Сайт издательства «Медиа Сфера»
содержит материалы, предназначенные исключительно для работников здравоохранения. Закрывая это сообщение, Вы подтверждаете, что являетесь дипломированным медицинским работником или студентом медицинского образовательного учреждения.

Щукина Н.А.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии

Буянова С.Н.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии

Кондриков Н.И.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии

Тихомирова А.С.

ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии» Минздрава Московской области, Москва, Россия

Баринова И.В.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии

Шеина Е.Н.

ГБУЗ МО "Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии"

Клинико-морфологические аспекты лейомиомы матки у молодых женщин

Авторы:

Щукина Н.А., Буянова С.Н., Кондриков Н.И., Тихомирова А.С., Баринова И.В., Шеина Е.Н.

Подробнее об авторах

Журнал: Российский вестник акушера-гинеколога. 2016;16(1): 21‑27

Просмотров: 806

Загрузок: 26

Как цитировать:

Щукина Н.А., Буянова С.Н., Кондриков Н.И., Тихомирова А.С., Баринова И.В., Шеина Е.Н. Клинико-морфологические аспекты лейомиомы матки у молодых женщин. Российский вестник акушера-гинеколога. 2016;16(1):21‑27.
Shchukina NA, Buianova SN, Kondrikov NI, Tikhomirova AS, Barinova IV, Sheina EN. Uterine leiomyoma in young women: Clinical and morphological aspects. Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist. 2016;16(1):21‑27. (In Russ.).
https://doi.org/10.17116/rosakush201616121-27

?>

Миома матки — одно из наиболее частых доброкачественных новообразований, которое, благодаря современным методам исследования, все чаще диагностируется у женщин репродуктивного возраста и нередко сопровождается выраженными клиническими симптомами и нарушением репродуктивной функции [1—6]. Как известно, для лечения миомы матки, особенно у молодых женщин, применяются органосохраняющие операции, в основном миомэктомии, поскольку такие малоинвазивные технологии, как эмболизация маточных артерий и фокальная ультразвуковая аблация миоматозного узла чаще используются у пациенток позднего репродуктивного возраста и в перименопаузе, и их результаты (отношение восстановления фертильности и последующего течения беременности и родов у молодых нерожавших пациенток) требуют дальнейшего изучения [7, 8]. Вместе с тем этиологические факторы и патогенетические механизмы образования миомы остаются неясными. Цитогенетические методы исследования выявили опухолеспецифические изменения кариотипа ткани почти в каждом втором миоматозном узле, притом аберрации наиболее часто касаются хромосом 6, 7, 12 и 14-й в области генов, ответственных за процессы деления, дифференцировки и апоптоза. Однако данные хромосомные аберрации являются вторичными, они происходят под воздействием многих эпигенетических факторов [9, 10]. Несмотря на многочисленные исследования, все еще разноречивыми остаются данные, касающиеся роли эстрогена и прогестерона в развитии и росте лейомиомы тела матки. Согласно данным литературы, особое значение в патогенезе лейомиомы имеет сочетанное воздействие стероидных гормонов, которые реализуют свое действие через специфические рецепторы, содержащиеся в миоцитах. При этом не исключается, что прогестерон способствует росту лейомиомы, воздействуя на ключевые гены, регулирующие пролиферацию и апоптоз [11—16]. Немалое значение в патогенезе лейомиомы придается различным факторам роста и ангиогенезу, поскольку в последнем участвуют сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF), основной фактор роста фибробластов (FGF2) и др., экспрессия которых регулируется стероидными гормонами [14—17]. Наши исследования указывают на тенденцию к «омоложению» пациенток с данным заболеванием, ведущих активную половую жизнь, планирующих беременность на более поздний репродуктивный период. Так, только в гинекологической клинике ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии» на протяжении последних 6 лет миомэктомия была выполнена у 376 больных моложе 35 лет.

Цель исследования — изучение клинико-морфологических особенностей лейомиомы тела матки у женщин раннего репродуктивного возраста, включая исследование экспрессии рецепторов эстрогена, прогестерона, определение пролиферативного индекса, а также подсчет сосудов капиллярного типа в опухолевых узлах.

