Диагностические возможности исследования осадка эякулята с помощью амплификации нуклеиновых кислот методом полимеразно-цепной реакции в режиме реального времени и микробиологического исследования при поиске причин нарушения мужской репродуктивной функции

Сапожкова Ж.Ю.

Международная Школа Цитологии и Медицинская Школа Инноваций;
ООО «Подольский диагностический центр»

Милованова Г.А.

ООО «Подольский диагностический центр»;
ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России

Почерников Д.Г.

ФГБОУ ВО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздрава России

Постовойтенко Н.Т.

ООО «Мать и дитя Владимир»

Диагностические возможности исследования осадка эякулята с помощью амплификации нуклеиновых кислот методом полимеразно-цепной реакции в режиме реального времени и микробиологического исследования при поиске причин нарушения мужской репродуктивной функции

Авторы:

Сапожкова Ж.Ю., Милованова Г.А., Почерников Д.Г., Постовойтенко Н.Т.

Подробнее об авторах

Журнал: Медицинские технологии. Оценка и выбор. 2022;44(2): 62‑71

DOI: 10.17116/medtech20224402162

Загрузок: 2

Связаться с автором

Оглавление

Как цитировать:

Сапожкова Ж.Ю., Милованова Г.А., Почерников Д.Г., Постовойтенко Н.Т. Диагностические возможности исследования осадка эякулята с помощью амплификации нуклеиновых кислот методом полимеразно-цепной реакции в режиме реального времени и микробиологического исследования при поиске причин нарушения мужской репродуктивной функции. Медицинские технологии. Оценка и выбор. 2022;44(2):62‑71.
Sapozhkova ZhYu, Milovanova GA, Pochernikov DG, Postovoitenko NT. Diagnostic capabilities of ejaculate sediment examination with the help of nucleic acid amplification by polymerase chain reaction and microbiologic examination in searching for causes of male reproductive disfunction. Medical Technologies. Assessment and Choice. 2022;44(2):62‑71. (In Russ.)
https://doi.org/10.17116/medtech20224402162

Закрыть метаданные

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Провести анализ диагностических возможностей метода амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) с помощью полимеразно-цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени и микробиологического исследования осадка эякулята при установлении причин нарушения мужской репродуктивной функции.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

За период с 2017 по 2021 г. обследовано 529 образцов осадка эякулята мужчин в возрасте от 18 до 59 лет с бесплодием и инфекцией мужских добавочных половых желез (Male Accessory Gland Infection/MAGI). Сравнительную идентификацию микроорганизмов для микробиологического (МБА) и молекулярного анализа проводили матрично-ассоциированной лазерной десорбцией/ионизацией время-пролетной масс-спектрометрией (MALDI-TOF MS) и МАНК ПЦР в режиме реального времени, реализуемой в тесте «Андрофлор» (МАНК/ПЦР-РВ/Андрофлор).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Значимую бактериоспермию осадка эякулята чаще удавалось выявить по данным молекулярного теста «Андрофлор» по сравнению с МБА — 402 (76%) и 237 (44,8%) соответственно (p<0,01). Анализ структуры биотопа образцов, установленный двумя методами, указывает на полное совпадение микробного статуса только в 40 (7,6%) из 529 случаев; в остальном микробиота при МБА либо отсутствовала 83 (15,7%), либо спектры выявленных микроорганизмов различались. Отмечены различия в структуре выделенных групп микроорганизмов в кластере преобладающей группы облигатно-анаэробных условно-патогенных микроорганизмов (p<0,01), в группе грамположительных факультативно-анаэробных микроорганизмов Pseudomonas aeruginosa/Ralstonia spp./Burkholderia spp. (p<0,01) и Haemophilus spp. (p<0,01), а также по монокультуре Enterobacteriaceae spp./Enterococcus spp. (p<0,01). В группе с нормальной флорой по результатам МАНК/ПЦР-РВ/Андрофлор чаще выявляли ассоциации микроорганизмов — 103 (81,1%), при МБА — монокультуру — 216 (74%) (p<0,01).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для эффективного лабораторного обследования и своевременного лечения мужчин с нарушением репродуктивной функции рекомендовано использование молекулярного теста «Андрофлор» в осадке эякулята. Актуальность применения микробиологического исследования сохраняется, так как с помощью этого метода можно определить чувствительность микроорганизмов к антибиотикам и обнаружить различные энтеробактерии, медикаментозная терапия которых может отличаться.

