Проблема выделений из влагалища - самая распространенная жалоба среди женщин, обратившихся за амбулаторной гинекологической помощью. Причина этих выделений - наличие бактериального вагиноза, вульвовагинита, цервицита [1]. Этиология перечисленных заболеваний может быть самой разнообразной. При бактериальном вагинозе превалируют факультативные и облигатные анаэробные бактерии. При вульвовагините наиболее частыми возбудителями являются трихомонады, дрожжеподобные грибы рода Candida, а также ассоциации аэробных и анаэробных микроорганизмов. Цервицит наиболее часто вызывается хламидиями, гонококками, микоплазмами, относящимися к виду Mycoplasma genitalium [1-3].

В связи с тем что часто эти заболевания вызываются ассоциациями разных микроорганизмов, необходим поиск комбинированных препаратов, способных активно влиять на те микроорганизмы, которые могут составлять этиологическую структуру инфекций нижних отделов генитального тракта [6].

Таким средством является полижинакс - комбинированный препарат в виде вагинальных капсул, содержащий неомицина сульфат 35 000 МЕ, полимиксина В сульфат 35 000 МЕ и нистатин 100 000 МЕ. Спектр действия этого препарата достаточно широк. Он оказывает действие на дрожжеподобные грибы, грамположительные и грамотрицательные бактерии [4].

Цель нашего исследования - оценка действия полижинакса, комбинированного препарата, на микроорганизмы, выделенные из влагалища женщин репродуктивного возраста в опыте in vitro.

В исследование были включены 163 штамма микроорганизмов: Candida albicans (10 штаммов), Escherichia coli (14 штаммов), Citrobacter spp. (14 штаммов), Klebsiella spp. (11 штаммов), Proteus spp. (16 штаммов), Pseudomonas aeruginosa (10 штаммов), Haemophilus spp. (10 штаммов), Streptococcus agalactiae (11 штаммов), Streptococcus spp. (14 штаммов), Enterococcus spp. (11 штаммов), Staphylococcus aureus (18 штаммов), Staphylococcus saprophyticus (5 штаммов), Lactobacillus spp. (19 штаммов). Все микроорганизмы были выделены из влагалища женщин репродуктивного возраста.

В опыте in vitro использовали суточные культуры бактерий, выращенные в жидких питательных средах: в среде Сабуро для дрожжеподобных грибов, среде MRS для лактобацилл и в тиогликолевой среде для факультативных анаэробных бактерий.

Капсулы полижинакса вскрывали и растворяли их содержимое в изотоническом растворе натрия хлорида. Исследовались следующие разведения полижинакса: концентрированный раствор (содержимое 1 капсулы), далее разведения этого препарата в изотоническом растворе натрия хлорида 1:10, 1:100 и 1:1000.

Для определения чувствительности микроорганизмов к препарату использовали следующие питательные среды: Muller-Hinton Agar и Blood Muller-Hinton Agar (BioRad, США) с добавлением 3% донорской эритроцитарной массы и 2% сыворотки крупного рогатого скота. Выбор питательной среды проводили в зависимости от требовательности микроорганизма к условиям культивирования.

При проведении исследования 0,5 мл культуры микроорганизма из жидкой питательной среды наносили на поверхность плотной питательной среды (Muller-Hinton Agar или 5% Blood Muller-Hinton Agar) и равномерно с помощью шпателя распределяли по поверхности среды. Затем поочередно на четыре сектора калиброванной петлей наносили разведения полижинакса - от концентрированного препарата до его разведений (от 1:10 до 1:1000), на сектора 1, 2, 3 и 4 соответственно. Чашки Петри с нанесенными культурами и разведениями препарата инкубировали 24 ч при температуре термостата 37 °С. Культуры лактобацилл и Streptococcus sрp. инкубировали в анаэростате с Gas Pack («HiMedia», Индия) при температуре 37 °С 24 ч.

