Рак шейки матки (РШМ) — одна из наиболее частых форм злокачественных новообразований у женщин. В последние годы по распространенности в развитых странах он занимает 4—5-е место [1]. Лечение РШМ до настоящего времени может быть радикальным лишь при раннем выявлении, тогда как частота запущенных случаев может превышать 40% [2]. Поэтому совершенствование консервативного лечения РШМ остается актуальной задачей.

Во многих современных исследованиях рассматривается роль цитокинов в патогенезе и при лечении злокачественных новообразований. При этом, несмотря на наличие хорошо разработанных методов исследования, стандартизацию подходов к определению тех или иных цитокинов, в публикациях содержатся разноречивые данные о направленности и степени их изменений у больных со злокачественными новообразованиями как в ткани опухоли, так и в сыворотке крови [3—5].

Цель исследования — определить особенности содержания цитокинов в сыворотке крови у больных РШМ, в том числе на фоне противоопухолевой терапии.

Нами обследованы 117 больных РШМ, подвергавшихся сочетанной лучевой терапии, в возрасте от 30 до 70 лет.

Критерии включения больных в исследование предусматривали: наличие РШМ IIB (Т2бN0M0) и III (Т1—2N1М0, T3N0—1M0) стадий при первичном обследовании; возраст от 30 до 70 лет; осуществление сочетанной лучевой терапии; наличие информированного согласия пациенток на проведение обследования и комбинированного лечения.

Критерии исключения: отсутствие информированного согласия пациентки или отказ ее от участия в исследовании на любом этапе кроме последнего (обработка информации); проведение оперативного вмешательства; наличие тяжелых соматических заболеваний; летальный исход в течение первых 3 мес после первичного обследования.

Сочетанная лучевая терапия (СЛТ) включала дистанционную и внутриполостную гамма-терапию. Дистанционную гамма-терапию в статическом или подвижном режиме проводили на область первичной опухоли и зоны возможного параметрального и лимфогенного распространения, чередуя с сеансами внутриполостной гамма-терапии. Суммарная очаговая доза (СОД) в точке В от дистанционного облучения — 40 Гр.

Внутриполостное облучение осуществляли методом введения метрокольпостатов и радиоактивных источников низкой активности до СОД 50—60 Гр в точке А или источников высокой активности (последовательное автоматизированное введение на аппарате Агат-В с фракционированием по 5 Гр — 10 сеансов).

У 39 больных РШМ (у 19 — IIB стадия и у 20 — III) проводили в те же сроки специфическую иммунотерапию (СИТ), включавшую реинфузию аутолимфоцитов, активированных in vitro препаратом рекомбинантного интерлейкина-2 (ронколейкин) и инкубированных с гомогенатом биопсийного материала новообразования. У 36 больных РШМ (у 19 — IIВ стадия и у 17 — III) проводили дополнительно адоптивную иммунотерапию (АИТ) препаратами флогэнзим (3 таблетки 3 раза в день в течение 7 сут) и ронколейкин в дозе 200 000—250 000 МЕ/кг в течение 4 нед через 2 сут внутривенно капельно.

Исследование содержания цитокинов осуществляли количественным иммуноферментным методом [6] с использованием диагностикумов фирмы «Вектор-Бест» (Барнаул, Россия) для определения IL-2 (№ по каталогу A-8772) IL-6 (A-8768) и фактор некроза опухоли-альфа (ФНО-α) (А-8756); фирмы «Bender MedSystems» (Австрия) для определения IL-12 (№ по каталогу BMS238). Первичное обследование осуществляли до начала лучевой терапии и иммунотерапии, повторное — в середине курса лучевой терапии при достижении СОД 20 Гр.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием параметрических (определение статистической значимости различий по Стьюденту) и непараметрических (по критерию χ² Пирсона) методов. Параметрический метод использован при соблюдении граничных условий (нормальное распределение в обеих сравниваемых группах и равенство дисперсий), непараметрический — во всех остальных случаях. Данные в таблицах представлены в виде суммы средних значений и среднеквадратических отклонений. Критерием статистической значимости различий служило соблюдение условия p<0,05.

Наши данные свидетельствуют о наличии однонаправленных изменений содержания некоторых цитокинов, степень которых обусловлена стадией заболевания. Результаты обследования больных РШМ IIВ стадии представлены в табл. 1.

