Левченко А.С.

ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздрава России, ул. Сумская, 45А, Курск, Российская Федерация, 305007

Воробьева А.А.

ФГБУ "Научный центр неврологии" РАМН, Москва

Мезенцева О.Ю.

Кафедра оториноларингологии

Пискунов В.С.

Курский государственный медицинский университет Минздрава России, Курск, Россия, 305004

Бушуева О.Ю.

Кафедра биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета, Курск

Полоников А.В.

Кафедра биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета, Курск

Анализ полиморфизма генов цитокинов в развитии хронического риносинусита

Авторы:

Левченко А.С., Воробьева А.А., Мезенцева О.Ю., Пискунов В.С., Бушуева О.Ю., Полоников А.В.

Подробнее об авторах

Журнал: Российская ринология. 2019;27(2): 77‑81

Прочитано: 1210 раз


Как цитировать:

Левченко А.С., Воробьева А.А., Мезенцева О.Ю., Пискунов В.С., Бушуева О.Ю., Полоников А.В. Анализ полиморфизма генов цитокинов в развитии хронического риносинусита. Российская ринология. 2019;27(2):77‑81.
Levchenko AS, Vorob'eva AA, Mezentseva OIu, Piskunov VS, Bushueva OIu, Polonikov AV. Analysis of cytokine gene polymorphism in the development of chronic rhinosinusitis. Russian Rhinology. 2019;27(2):77‑81. (In Russ.)
https://doi.org/10.17116/rosrino20192702177

Рекомендуем статьи по данной теме:
Эн­до­ти­пы хро­ни­чес­ко­го ри­но­си­ну­си­та у де­тей. Рос­сий­ская ри­но­ло­гия. 2024;(2):82-88
Ал­го­ритм ди­аг­нос­ти­ки эн­до­ти­пов хро­ни­чес­ко­го ри­но­си­ну­си­та у де­тей. Рос­сий­ская ри­но­ло­гия. 2024;(3):181-188
Осо­бен­нос­ти ло­каль­ной экспрес­сии ге­нов мРНК про- и про­ти­во­вос­па­ли­тель­ных ци­то­ки­нов при до­но­шен­ной бе­ре­мен­нос­ти. Рос­сий­ский вес­тник аку­ше­ра-ги­не­ко­ло­га. 2024;(3):6-13
Рас­простра­нен­ность те­ра­пев­ти­чес­ких за­бо­ле­ва­ний в за­ви­си­мос­ти от уров­ней ци­то­ки­нов/хе­мо­ки­нов у лю­дей в воз­рас­те до 45 лет. Про­фи­лак­ти­чес­кая ме­ди­ци­на. 2024;(7):46-52
Ин­ди­ка­то­ры ког­ни­тив­ных на­ру­ше­ний раз­лич­ной сте­пе­ни тя­жес­ти в ос­тром пе­ри­оде ише­ми­чес­ко­го ин­суль­та. Жур­нал нев­ро­ло­гии и пси­хи­ат­рии им. С.С. Кор­са­ко­ва. Спец­вы­пус­ки. 2024;(8-2):14-20
Ана­лиз го­лов­ной бо­ли у па­ци­ен­тов дет­ско­го воз­рас­та, ее связь с хро­ни­чес­ким ри­но­си­ну­си­том на са­на­тор­но-ку­рор­тном эта­пе ле­че­ния. Вес­тник ото­ри­но­ла­рин­го­ло­гии. 2024;(4):37-41
Осо­бен­нос­ти эн­до­ти­пов и фе­но­ти­пов вос­па­ле­ния при хро­ни­чес­ком ри­но­си­ну­си­те. Вес­тник ото­ри­но­ла­рин­го­ло­гии. 2024;(4):60-67
Роль по­ли­мор­физ­мов ге­нов TNF (rs1800629) и TGF-β2 (rs1159268) в па­то­ге­не­зе ак­не. Кли­ни­чес­кая дер­ма­то­ло­гия и ве­не­ро­ло­гия. 2024;(4):351-355
Оцен­ка ци­то­ки­но­во­го ста­ту­са у боль­ных с он­ко­ло­ги­чес­ки­ми за­бо­ле­ва­ни­ями и тя­же­лой фор­мой COVID-19. До­ка­за­тель­ная гас­тро­эн­те­ро­ло­гия. 2024;(3):60-66
При­ме­не­ние аль­ги­нат­ных плас­тин с ком­плек­сом про­ти­во­мик­роб­ных пеп­ти­дов и ци­то­ки­нов пос­ле хи­рур­ги­чес­ких вме­ша­тельств на тка­нях па­ро­дон­та как про­фи­лак­ти­ка ран­них пос­то­пе­ра­ци­он­ных ос­лож­не­ний. Сто­ма­то­ло­гия. 2024;(5):19-23

Список сокращений:

ХРС — хронический риносинусит

IL — интерлейкин

ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота

ПЦР — полимеразно-цепная реакция

Хронический риносинусит (ХРС) — распространенное заболевание, поражающее все слои населения. Частота встречаемости лиц с данной патологией растет год от года. ХРС может быть как с полипозом носа, так и без назальных полипов, которые, будучи склонными к рецидивированию, значительно ухудшают качество жизни пациента. Патогенез обеих форм заболевания до конца не изучен. Большое внимание уделяется иммунологическим аспектам развития ХРС, в частности роли цитокинов. Известно, что в защитных реакциях организма участвуют как провоспалительные, так и противовоспалительные цитокины. Однако неизвестно, какое явление в каждом конкретном случае служит пусковым механизмом. Изменения в структуре генетических маркеров потенцируют продукцию того или иного цитокина.

Вероятные причины полиморфизма генов различных медиаторов — тандемные повторения различных частей гена, делеции нуклеотидов и т. д. Ассоциированные с различными заболеваниями полиморфные варианты генов могут быть сцеплены с мутацией и, как следствие, являться надежным диагностическим маркером [1].

Семейство интерлейкина (IL)-1 активирует клетки врожденного иммунитета, такие как нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, тучные клетки и натуральные киллеры [2]. Ген IL-1 расположен на хромосоме 2 и кодирует 3 цитокина — IL-1α, IL-1β и антагонист рецептора IL-1 (IL-1Ra). Описаны многие полиморфизмы в гене IL-1β, два из которых влияют на синтез белка (один расположен в области промотора локуса -511, другой — в 5-й экзоне) [3].

IL-5 — это цитокин, продуцируемый Т-клетками. Он играет основную роль в дифференциации и активации эозинофилов. Ген IL-5 расположен на хромосоме 5 [4].

Фактор некроза опухоли (TNF)-α — мощный иммуномодулятор. Его экспрессии способствуют бактериальные липополисахариды, митогены и вирусы. Кодирующий TNF-α ген локализуется в области III класса основного комплекса гистосовместимости на коротком плече хромосомы 6 [5].

Цель исследования — анализ ассоциации полиморфизмов генов IL-1β, IL-5 и TNF-α с риском развития ХРС.

Материал и методы

За 2012—2018 гг. были обследованы 100 пациентов с ХРС и 100 представителей контрольной группы. Исследование проводилось на базе ЛОР-отделений БМУ «Курская областная клиническая больница» и ОБУЗ «Курская городская больница № 1 им. Н.С. Короткова». Каждым из участников было подписано информированное добровольное согласие на участие в исследовании. По полу, возрасту, расовой и этнической принадлежности различия в группах отсутствовали.

У всех исследуемых проводился забор венозной крови в вакуумные пробирки с ЭДТА-К3. Далее с использованием фенольно-хлороформной экстракции осуществлялось выделение дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), после чего при помощи центрифуги осаждали лейкоциты и лизировали их в ТЕ-буфере. На следующем этапе клеточную суспензию инкубировали в термостате при температуре 37 °C в течение 16 ч. С помощью фенола и хлороформа проводились выделение геномной ДНК из клеточного лизата, преципитирование 96% этанолом (–20 °С), высушивание, растворение в ТЕ-буфере, заморозка и хранение при –20 °С.

В реакционной смеси с 0,5 мкл образца геномной ДНК осуществляли полимеразно-цепную реакцию (ПЦР). Обработку продуктов ПЦР проводили специфическими ферментами согласно протоколам производителей. Далее выполняли рестрикцию амплифицированных продуктов и разделение фрагментов ДНК электрофорезом, после чего окрашенные этидиумбромидом гели визуализировали в проходящем ультрафиолетовом свете с помощью программного обеспечения LabWorksTMv4.5 (США).

Статистическая обработка данных производилась с использованием программного пакета Statistica 10. Для анализа соответствия частот генотипов равновесию Hardy—Weinberg и сравнения частот генотипов и аллелей в когортах больных и здоровых лиц использовали χ2-критерий. По отношению шансов (OR) и 95% доверительному интервалу (95% ДИ) делали вывод о взаимосвязи исследуемых генотипов с риском развития ХРС [6]. cтатистически значимыми считали различия при р<0,05.

Результаты и обсуждение

Генотипы полиморфных вариантов генов -308G/A TNF-α, -511C/T IL-1β и -703С/T IL-5 находились в соответствии с распределением Hardy—Weinberg.

При сравнении частот аллелей и генотипов полиморфизмов исследуемых генов статистически весомых различий не было выявлено (табл. 1, 2).

Таблица 2. Распределение генотипов полиморфных вариантов исследуемых генов в группах больных ХРС и здоровых индивидуумов
Таблица 1. Частоты аллелей исследуемых генов среди больных ХРС и здоровых индивидуумов Примечание. * — вариантные аллели представлены в нижних ячейках соответствующих ДНК-маркеров.

