных зашло в темный отсек, что может свидетельствовать о нарастании дегенеративных процессов и угасании памятного следа. Напротив, в группах животных, получавших Кортексин в дозах 1 или 3 мг/кг или Церебролизин (2,5 мл/кг), меньшее число крыс посещало темный отсек, что объясняется нейропротективным действием препаратов, препятствующим повреждению ГМ и стиранию негативного опыта, приобретенного на этапе обучения. В ТЭИ через 10 дней лечения значимо меньшее время решения экстраполяционной задачи наблюдалось в группах, которым вводили Кортексин или Церебролизин во всех исследуемых дозах. При повторении ТЭИ после отмены лечения значимые различия во времени подныривания наблюдались в группах, получавших Кортексин или Церебролизин в средних или высоких дозах, а также Актовегин. Тестирование животных в конце повторного курса лечения не выявило статистически значимых различий между группами, что, очевидно, связано с закреплением навыка избавления от аверсивной среды и, возможно, с адаптацией к ней. Таким образом, результаты выполнения тестов ВЛМ, УРПИ и ТЭИ свидетельствуют о нарушении процессов формирования и сохранения памятного следа, кратковременной и долговременной памяти у животных с ХНМК. Кортексин, Церебролизин и в меньшей степени Актовегин отчетливо улучшают состояние памяти у животных с ХНМК. Оценка показателей мозгового кровотока у животных с ХНМК В основе нейропротективного действия исследуемых препаратов может лежать их влияние на гемоциркуляцию в ГМ. Показатели мозгового кровотока у всех животных со стенозом ВСА были ниже, чем у интактных (табл. 5). Таким образом, курсовое введение препаратов Кортексин, Церебролизин и Актовегин не влияет на мозговое кровообращение у животных с ХНМК, а положительное влияние на состояние памяти связано с нейротрофическими и нейрометаболическими эффектами препаратов. Таблица 5. Уровень кровотока в бассейне СМА у животных с ХНМК после курсового лечения (мл/100 г/мин, M±m) Группа ХНМК Δ% от группы плацебо Интактная 42,1±2,1 +28 Плацебо 30,3±1,3# — Кортексин 0,3 мг/кг 35,1±1,8 +16 1 мг/кг 34,9±1,6 +15 3 мг/кг 30,3±1,7 0 Церебролизин 0,83 мл/кг 34,9±1,9 +15 2,5 мл/кг 35,1±2,1 +16 7,5 мл/кг 33,1±1,8 +9 Актовегин (5 мл/кг) 36,7±2,5 +21 Примечание. # — различия достоверны по сравнению с интактной группой, p<0,05, односторонний ANOVA-тест с поправкой Бонферрони post hoc. Результаты морфологического исследования гиппокампа животных с ХНМК Морфологический анализ структур гиппокампа позволил выявить слабые и умеренно выраженные изменения. В полях CA1 и CA3 дорсального и вентрального гиппокампа выявлены слабые пикноморфные изменения единичных пирамидальных нейронов. Плотность поврежденных нейронов у животных группы плацебо была выше в CA1 и CA3 полях гиппокампа, однако достоверные отличия от группы интактных животных были зафиксированы только в CA1. Анализ морфологических изменений гиппокампа крыс с ХНМК, которым вводили Кортексин, позволил выявить нарастание нейропротективного эффекта по мере увеличения дозы препарата. Терапия Кортексином в дозе 0,3 мг/кг не оказала влияния на характер и выраженность нейродистрофических процессов. Кортексин в дозе 1 и 3 мг/кг способствовал уменьшению количества поврежденных нейронов в соматосенсорной области церебральной коры и нормализации цитоархитектоники CA1 поля гиппокампа. При изучении ГМ животных, которым вводили Церебролизин в дозе 7,5 мл/кг, плотность поврежденных нейронов в области CA1 гиппокампа была наименьшей, что свидетельствует о его протективном действии. Наиболее значимое церебропротективное действие оказали Кортексин в дозах 1 или 3 мг/кг и Церебролизин в дозе 7,5 мл/кг (табл. 6). Результаты морфологического исследования отражают отдаленные последствия, связанные со снижением мозгового кровотока, и позволяют объяснить поведение животных в стандартных тестах, в которых типичными и наиболее очевидными нарушениями функционирования ГМ являлось нарушение памяти. Более выраженные нарушения памяти у животных контрольной группы (плацебо) и ее большая сохранность у животных, получавших Кортексин, Церебролизин и в меньшей степени Актовегин, могут являться следствием меньших структурных изменений ГМ. Таблица 6. Морфологическая характеристика дегенеративных изменений гиппокампа (%, M±m) Группа Структуры гиппокампа и степень морфологических изменений CA1 CA3+CA4 НН СН ГН НН СН ГН Интактная (n=7) 97,89±0,11* 2,11±0,11* — 96,96±0,48 3,04±0,48 — Плацебо (n=7) 95,09±1,09# 4,91±1,09# — 92,33±3,7# 7,67±3,7# — Кортексин 0,3 мг/кг (n=7) 95,76±0,59 4,24±0,59 — 94,37±1,29 5,63±1,29 — 1 мг/кг (n=7) 96,78±1,05 3,22±1,05 — 93,63±1,63 6,37%±1,63 — 3 мг/кг (n=7) 97,25±0,83* 2,75±0,83* — 92,43±2,77 7,57±2,77 — Церебролизин 0,83 мл/кг (n=8) 96,28±1,03 3,72±1,03 — 93,43±2,31 6,57±2,31 — 2,5 мл/кг (n=7) 95,99±0,89 4,01±0,89 — 96,16±0,55 3,84±0,55 — 7,5 мл/кг (n=6) 97,94±0,51* 2,06±0,51* — 96,18±0,75 3,82±0,75 — Актовегин (5 мл/кг; n=7) 96,77±1,04 3,23±1,04 — 94,88±0,73 5,12±0,73 — Примечание. # — различия статистически значимы в сравнении с интактной группой при p<0,05, критерий Манна—Уитни; * — различия статистически значимы в сравнении с группой плацебо при p<0,05, критерий Манна—Уитни. Заключение В проведенном эксперименте у лабораторных крыс моделировали 50% стеноз ОСА, который явился причиной ХНМК, что было показано при оценке уровня локального мозгового кровотока, который был в среднем на 28% ниже, чем у интактных животных. Длительная ишемия ГМ, очевидно, стала причиной нарушений памяти: у животных хуже формировались и сохранялись памятный след, пространственная память, что было подтверждено результатами оценки их поведения в тестах ВЛМ, УРПИ и ТЭИ, а также большим количеством измененных нейронов и меньшим — неизмененных в зонах CA1 и CA3 гиппокампа. Введение Кортексина снижало выраженность нарушений памяти у животных с ХНМК. Церебропротекторный эффект Кортексина был наиболее выражен в дозах 1 и 3 мг/кг, был сопоставим с таковым у Церебролизина в дозах 2,5 и 7,5 мл/кг и незначительно превышал таковой у Актовегина (5 мл/кг). Положительный эффект введения Кортексина сохранялся после 10-дневной отмены препарата и усиливался после повторного курса лечения. Курсовое введение Кортексина приводило к снижению выраженности нейродистрофических процессов в CA1 и CA3 гиппокампа у животных с ХНМК. У животных, получавших лечение, уровень мозгового кровотока был выше, но различия с показателями животных, которым вводили плацебо, не достигали статистической значимости. Необходимо отметить, что при сопоставимой эффективности Кортексин в настоящем исследовании применялся в гораздо меньших дозах, чем Церебролизин или Актовегин, что имеет важное значение с точки зрения безопасности и стоимости лечения. Это важно, учитывая социально-экономическую характеристику лиц группы риска или частую инвалидизацию пациентов, перенесших острое или хроническое нарушение мозгового кровообращения. Исследование выполнено при финансовой поддержке ЗАО «Фарм-Холдинг» Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Литература / References Бережная С.В., Якупов Э.З., Захаров Ю.А. Эффективность комбинированной терапии мексидолом и церебролизином хронической ишемии головного мозга. Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2016;116(5):23-27. https://doi.org/10.17116/jnevro20161165123-27 Гомазков О.А. Кортексин: молекулярные механизмы и мишени нейропротективной активности. Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. орсакова. 2015;115(8):99-104. https://doi.org/10.17116/jnevro20151158199-104 Masliah E, Díez-Tejedor E. The pharmacology of neurotrophic treatment with Cerebrolysin: brain protection and repair to counteract pathologies of acute and chronic neurological disorders. Drugs Today (Barc). 2012;48(Suppl A):3-24. Zhang Y, Chopp M, Zhang ZG, Zhang Y, Zhang L, Lu M, Zhang T, Winter S, Doppler E, Brandstäetter H, Mahmood A, Xiong Y. Cerebrolysin Reduces Astrogliosis and Axonal Injury and Enhances Neurogenesis in Rats After Closed Head Injury. Neurorehabil Neural Repair. 2019;33(1):15-26. https://doi.org/10.1177/1545968318809916 Guekht A, Skoog I, Edmundson S, Zakharov V, Korczyn AD. ARTEMIDA Trial (A Randomized Trial of Efficacy, 12 Months International Double-Blind Actovegin): A Randomized Controlled Trial to Assess the Efficacy of Actovegin in Poststroke Cognitive Impairment. Stroke. 2017;48(5):1262-1270. https://doi.org/10.1161/strokeaha.116.014321 Derev’yannykh EA, Bel’skaya GN, Knoll EA, Krylova LG, Popov DV. Experience in the use of Actovegin in the treatment of patients with cognitive disorders in the acute period of stroke. Neurosci Behav Physiol. 2008;38(8):873-875. https://doi.org/10.1007/s11055-008-9051-0 Elmlinger MW, Kriebel M, Ziegler D. Neuroprotective and anti-oxidative effects of the hemodialysate actovegin on primary rat neurons in vitro. Neuromolecular Med. 2011;13(4):266-274. https://doi.org/10.1007/s12017-011-8157-7 Meilin S, Machicao F, Elmlinger M. Treatment with Actovegin improves spatial learning and memory in rats following transient forebrain ischaemia. J Cell Mol Med. 2014;18(8):1623-1630. https://doi.org/10.1111/jcmm.12297 Куркин Д.В., Тюренков И.Н., Морковин Е.И., Осадченко Н.А., Верхоляк Д.В., Петров В.И. Поведенческое фенотипирование крыс при экспериментальном моделировании хронического нарушения мозгового кровообращения. Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2017;117(7):69-73. https://doi.org/10.17116/jnevro20171177169-73 Vorhees CV, Williams MT. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nat Protoc. 2006;1(2):848-858. https://doi.org/10.1038/nprot.2006.116 Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. Под ред. Миронова А.Н. М.: «Гриф и К», 2012;944. Zhang Y, Chopp M, Gang Zhang Z, Zhang Y, Zhang L, Lu M, Zhang T, Winter S, Brandstätter H, Mahmood A, Xiong Y. Prospective, randomized, blinded, and placebo-controlled study of Cerebrolysin dose-response effects on long-term functional outcomes in a rat model of mild traumatic brain injury. J Neurosurg. 2018;129(5):1295-1304. https://doi.org/10.3171/2017.6.jns171007 Zarubina IV, Shabanov PD. Neuroprotective Effects of Peptides during Ischemic Preconditioning. Bull Exp Biol Med. 2016;160(4):448-451. https://doi.org/10.1007/s10517-016-3193-9 Meilin S, Machicao F, Elmlinger M. Treatment with Actovegin improves spatial learning and memory in rats following transient forebrain ischaemia. J Cell Mol Med. 2014 Aug;18(8):1623-1630. https://doi.org/10.1111/jcmm.12297 Рекомендуем статьи по данной теме: Динамика параметров периферического кровотока и микроциркуляции при курсовом приеме фиксированной комбинации мемантина и мелатонина у пациентов с додементными когнитивными нарушениями и обструктивным апноэ сна.Профилактическая медицина. 2026;29(6):68-75 Исследование глиального нейротрофического фактора и нейропсихологического статуса у пациентов, перенесших COVID-19.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2026;126(6):87-93 Кортексин в комплексной терапии неврологических осложнений сахарного диабета 2 типа. (Результаты многоцентрового рандомизированного клинического исследования ДИАКОРТ).Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2026;126(4):101-112 Влияние нейропротекторов на уровень BDNF, фактора некроза опухолей альфа и маркеров апоптоза при остром нарушении мозгового кровообращения.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2026;126(2):123-129 Головная боль и когнитивные нарушения у пациентов с хронической ишемией головного мозга.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2025;125(12):78-81 Цели рациональной нейропротекции в терапии хронической церебральной ишемии и возможности их достижения.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2025;125(8):96-101 Возможности применения нейропептидов животного происхождения в комплексной терапии диабетической полинейропатии у пациентов с сахарным диабетом 2 типа.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2025;125(4):83-87 Международное многоцентровое рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование оценки эффективности и безопасности последовательной терапии пациентов с хронической ишемией мозга препаратами Мексидол и Мексидол ФОРТЕ 250 (исследование МЕМО): результаты субанализа у пациентов с артериальной гипертонией.Профилактическая медицина. 2024;27(10):72-83 Церебролизин в превентивной терапии деменции у пожилых пациентов с синдромом мягкого когнитивного снижения: результаты трехлетнего проспективного сравнительного исследования.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2024;124(9):51-59 Клиническая эффективность и безопасность применения препарата Пикамилон у пациентов с хронической ишемией головного мозга.Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2024;124(8):71-80