Материал и методы

Иммуногистохимическое исследование лейомиом было проведено у 8 пациенток в возрасте 24—30 лет, нормального телосложения (индекс массы тела 24,3±0,3 кг/м2), с анамнестическими указаниями на отсутствие родов и абортов. У всех женщин миомэктомия была произведена в фолликулярную фазу цикла. Возраст менархе — от 11 до 15 лет, в среднем — 13,8±1 год, менструации обильные, по 6±0,4 дня через 28,1±0,3 дня. У всех пациенток была анемия, средний уровень гемоглобина составил 117,00±15,72 г/л, эритроцитов — 3,68±0,95·1012л. Начало половой жизни колебалось от 16 лет до 21 года, в среднем — 18,8±1,9 года. Ввиду молодого возраста экстрагенитальные заболевания выявлены только у 1 пациентки — мочекаменная болезнь. Длительность заболевания лейомиомой варьировала от 1 мес до 3 лет, в среднем 1,4±0,5 года. Размеры матки соответствовали ее величине, при сроке беременности от 13 до 18 нед, в среднем 15,8±1,5 нед. У каждой пациентки было удалено 2—3 миоматозных узла диаметром до 9 см. Всего было исследовано 20 опухолевых узлов, из каждого были взяты 3—4 образца опухолевой ткани и фрагменты прилежащего миометрия. Материал фиксировали в 10% забуференном формалине, проводку осуществляли по стандартной методике, парафиновые срезы толщиной 4 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Иммуногистохимическое исследование фрагментов лейомиомы проводили в полуавтоматическом аппарате Thermo lab vision 480S по стандартной методике с использованием системы визуализации, рекомендованной производителем антител Thermo scientific. Исследовалась экспрессия рецепторов эстрогена ER (антитела Thermo scientific клон SP1), рецепторов прогестерона PR (клон hPRa2+ hPRa3), экспрессия рецепторов Ki-67 маркера клеточной пролиферации (кроличьи моноклональные антитела, клон SP6), экспрессия рецепторов CD31 (клон JC/70A) — для изучения особенностей васкуляризации опухолевой ткани и прилежащего миометрия. Фоновое окрашивание осуществляли гематоксилином. Оценку качества реакции проводили на срезах с позитивным контролем для каждого антигена. Количественную оценку степени экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона выполняли полуколичественным методом по системе Hystochemical score (Hscore). Система подсчета включала интенсивность иммуногистохимической окраски ядер, оцениваемой по 3-балльной шкале, и процент окрашенных ядер. Подсчет проводили в трех участках по 100 опухолевых клеток в различных полях зрения объективом ×40. Интенсивность окраски оценивалась следующим образом: 0 — нет окрашивания, 1 — слабое окрашивание, 2 — умеренное и 3 — сильное окрашивание. Формула подсчета: Hscore = Σ Pi·i, где: Pi — процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью, i — интенсивность окрашивания, выраженная в баллах от 0 до 3. Выраженность экспрессии рецепторов стероидных гормонов определяли на основании результата Hscore: 0—50 баллов — отрицательная, 51—100 баллов — низкая, 101—200 баллов — умеренная и 201 и более баллов — высокая. Производили также и оценку экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона методом подсчета процентного соотношения позитивно окрашенных ядер любой интенсивности при увеличении 400 в трех полях зрения с вычислением среднего арифметического значения. Известно, что оценка экспрессии рецепторов CD31 в эндотелиоцитах не имеет четких критериев. В данном исследовании подсчитывали количество сосудов капиллярного типа в трех полях зрения или по одному полю зрения в каждом фрагменте узла, если фрагментов было 3 и больше с последующим вычислением среднего арифметического значения. Интенсивность экспрессии рецепторов CD31 оценивали отдельно по 3-балльной шкале, она являлась неизменной во всех фрагментах и составляла 3 балла. Определение индекса пролиферации — экспрессии рецепторов Ki-67 — проводили путем подсчета позитивно окрашенных ядер любой интенсивности на 100 ядер при общем увеличении микроскопа 400. Результат выражали в процентах. Просмотр и фотографирование микропрепаратов выполняли на микроскопе AxioImager. M2 с использованием цифровой камеры AxioCam MRc5.

Результаты

Данные морфологического исследования опухолевых узлов свидетельствовали о том, что они представляли собой лейомиому с вариабельным соотношением гладкомышечной ткани, межклеточного матрикса и сосудов. При иммуногистохимическом исследовании в лейомиомах отмечалась низкая (50%) и умеренная (50%) экспрессия рецепторов эстрогена (рис. 1, а) и умеренная (50%) и высокая (50%) экспрессия рецепторов прогестерона (см. рис. 1, б), при этом средние показатели экспрессии последних были выше, чем рецепторов эстрогена (рис. 2).

Рис. 1. Умеренная экспрессия рецепторов эстрогена в ткани лейомиомы (а); высокая экспрессия рецепторов прогестерона в ткани лейомиомы (б). Микрофото. Ув. 400.

Рис. 2. Экспрессия рецепторов половых гормонов — прогестерона (PR), эстрогена (ER) в исследованных образцах лейомиом по шкале Hscore (n=8).

Результаты иммуногистохимического исследования рецепторов эстрогена и прогестерона в процентах в сопоставлении с данными их определения по системе Hscore представлены на рис. 3.

Рис. 3. Результаты иммуногистохимического исследования экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона по системе Hscore (а) и в процентах (б).

Сразу два метода оценки экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогена применялись для получения возможности сравнения экспрессии рецепторов данных гормонов с экспрессией рецепторов Ki-67. Следует отметить, что результаты данных двух методов оценки экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона можно считать сопоставимыми, и дальнейшее использование в исследовании результатов, выраженных в процентах, было возможным.

Данные экспрессии рецепторов эстрогена, прогестерона и маркера клеточной пролиферации Ki-67 (рис. 4) в лейомиоме и прилежащем миометрии свидетельствовали о более высоких их показателях в опухолевых узлах у пациенток раннего репродуктивного возраста с миомой матки (рис. 5).

Рис. 4. Экспрессия рецепторов Ki-67 в лейомиоме: индекс пролиферации низкий. Микрофото. Ув. 400.

