Известно, что в процессе развития яичко претерпевает морфологические изменения, которые связаны с процессом его опущения в мошонку. Изменения тканей яичек в процессе дифференцировки наблюдаются на каждом этапе их развития. Определенный интерес в понимании закономерности происходящих изменений следует рассматривать с позиций парности органа, а именно симметричности изменений в обоих яичках. Подобный взгляд на изменения в яичках актуален и в условиях их патологии.

Так, в литературе [1] приведен анализ проспективного обследования полового развития при крипторхизме с учетом как пораженного, так и контралатерального нормального яичка. Проведен сравнительный анализ комплексного обследования яичек при крипторхизме c отдаленными результатами после орхиопексии [2], исследование мезенхимальных трансформаций тканей яичка с учетом формы крипторхизма [3] и других морфологических изменений при абдоминальной фиксации яичка, с позиций временного фактора [4].

Кроме того, имеются сведения по сравнительной морфологии правого и левого яичек плодов и новорожденных с экстремально низкой массой тела при индуцированном и самопроизвольном прерывании беременности [5], данные о характеристике гистофизиологических процессов в зависимости от стадий перемещения яичка в мошонку [6]. Проведен сравнительный микроморфометрический анализ составляющих компонентов тканей яичка у млекопитающих [7]. При этом особое значение придается рассмотрению процессов с позиций возрастного аспекта как в антенатальном [8], так и в постнатальном периоде.

Такой подход к исследованию обсуждаемой проблемы, с позиций взаимосвязанности, позволяет объективно проанализировать совокупность физиологических и патологических процессов, происходящих в яичках, причем необходимо рассматривать исследуемые признаки и с позиций гистофизиологической идентичности.

В доступных источниках литературы, содержащих данные о площади канальцев и интерстициальной ткани у плодов, к сожалению, не рассмотрены особенности связей между морфометрическими показателями правого и левого яичек, в частности, нет исследований связей между площадью извитых семенных канальцев и интерстициальной тканью в том и другом яичке.

Изучено 18 пар яичек у 18 плодов и по одному непарному (правому) яичку в 2 случаях, т.е. 38 яичек у 20 плодов антенатального периода. Возрастной диапазон составил от 20 до 41 нед гестации. Забор материала проводился на базе отделения клинической патологии детского возраста ОГБУЗ «Смоленский областной институт патологии - СОИП». Материал забирали с учетом того, чтобы от момента смерти до времени забора материала не прошло более 12 ч. При заборе материала учитывали: неделю внутриутробного развития, локализацию яичек (правое/левое) и стадию опущения яичка. Основной точкой, определяющей стадию опущения, считался нижний полюс яичка: при пальпации его в мошонке - локализация считалась мошоночной, у наружного пахового кольца - паховая, при обнаружении у внутреннего пахового кольца (до входа в паховый канал) - абдоминальная. Ретракция яичка при пальпации выше его места на момент обнаружения в нашем исследовании не превышала его топографической локализации изначального местоположения, что исключало возможность неправильной интерпретации его локализации. Патогистологическое исследование тканей яичек проводилось в отделении клинической патологии №2 ОГБУЗ «СОИП». Материал фиксировали по общепринятым методикам с использованием забуференного нейтрального 10% водного раствора формалина от 5 до 24 ч. Депарафинированные гистологические срезы толщиной 7-8 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по методам Ван-Гизона и Маллори для выявления компонентов соединительной ткани. Исследования выполнялись на светооптическом микроскопе Axiostar plus («Carl Zeiss», Германия), совмещенном с видеокамерой Progres C10 Plus («Jenoptic Jena», Германия). Документирование результатов осуществлялось при помощи компьютерной программы «Видео Тест 4.0. Морфология» (Санкт-Петербург), площадь поля зрения при увеличении микроскопа ×1000 (окуляр ×10, объектив ×100) составила 38495,18 мкм². Хранение результатов исследования и первичная обработка материала проводились в базе данных Microsoft Excel 2000.

Морфометрию осуществляли в произвольно выбранном участке, центром которого служил капилляр. В каждом поле зрения измерялась площадь извитых семенных канальцев, площадь сперматогенного эпителия, площадь интерстициальной соединительной ткани. Таким образом, проведено 400 измерений. Морфометрию осуществляли в произвольно выбранных участках, гистотопографически удаленных друг от друга и неперекрывающихся между собой, центром каждого из которых служил капилляр. После изучения параллельных срезов, окрашенных по дополнительным методикам, в произвольно выбранном участке находили гистотопографически удаленные друг от друга сосуды микроциркуляторного русла - капилляры, что исключало возможность «перекрывания» периваскулярных зон разных капилляров. Для полного и унифицированного отображения преобладания одного показателя относительно другого было введено понятие индекса соотношения. Использовали два индекса - канальцево-стромальный (КСИ) и эпителиально-стромальный (ЭСИ). Статистическая обработка данных осуществлялась пакетом Microsoft Excel 2000. Формулы и методы статистического анализа использовали из руководств [9, 10]. Оценка согласия распределения показателей с нормальным законом осуществлялась с помощью критерия Колмогорова-Смирнова, а также с помощью критерия Лиллиефорса, который учитывает уменьшение числа степеней свободы. Гипотезы проверялись на уровне значимости p=0,05. Для описания центральной тенденции использовали медиану (Me), первый и третий квартиль. Множественные сравнения проводили с помощью аналога дисперсионного анализа для непараметрических распределений - критерия Краскела-Уоллиса, с последующим применением в качестве апостериорного анализа критерия Данна. Для анализа линейной связи вычисляли коэффициент корреляции Спирмена (r) и проверяли его значимость на заданном уровне p=0,05. Для оценки силы связи полученный коэффициент корреляции Спирмена (r) оценивали по шкале Чеддока.

Для проведения статистического анализа исследуемые выборки были подвергнуты категоризации, которая является одним из способов группировки. Группировка - метод статистического исследования, позволяющий количественно оценить типичность и вариацию в изучаемом статистическом распределении.

Выборочная совокупность представлена 20 плодами антенатального периода: от 21-й до 41-й недели гестационного возраста. Схема распределения из­учаемых случаев выборочной совокупности антенатального периода представлена в табл. 1.

Для изначальной выборочной совокупности было введено понятие категории деления. Категория деления - КДn - подразумевает деление статистических групп с заданным показателем, относительно которого осуществляется деление исходной выборочной совокупности, на подгруппы в зависимости от возраста, топографического расположения и локализации яичка:

- первая категория деления - КД1 - подразумевает деление выборочной совокупности в зависимости от локализации яичка, его естественного перемещения в мошонку (абдоминальная, паховая, мошоночная) с учетом его топографического расположения (правое/левое) и недели гестационного возраста;

- вторая категория деления - КД2 - исходная выборочная совокупность, разделена на три группы в зависимости от естественного перемещения в мошонку и шесть подгрупп в зависимости от топографического расположения яичка - правое/левое: абдоминальное правое (объем выборки n=50), абдоминальное левое (n=50), паховое правое (n=30), паховое левое (n=10), мошоночное правое (n=120), мошоночное левое (n=120);

- третья категория деления - КД3 - подразумевает разделение всей выборочной совокупности на три подгруппы в зависимости от естественного перемещения в мошонку: абдоминальная (n=100), паховая (n=40), мошоночная (n=240), без учета его топографического расположения (правое/левое).

В результате категоризации из исходных выборок образованы категоризированные статистические распределения, которые и подлежали дальнейшему статистическому анализу.

Цель исследования - установить сходства в развитии яичек у плодов антенатального периода в зависимости от возраста, топографического расположения и локализации яичек, по микроморфометрическим индексам как отражение паренхиматозно-стромального взаимоотношения.

Задачи:

1. Сформировать категории деления - КДn.

2. Измерить в полученных подгруппах площадь компонентов паренхиматозно-стромального соотношения: интерстициальной соединительной ткани, извитых семенных канальцев, сперматогенного эпителия.

3. Сравнить между собой составляющие паренхиматозно-стромального соотношения: КСИ, ЭСИ, используя непараметрический критерий Краскела-Уоллиса, с последующим применением апостериорного анализа критерия Данна.

4. Осуществить количественную оценку статистической связи между изучаемыми параметрами и их соотношениями, используя коэффициент ранговой корреляции Спирмена.

Отличительной особенностью выборочной совокупности при абдоминальной локализации яичка, как правого, так и левого, явилось значительное преобладание межканальцевой соединительной ткани, вплоть до полного отсутствия в поле зрения извитых семенных канальцев. Сперматогенный эпителий извитых семенных канальцев представлен клетками Сертоли и подтипами половых клеток, в большей своей массе не поддающихся идентификации подтипов, но с хорошо определяемыми крупными округ­лыми клетками с выявляемым ядром и с наличием в нем ядрышек, а также эухроматина и гетерохроматина - гоноцитов.