Учет результатов чувствительности микроорганизмов к препарату в разных разведениях проводили визуально, замеряя диаметр зоны задержки роста. Чувствительной к данному препарату считали культуру микроорганизмов с диаметром задержки роста для дрожжеподобных грибов более 18 мм (по нистатину), для других микроорганизмов более 17 мм (по неомицину).

В табл. 1

Эти данные свидетельствуют о том, что нистатин, входящий в состав полижинакса, является эффективным препаратом в лечении кандидозного вульвовагинита.

Результаты исследования чувствительности грамотрицательных микроорганизмов к полижинаксу приведены в табл. 2.

Поиск препаратов, эффективных в отношении бактерий, относящихся к семейству Enterobacteriaceae, очень важен, так как именно эти микроорганизмы являются частыми возбудителями неспецифических вульвовагинитов. Кроме того, в настоящее время описаны случаи выявления резистентности грамотрицательных бактерий к наиболее часто используемым антибактериальным препаратам [5, 7].

В состав полижинакса входит неомицина сульфат и полимиксин В. Неомицин - антибактериальный препарат, оказывающий бактерицидное действие как на грамположительные, так и на грамотрицательные микроорганизмы, а полимиксин действует преимущественно на грамотрицательные микроорганизмы. Поэтому не удивительно, что in vitro полижинакс эффективно действует на значительный спектр грамотрицательных бактерий. Их количество было значительным в исследовании - 75 штаммов.

Полижинакс без разведения и в разведении 1:10 (т.е. в концентрации 0,1) оказывал 100% эффект на все грамотрицательные микроорганизмы. Это имеет большое клиническое значение, так как капсула препарата вводится во влагалище, и препарат поступает в просвет влагалища в концентрированном виде. Что касается чувствительности грамотрицательных микроорганизмов к большим разведениям полижинакса (в 100 и 1000 раз), то лишь протей и синегнойная палочка были резистентны к этим разведениям препарата. В клинической практике вряд ли следует ожидать большого разведения препарата вагинальными выделениями.

Что касается чувствительности грамположительных бактерий к антибиотикам, входящим в состав полижинакса, в неразведенном состоянии препарат оказывает также 100% бактерицидный эффект (табл. 3).

Очень важным аспектом в изучении антибактериальных препаратов, назначаемых вагинально, является исследование их эффективности в отношении лактобацилл, выделяемых из вагинального биотопа. Важно, чтобы вагинальные лактобациллы были резистентны к изучаемому препарату, что гарантирует отсутствие негативного воздействия антибиотиков, входящих в состав полижинакса, на нормальную микрофлору влагалища [8].

Данные по чувствительности вагинальных лактобацилл к полижинаксу представлены в табл. 4.

Данные по чувствительности и резистентности разных групп микроорганизмов к полижинаксу суммированы на рисунке (а, б).

Таким образом, полижинакс, показавший in vitro высокую эффективность против большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий, выделенных из влагалища женщин репродуктивного возраста, а также против дрожжеподобных грибов рода Candida, не оказывающий действия на вагинальные лактобациллы, может быть рекомендован для лечения вагинальных инфекций.

1. На основании проведенного исследования по оценке действия полижинакса, комбинированного препарата, на микроорганизмы, выделенные из влагалища женщин репродуктивного возраста, в опыте in vitro установлено, что грамотрицательные бактерии (Escherichia coli,Citrobacter spp., Klebsiella spp., Proteus spp., Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus spp. ) и грамположительные бактерии (Streptococcus agalactiae, Streptococcus spp., Enterococcus spp., Staphylococcus aureus,Staphylococcus saprophyticus) высокочувствительны к антибактериальным препаратам, входящим в состав полижинакса.

2. Дрожжеподобные грибы рода Candida чувствительны к нистатину, который входит в состав полижинакса.

3. Лактобациллы, выделенные из влагалища женщин репродуктивного возраста, резистентны к полижинаксу, даже в самой низкой концентрации.