Рис. 5. Средние значения экспрессии рецепторов эстрогена, прогестерона и маркера клеточной пролиферации Ki-67 в лейомиомах и миометрии.

Показатели экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона и маркера клеточной пролиферации в лейомиомах и прилежащем миометрии применительно к каждому исследованному узлу представлены соответственно на рис. 6. Пролиферативная активность (маркер клеточной пролиферации Ki-67) в миометрии во всех образцах ткани отсутствовала.

Рис. 6. Экспрессия рецепторов эстрогена и прогестерона и показателя маркера клеточной пролиферации Ki-67 в лейомиомах (а) и рецепторов эстрогена и прогестерона в миометрии (б).

На основании сводных данных (см. таблицу) можно отметить совместное влияние стероидных гормонов на рост лейомиомы, о чем свидетельствует одновременное повышение и снижение экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона, причем снижение показателей экспрессии сопровождается уменьшением пролиферативного индекса. Наиболее выраженная экспрессия рецепторов прогестерона (93%) отмечена в ткани узла с наибольшим количеством капилляров (38 капилляров в поле зрения) и самым высоким индексом пролиферации (7%) в опухолевой ткани.

Показатели экспрессии рецепторов эстрогена, прогестерона, Ki-67 и CD31 в лейомиомах (ЛМ) и миометрии (ММ) у 8 пациенток

Интенсивность экспрессии рецепторов CD31 в эндотелиальных клетках во всех взятых фрагментах ткани была максимальной и составляла 3 балла (рис. 7).

Рис. 7. Высокая экспрессия CD31 в сосудах ткани лейомиомы. Микрофото. Ув. 400.

Обсуждение

Иммуногистохимическое исследование широко применяется для изучения пролиферативной активности и васкуляризации, а также метаболических параметров и в дифференциальной диагностике опухолевых поражений. Несмотря на многочисленные исследования различных молекулярно-биологических аспектов лейомиомы тела матки, патогенетические особенности опухоли все еще — предмет дискуссии. Считается, что лейомиома тела матки является гормонзависимым заболеванием, развитие которого связано с воздействием стероидных гормонов, при этом отмечается более высокая экспрессия рецепторов эстрогена и прогестерона в опухолевой ткани, чем в неизмененном миометрии [18]. Более высокая экспрессия рецепторов эстрогена и прогестерона в клетках лейомиомы по сравнению с прилежащим неизмененным миометрием подтверждается и нашими данными при исследовании опухолевой ткани у молодых женщин, при этом экспрессия рецепторов прогестерона превышала таковую рецепторов эстрогена, а пролиферативная активность (Ki-67) обнаружена только в лейомиоме и отсутствовала в миометрии. В настоящее время именно прогестерону придается особое значение в росте лейомиомы. Однако согласно экспериментальным данным роста опухолевой ткани под воздействием только эстрогена или только прогестерона не наблюдается [19]. Исследователи установили, что увеличение ткани в миоматозных узлах происходит при сочетанном воздействии эстрогена и прогестерона, пролиферация клеток наиболее интенсивная на более ранних этапах развития опухоли, увеличение опухолевой ткани связано и с повышением объема внеклеточного матрикса. В связи с этим указывается, что эстроген не следует рассматривать в качестве митогенного средства, данный стероидный гормон способствует увеличению в клетках рецепторов прогестерона, через которые и осуществляется воздействие последнего, приводящее к пролиферации клеток и накоплению внеклеточного матрикса. Как известно, внеклеточный матрикс состоит из фиброзного/коллагенового компонента, различных факторов роста, цитокинов, протеаз, провоспалительных и ангиогенных факторов, также участвующих в пролиферации и дифференцировке опухолевых клеток, при этом не исключается существенное значение прогестерона [11—20].

Согласно нашим наблюдениям, васкуляризация ткани лейомиомы была вариабельной как в опухоли, так и в неизмененном миометрии. Вместе с тем наиболее выраженная экспрессия рецепторов прогестерона сопровождалась бόльшим количеством капилляров в опухолевой ткани, что сочеталось с повышенным индексом пролиферации клеток.

Таким образом, факторы, благодаря которым происходит рост лейомиомы, отличаются выраженным многообразием и сложными сигнальными путями взаимодействия между опухолевыми клетками, компонентами внеклеточного матрикса и ангиогенезом. Нельзя не согласиться с данными литературы, согласно которым развитие опухоли обусловлено влиянием стероидных гормонов, особенно прогестерона, и их воздействием на функциональные параметры внеклеточного матрикса. Не вызывает сомнения, что накопление фактического материала в отношении молекулярных основ развития лейомиомы будет способствовать разработке рациональной терапии и хирургии данной опухоли.

Выводы

Более высокая экспрессия рецепторов эстрогена и прогестерона наблюдалась в клетках лейомиомы по сравнению с прилежащим неизмененным миометрием, при этом экспрессия рецепторов прогестерона превышала таковую рецепторов эстрогена, а пролиферативная активность (Ki-67) была обнаружена только в лейомиоме и отсутствовала в здоровом миометрии.

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо с ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail