Клинико-диагностическое значение определения аутоантител у беременных с преэклампсией

Преэклампсия (ПЭ) является одним из самых тяжелых осложнений беременности. По данным ВОЗ, распространенность ПЭ в развивающихся странах составляет 2,8% и существенно превышает этот показатель (0,4%) в развитых странах мира [1, 2]. В связи с этим чрезвычайно актуальными остаются проблемы донозологической диагностики формирования ПЭ и поиска маркеров для раннего распознавания и мониторинга патологии беременности [3—5]. Причиной от 10 до 15% всех летальных исходов в родах является ПЭ, причем следует отметить, что за прошедшие 50 лет показатели смертности в развитых странах сократились, тогда как в развивающихся остаются высокими и составляют до 25% [5]. Согласно данным российских исследователей, факторы, способствующие возникновению ПЭ, можно разделить на две группы: факторы, характерные для населения всех регионов, и факторы, характерные для отдельных популяций [6, 7]. Значительный вклад в понимание сложных и неясных вопросов патогенеза ПЭ может внести изучение стойких сдвигов в сывороточном содержании некоторых естественных аутоантител (ауто-АТ), являющихся специфическими иммунными «сигнатурами» патологических изменений, происходящих в разных органах и системах организма человека [8].

Цель исследования — оценка клинического значения определения уровня естественных аутоантител для диагностики ПЭ, установления степени тяжести и прогнозирования ее течения.

Для достижения поставленной цели проведено клинико-лабораторное исследование с участием 92 беременных со сроком гестации 28—38 нед. Все беременные разделены на две группы. В 1-ю (основную) группу включены 62 пациентки с ПЭ средней и тяжелой степени тяжести, во 2-ю (контрольную) группу — 30 пациенток с физиологически протекающей беременностью. Все беременные находились в возрасте от 18 до 40 лет (средний возраст 25,7±2,5 года), обследованы при поступлении в стационар. В работе использованы общепринятые клинико-лабораторные методы диагностики. Для сравнительного анализа изменений профилей сывороточной иммунореактивности, зависящих от изменений в содержании ряда естественных ауто-АТ, использовали специальный иммунохимический метод твердофазного иммуноферментного анализа (ЭЛИ-Висцеро-Тест-24, ООО «МИЦ “Иммункулус”», Россия).

При ультразвуковом исследовании определяли положение и предлежащую часть плода, индекс амниотической жидкости, проводили плацентометрию. Кроме того, использованы новые, еще не нашедшие широкого клинического применения в акушерской практике методы иммунологического мониторинга ЭЛИ-Тесты для оценки степени тяжести ПЭ, скринингового прогнозирования и верификации диагноза в спорных ситуациях.

Анализ клинической характеристики показал, что ПЭ развивалась у беременных всех возрастных групп. Однако частота ПЭ больше в 4,3 раза у первородящих в возрасте до 19 лет; в 3 раза у пациенток рабочих специальностей и в 1,8 раза у домохозяек. Сравнительный анализ результатов исследования показал, что у 27,9% беременных 1-й группы произошли преждевременные роды, что в 1,5 раза чаще, чем у пациенток 2-й группы. Данный факт свидетельствует об осложненном течении беременности как следствии отягощенного акушерско-гинекологического анамнеза. Результаты проспективного анализа течения беременности, родов и послеродового периода показали, что статистически значимо чаще осложнения встречались у женщин 1-й группы. У всех беременных с ПЭ определено содержание наиболее клинически значимых ауто-АТ к GFAP, TrM-03, ANCA, KiMs, LuMs, Hes-08, S100, Collagen.

Сравнительный анализ результатов Эли-Висцеро-Теста-24 показал, что у 55, 6% беременных с тяжелой ПЭ выявлялись ауто-АТ к Collagen, это в 1,6 раза чаще, чем у пациенток с умеренной ПЭ. Collagen является маркером воспалительных заболеваний органов малого таза. Наиболее распространенными послеродовыми осложнениями у пациенток 1-й группы были анемия (40%), субинволюция матки (21,4%), эндометрит (4,3%) и акушерские кровотечения (5,7%), что может быть обусловлено у 37,1% пациенток наличием инфекций, передающихся половым путем, воспалительных заболеваний матки и придатков (в отсутствие своевременного выявления и лечения).