Статистически значимые различия с показателями контрольной группы были зарегистрированы по содержанию IL-2, IL-6, IL-12 и ФНО-α. При этом содержание IL-12, ФНО-α повышалось, а содержание IL-2 и IL-6 снижалось на 27,4 и 39,7% соответственно, p<0,01 в обоих случаях.

Большой интерес вызывает IL-12, обладающий полипотентным противоопухолевым эффектом. Он усиливает активность Т-киллеров, NK- и LAK-клеток. IL-12 активирует и цитотоксичность макрофагов, а дефицит его продукции может снижать противоопухолевую активность. Усиление роста опухоли, в частности рака прямой кишки, ассоциируется со снижением продукции IL-12 и усилением продукции IL-10. Важным свойством IL-12 является усиление экспрессии FasL и индукция апоптоза [7]. Рекомбинантный IL-12 способен препятствовать метастазированию в лимфатические узлы. IL-12 замедляет у онкологических больных развитие кахексии и анемии, индуцированной IL-1β и IL-6 [8].

В ряде исследований [9] содержатся данные об отсутствии изменений содержания IL-12 при различных злокачественных новообразованиях, в том числе при РШМ. Однако другие авторы [10] утверждают, что его концентрация может значительно повышаться (вплоть до сотен раз по сравнению со здоровыми лицами).

В настоящей работе мы выявили более умеренное, однако значимое превышение содержания IL-12 в сыворотке крови у обследованных больных РШМ IIB стадии, составившее 269,5% по отношению к контрольной группе (p<0,01).

ФНО-α также оказывает противоопухолевое действие, в частности за счет активации клеточных механизмов иммунного ответа. Известны данные о повышении его содержания у больных со злокачественными новообразованиями [10, 11].

Выявлено значимое превышение концентрации данного цитокина (38,6%) относительно обследованных здоровых лиц (p<0,05).

Таким образом, при анализе содержания цитокинов нами было определено наличие активации цитокиновой регуляции для достижения противоопухолевого иммунного ответа. Однако показатели клеточного звена как в наших исследованиях, так и в работах других авторов, свидетельствуют, что этот результат организмом не достигается, развивается существенный иммунный дисбаланс, связанный с недостаточностью эффекторных систем.

Содержание цитокинов у больных РШМ III стадии показано в табл. 2.

Содержание IL-2 у больных РШМ III стадии снижено по сравнению с контрольной группой на 31,9% (p<0,01), а содержание IL-6 — на 49,3% (p<0,01). В то же время содержание противовоспалительного цитокина IL-10 не имело существенных различий между сравниваемыми группами. Наиболее резко повысилось содержание IL-12, которое превышало контрольный уровень в 6,9 раза (p<0,01). Отмечено и значимое превышение содержания ФНО-α — на 79,5% (p<0,05). Таким образом, и для больных РШМ III стадии характерен выраженный дисбаланс содержания гуморальных иммунорегуляторных факторов в крови.

В группу сравнения были включены больные, подвергавшиеся только СЛТ. Как по отношению к контрольной группе, так и в динамике у пациенток РШМ IIB стадии (табл. 3)

При проведении СИТ в сочетании с АИТ препаратами ронколейкин и флогэнзим было зарегистрировано значительное превышение содержания в крови IL-6 (на 115,4%, p<0,01), а также относительное снижение IL-12 (на 24,2%, p<0,05). Различия между группами в зависимости от проведения АИТ были статистически значимыми только в отношении концентрации IL-6 (p<0,01). В целом показатели содержания интерлейкинов у обследованных больных, подвергавшихся иммунотерапии, были ближе к уровню баланса у здоровых лиц.

Аналогичные особенности были выявлены у больных РШМ III стадии (табл. 4).

Статистически значимыми были различия между группой сравнения (СЛТ) и комбинированной терапии, включающей СИТ в сочетании с АИТ.

Так, превышение содержания IL-6 составило 103,0% (p<0,01), различия по содержанию IL-2 — 23,2%, а IL-12 — 50,5% (в сторону превышения), p<0,05 в обоих случаях.

Тенденцию к нормализации имели также показатели содержания остальных исследованных цитокинов.

Таким образом, проведенный анализ содержания цитокинов в крови позволяет нам сделать заключение о наличии позитивного воздействия сочетания специфической и адоптивной иммунотерапии на эти показатели, что в совокупности с клиническими данными служит основанием для его применения в практике.