Результаты морфометрического исследования по полученным соотношениям КСИ и ЭСИ в выборочной совокупности КД1 при абдоминальном расположении правого яичка характеризовались однородностью и не имели различий как по КСИ (&khgr;²=9,48>H=8,20), так и по ЭСИ (&khgr;²=9,48>H=6,75). В свою очередь в контралатеральном - левом яичке исключалась однородность по ЭСИ (&khgr;²=9,482=9,48

Проверка на однородность КСИ и ЭСИ правого яичка при паховой локализации в КД1 показала отсутствие значимых различий по КСИ (&khgr;²=5,99>H=2,18; p>0,08) и ЭСИ (&khgr;²=5,99>H=1,74; p>0,05).

Сравнительный анализ для мошоночной локализации правого и левого яичек при КД1 проводился для 12 случаев, соответствующих 25, 26, 27, 28, 29, 30, 32, 37, 38, 39, 40, 41-й неделям гестационного возраста. Значимые различия по КСИ в правом яичке начали себя проявлять четырьмя случаями, соответствующими 38-й и 39-й неделям гестационного возраста, со значимыми различиями в сравнении с 40-й и 41-й неделями гестационного возраста (p<0,05). Следует отметить, что случаи, соответствующие 38-й и 39-й неделям, как и 40-й и 41-й неделям, характеризовались однородностью (p>0,05) на фоне всей выборочной совокупности при КД1. По ЭСИ значимые различия в правом яичке были выявлены между 25-й и 39-й неделями (25/39) и 26-й и 39-й неделями (26/39) гестационного возраста. Между случаями, соответствующими 25-й и 26-й неделям, и со всеми остальными случаями различий не было (p>0,05).

В свою очередь в левом яичке значимые различия (p<0,05) были обнаружены между 26-й и 40-41-й (26/40-41-й), 29-й и 41-й, 38-й и 41-й, 39-й и 40-41-й неделями гестационного возраста как в отношении КСИ, так и ЭСИ.

Дальнейший анализ проводили в категории деления 2 - КД2. Множественный сравнительный анализ в КД2 показал значимые различия (p<0,05) по КСИ и ЭСИ в подгруппе левого яичка между группами абдоминальной и мошоночной локализации (табл. 2, 3), что не наблюдалось в подгруппе правого яичка, а все случаи данной выборочной совокупности не имели различий между собой (табл. 4, 5).

Третья категория деления - КД3 - подразумевала разделение всей выборочной совокупности на три подгруппы в зависимости от естественного спуска яичка в мошонку (абдоминальная, паховая, мошоночная локализация), без учета его топографического расположения (правое/левое). При сравнительном анализе этих подгрупп по методу Данна значимые различия были обнаружены между подгруппами по КСИ (p<0,05), абдоминальной и мошоночной локализацией, паховой и мошоночной, тогда как по ЭСИ различия (p<0,05) были обнаружены между абдоминальной и мошоночной локализацией (табл. 6).

В результате сопоставления индексов соотношений антенатального периода при КД3 между ними выявлены корреляционные связи. Выявление связей осуществляли только между подгруппами правого и левого яичка между одноименными индексами соотношений (ЭСИ правое яичко/ЭСИ левое яичко; КСИ правое яичко/КСИ левое яичко) в каждой группе соответствующей анатомической локализации физиологического перемещения яичка. Вместе с тем обнаруженные корреляции преимущественно оказываются умеренными и в отдельных случаях слабыми, но все имеют положительную тенденцию (табл. 8).

Таким образом, сравнительный микроморфометрический анализ между правым и левым яичком, проводимый с целью обнаружения сходства протекающих гистофизиологических процессов, указывает на определенную симметричность и умеренную зависимость между контралатеральными железами половой системы, а также косвенном взаимодействии, через показатели микроморфометрического соотношения.

1. В правом и левом яичках в процессе естественного спуска яичка в мошонку происходят синхронные изменения одноименных показателей и их соотношений, что указывает на определенную симметричность и умеренную зависимость между контралатеральными железами половой системы.

2. В левом яичке при анализе канальцево-стромального индекса значимые различия начинают себя проявлять на более ранних сроках гестации, тогда как в правом яичке данных различий обнаружено не было.

3. Категоризация деления позволяет более углубленно рассмотреть соотношения микроморфометрических показателей тканей яичка с позиций физиологического расположения яичка и топографической локализации.

4. При анализе показателей соотношений микроморфометрических данных яичка выявлены значимые различия в дистальных хронологических отрезках гестационного возраста (ранние и поздние сроки) и его локализации по отношению к перемещению в мошонку.