У 18 (66,7%) беременных с тяжелой ПЭ и у 15 (42,9%) исследуемых с ПЭ средней степени тяжести встречались заболевания легких, среди которых были частые пневмонии, эмфизема легких, бронхиальная астма. У пациенток 1-й группы в 6 раз чаще встречалась патология, ассоциированная с ауто-АТ Lums (антиген клеток эндотелия альвеол, избыток антител к нему часто указывает на воспалительные процессы в легких), чем у пациенток 2-й группы. При сравнении средних величин показателей у исследуемых обеих групп выявлена тенденция к статистически значимому различию содержания ауто-АТ к Lums.

Изменения содержания ауто-АТ к ANCA отмечены у 22,2% пациенток с тяжелой ПЭ, у которых зарегистрированы также осложнения — преждевременная отслойка плаценты, послеродовые кровотечения. Известно, что беременные подходят к родам на фоне гипокоагуляции или выраженной тромбофилии с нарушением гемостаза, в связи с чем следует ожидать массивного кровотечения, которое зачастую можно предупредить. На сегодняшний день бесспорным является профилактический подход к данной проблеме. По данным литературы, высокий уровень сывороточного содержания разных ауто-АТ отражает поликлональную активацию иммунной системы, что является весьма неблагоприятным прогностическим признаком течения гестационного процесса, а также вероятности возникновения нарушений в организме матери и плода [2, 3, 5, 9]. Это позволяет предположить, что тяжелая ПЭ в 43% случаев сопровождается антифосфолипидным синдромом с нарушением процессов межклеточной адгезии и регуляции тонуса сосудов [10]. В показателях гемостаза со II триместра у беременных с ПЭ выявлена индуцированная гиперагрегация тромбоцитов, в III триместре наблюдалось снижение антитромбина-III (АТ-III).

Как и при тяжелой ПЭ, слабые отклонения от нормы со стороны ауто-АТ к Kim (маркерный признак изменений в паренхиме почек) отмечались у 40% беременных с ПЭ средней степени тяжести.

По данным Эли-Висцеро-Теста-24, аномалии содержания ауто-АТ к белку S100 встречались чаще у пациенток 1-й группы (20,5%), чем у пациенток 2-й группы. Белки семейства S100 принимают участие в регуляции процессов апоптоза, регулируют миграцию нейробластов головного и спинного мозга и их функциональную дифференцировку. Повышение антител к белку S100 чаще всего бывает обусловлено активной папилломавирусной инфекцией и нередко сопровождается внутриутробной гибелью плода, а при пролонгации беременности может быть причиной дефектов развития нервной трубки плода. Повышение ауто-АТ к этому белку сопровождается изменениями эмоционального статуса, особенно при ПЭ тяжелой степени тяжести.

Изменения в содержании ауто-АТ имелись у 94% пациенток 1-й группы. У пациенток с ПЭ и патологической кровопотерей определялись сниженные уровни ауто-АТ к TrM-03 в пределах от –24 до –55 усл. ед. Считаем необходимым подчеркнуть, что сниженные уровни ауто-АТ к TrM-03 с одинаковой частотой встречались и при массивных объемах кровопотери. Средние значения кровопотери у пациенток 2-й группы имели меньшие показатели (42±1,6 усл. ед.), чем у пациенток 1-й группы (59±1,7 усл. ед.), p=0,09.

У 25,9% беременных 1-й группы с тяжелой ПЭ в 1,5 раза чаще, чем у беременных с ПЭ средней степени тяжести встречалось нарушение содержания ауто-АТ к Hes-08, характерное для дегенеративных изменений в паренхиме печени (цитоплазматический антиген гепатоцитов), p<0,05. Увеличение активности аспартатаминотрансферазы (АсАТ) при тяжелой ПЭ свидетельствовало о более выраженной нагрузке на гепатоциты, так как АсАТ имеет в основном митохондриальное происхождение в отличие от аланинаминотрансферазы (АлАТ), которая содержится исключительно в гиалоплазме гепатоцитов (p<0,05). Поэтому увеличение активности этого фермента свидетельствовало о более выраженном цитолитическом синдроме, при котором имело место значительное повреждение клеток с вовлечением в патологический процесс митохондрий гепатоцитов. Активность АлАТ статистически значимо возрастала при тяжелой ПЭ в 2 раза и при ПЭ средней степени тяжести в 1,9 раза по сравнению с этим показателем у исследуемых 2-й группы (23,7±2,2 Ед/л) (p<0,05), что указывает на нарушение функции гепатобилиарной системы при ПЭ.