Исследование полового диморфизма показало, что частота генотипа С/С IL-1β была выше в контрольной группе (52,5%), чем в группе женщин с ХРС (24%) (OR=0,29, 95% ДИ=0,12—0,7; p=0,01), а генотипа С/Т IL-1β — выше в группе больных (OR=0,36, 95% ДИ=0,15—0,85; p=0,02). Таким образом, носительство генотипа С/С IL-1β уменьшает, а носительство генотипа C/T IL-1β увеличивает риск возникновения ХРС у женщин (табл. 3).

Таблица 3. Распределение частот генотипов полиморфных вариантов генов в группе больных ХРС, здоровых женщин и здоровых мужчин

В XXI веке изучению роли генов цитокинов в патогенезе ХРС уделяется много внимания. В частности, в 2000 г. K. Takeuchi и соавт. обнаружили значительно более высокую частоту полиморфизма TNF-β*2 гена TNF-β у больных ХРС (74%) по сравнению со здоровыми людьми (56%) (р<0,05). Ассоциаций с полиморфизмом гена TNF-α найдено не было [7]. В зарубежном исследовании 2007 г. констатируется, что частота генотипа -511C/C гена IL-1β (р=0,01) и частота генотипа -308G/A гена TNF-α (р=0,001) существенно выше у пациентов с носовым полипозом, нежели в группе сравнения. Ни один из вышеуказанных полиморфизмов не был связан с полом, наличием атопии, астмой или непереносимостью аспирина (р>0,05) [8]. В 2010 г. в ходе исследования мазков со слизистой полости рта у 179 пациентов с ХРС и полипами носа и у 153 больных ХРС без назального полипоза иностранными учеными также был сделан вывод, что полиморфизм гена TNF-α-308 ассоциирован с риском развития ХРС с носовым полипозом [9]. Проведенное в Турции в 2017 г. исследование доказало, что генотип G/G в области TNF-α-308 (OR=9,2; p=0,007) и генотип C/C промотора IL-1β-511 (OR=33,3; p=0,001) способствуют формированию ХРС с носовым полипозом [10].

В России в 2007 г. проводилось обследование 62 пациентов с ХРС в целях выявления ассоциации аллельных вариантов полиморфных локусов — 511С>T и +3953C>T гена IL-1β. Было установлено: в группе больных ХРС генотип *С/*С полиморфного локуса +3953 гена IL-1β обнаруживался в 2 раза чаще, чем в группе сравнения [11].

Подобный результат был получен при исследовании 208 пациентов с ХРС с полипозом носа и 200 человек группы сравнения в 2014 г. в Польше. Ученые резюмируют: частота носительства генотипа -511T/T IL-1β была выше в группе больных с ХРС по сравнению с контролем (OR=3,07, 95% ДИ=1,18—7,99) [12].

Что касается ассоциации полиморфизмов гена IL-5 с риском развития ХРС, то как в зарубежной, так и в отечественной медицинской литературе нами найдены лишь единичные труды, посвященные данной проблеме. В частности, новосибирские ученые в 2007 г. выявили повышение частоты генотипа Т/Т IL-5 у пациентов с ХРС, протекающим с носовым полипозом [13].

В ходе проведенного нами исследования было установлено, что генотип C/T IL-1β повышает, а генотип С/С IL-1β снижает вероятность развития ХРС у женщин. Таким образом, прогнозирование индивидуального риска формирования ХРС может помочь практикующему оториноларингологу и пациенту избежать возникновения и рецидивов данной патологии.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования: О.М., В.П.

Сбор и обработка материала: А.В., О.Б.

Статистическая обработка данных: А.В., О.М.

Написание текста: А.Л., О.М., О.Б.

Редактирование: О.М., В.П., А.П.

Сведения об авторах

Левченко А.С. — https://orcid.org/0000-0003-0889-657X; е-mail: arina.levchenko@bk.ru

Воробьева А.А. — е-mail: kurskmed@mail.ru

Мезенцева О.Ю. — е-mail: mezoksa@rambler.ru

Пискунов В.С. — е-mail: piskunov08@rambler.ru

Бушуева О.Ю. —е-mail: olga.bushueva@inbox.ru

Полоников А.В. — е-mail: polonikov@rambler.ru

Автор, ответственный за переписку: Левченко А.С. — е-mail: arina.levchenko@bk.ru

Как цитировать:

Левченко А.С., Воробьева А.А., Мезенцева О.Ю., Пискунов В.С., Бушуева О.Ю., Полоников А.В. Анализ полиморфизма генов цитокинов в развитии хронического риносинусита. Российская ринология. 2019;27(2):77-81. https://doi.org/10.17116/rosrino201927021

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо со ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail

Мы используем файлы cооkies для улучшения работы сайта. Оставаясь на нашем сайте, вы соглашаетесь с условиями использования файлов cооkies. Чтобы ознакомиться с нашими Положениями о конфиденциальности и об использовании файлов cookie, нажмите здесь.