При изучении влияния ауто-АТ на развитие деструктивно-воспалительных изменений в ЦНС и реакции нервной глии при ПЭ, независимо от ее тяжести, установлено, что частота выявления указанных изменений в 1,4 раза выше у беременных с тяжелой ПЭ (29,7%), а средние уровни ауто-АТ к GFAP не имели статистически значимого отличия от показателей у беременных с ПЭ средней степени тяжести (20%) (p>0,05).

Дисфункция материнских эндотелиальных клеток является основной причиной периферической вазоконструкции, которая характеризует ПЭ и полиорганное повреждение, которое часто возникает в тяжелых случаях. Экспрессия CD 31 и CD 34 в плацентах человека была оценена в основном с помощью иммуногистохимии.

Иммуногистохимическое исследование выполнялось на депарафинированных срезах толщиной 4—5 мкм.

В плацентарной ткани выявили аутоантитела к эндотелиальному маркеру CD 34 в клетках ворсинчатого хориона, который участвует в ангиогенезе и отражает степень васкуляризации ворсин. СD 34 экспрессируется в эндотелиальных клетках и является важным параметром функциональной активности плаценты. Положительная иммуногистохимическая окраска с антителами СD 34 наблюдается во всех препаратах в виде скопления белка в эндотелии капилляров ворсин. В результате проведенного исследования выявили высокую плотность площади экспрессии маркера СD 34 у беременных с ПЭ по сравнению со здоровыми. Однако при детальном изучении интенсивность скоплении СD 34 при умеренной ПЭ меньше, чем при тяжелой. При проведении иммуногистохимического исследования установлено, что в группе с ПЭ средний уровень экспрессии CD 31 составил 1,8±0,2 балла, CD 34 — 2,3±0,1 балла. В контрольной группе оценка среднего уровня экспрессии CD 31 и CD 34 была выше и составила 2,5±0,2 и 2,9±0,1 балла соответственно. Снижение уровня экспрессии эндотелиальных маркеров CD 31 и CD34 в группе с ПЭ является статистически достоверной (p=0,005 и p=0,033 соответственно).

СD 31 экспрессируется в эндотелиальных клетках. Они обеспечивают диапедез через эпителиальную стенку в район развития воспалительной реакции. Он также участвует в процессе ангиогенеза. Иммунореактивность CD 31 снижается в плацентах ПЭ по сравнению с контрольной группой. И CD 31 и CD 34 имеют низкий уровень экспрессии, так как они участвуют в процессе ангиогенеза при ПЭ.

Полученные результаты позволяют сделать заключение о том, что изменения в сывороточном содержании аутоантител имеют прямое отношение к патогенезу нарушений гестационного процесса, что диктует проводить иммуноферментный, иммуногистохимический анализы на аутоантитела в качестве маркеров ПЭ как в период предгравидарной подготовки, так и в ранние сроки беременности. Изменения гуморального иммунитета, свидетельствующие о выраженных сдвигах компенсаторно-приспособительных систем организма, умеренной и выраженной экспрессией белков в плацентарной ткани указывают на патогенетический механизм ПЭ.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

The authors declare no conflicts of interest.

Сведения об авторах

Мальсагова Ангелина Ахметовна — e-mail: angelina_malsagova@mail.ru; https://orcid.org/0000-0001-8095-475X

Цахилова Светлана Григорьевна — e-mail: tsakhilova@mail.ru; https://orcid.org/0000-0002-4898-6919

Сакварелидзе Николай Юрьевич — https://orcid.org/0000-0002-9041-6055

Смирнова Людмила Евгеньевна — https://orcid.org/0000-0003-4872-8554

Бегизова Аида Майрбековна — https://orcid.org/0000-0001-8482-9825

Малышева Евгения Михайловна — тел.: +7(925)046-70715

Жарков Николай Владимирович — тел.: +7(965)336-8683

Меджитова Маржанат Капуровна — к.м.н., заведующая акушерским обсервационным отделением ГКБ №40

Автор, ответственный за переписку: Мальсагова Ангелина Ахметовна — e-mail: angelina_malsagova@mail.ru