Ключевые слова:

исследование осадка эякулята

ПЦР-РВ

«Андрофлор»

микробиологический анализ

инфекции мужских добавочных половых желез

мужское бесплодие

Авторы:

Сапожкова Ж.Ю.

Международная Школа Цитологии и Медицинская Школа Инноваций;
ООО «Подольский диагностический центр»

Милованова Г.А.

Почерников Д.Г.

ФГБОУ ВО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздрава России

Постовойтенко Н.Т.

ООО «Мать и дитя Владимир»

Дата поступления:

21.02.2022

Дата принятия в печать:

25.03.2022

Список литературы:

WHO Health Topics. Infertility. Accessed January 28, 2022. https://www.who.int/health-topics/infertility#tab=tab_1
Agarwal A, Mulgund A, Hamada A, Chyatte MR. A unique view on male infertility around the globe. Reproductive Biology and Endocrinology: RB&E. 2015;13:37. https://doi.org/10.1186/s12958-015-0032-1
Levine H, Jørgensen N, Martino-Andrade A, Mendiola J, Weksler-Derri D, Mindlis I, et al. Temporal trends in sperm count: a systematic review and meta-regression analysis. Human Reproduction Update. 2017;23(6):646-659. https://doi.org/10.1093/humupd/dmx022
Moretti E, Figura N, Campagna MS, Iacoponi F, Gonnelli S, Collodel G. Infectious Burden and Semen Parameters. Urology. 2017;100:90-96. https://doi.org/10.1016/j.urology.2016.10.032
Ahmadi MH, Mirsalehian A, Sadighi Gilani MA, Bahador A, Talebi M. Asymptomatic Infection with Mycoplasma hominis Negatively Affects Semen Parameters and Leads to Male Infertility as Confirmed by Improved Semen Parameters After Antibiotic Treatment. Urology. 2017;100:97-102. https://doi.org/10.1016/j.urology.2016.11.018
Agarwal A, Parekh N, Panner Selvam MK, Henkel R, Shah R, Homa ST, et al. Male Oxidative Stress Infertility (MOSI): Proposed Terminology and Clinical Practice Guidelines for Management of Idiopathic Male Infertility. The World Journal of Men’s Health. 2019;37(3):296-312. https://doi.org/10.5534/wjmh.190055
Ворошилина Е.С., Зорников Д.Л., Паначева Е.А. Сравнительное исследование микробиоты эякулята методом количественной ПЦР и культуральным методом. Вестник Российского государственного медицинского университета. 2019;1:44-49. https://doi.org/10.24075/vrgmu.2019.009
Почерников Д.Г., Постовойтенко Н.Т., Стрельников А.И. Сравнительный анализ культурального и молекулярно-генетического методов в исследовании микробиоты эякулята при мужской инфертильности. Андрология и генитальная хирургия. 2019;20(2):40-47. https://doi.org/10.17650/2070-9781-2019-20-2-40-47
Ворошилина Е.С., Зорников Д.Л., Иванов А.В., Почерников Д.Г., Паначева Е.А. Микробиота эякулята: кластерный анализ результатов, полученных методом ПЦР-РВ. Вестник Российского государственного медицинского университета. 2020;5:66-73.
WHO Laboratory Manual for the Examination and Processing of Human Semen. Sixth edition. 2021. Accessed January 28, 2022. https://www.who.int/publications/i/item/9789240030787
Инструкция по применению набора реагентов для исследования микрофлоры урогенитального тракта мужчин методом ПЦР в режиме реального времени. Фасовка стандартная (S). Варианты комплектации: Андрофлор и Андрофлор Скрин (ООО НПО «ДНК-Технология», Россия). Ссылка активна на 28.01.22. https://www.dna-technology.ru/sites/default/files/393-4_s_androflorskrin_ivd_b_2021-06-21_0.pdf EAU
Guidelines on Urological Infections. 2022. Accessed January 28, 2022. https://d56bochluxqnz.cloudfront.net/documents/full-guideline/EAU-Guidelines-on-Urological-Infections-2022.pdf
EAU Guidelines on Male Infertility. 2019. Accessed January 28, 2022. https://d56bochluxqnz.cloudfront.net/media/EAU-Guidelines-on-Male-Infertility-2019.pdf
Мужское бесплодие. Клинические рекомендации. Одобрены Научно-практическим Советом Минздрава России. 2021.
Дерматовенерология 2015: Болезни кожи. Инфекции, передаваемые половым путем. Федеральные клинические рекомендации. М.: Деловой экспресс; 2016. Ссылка активна на 28.01.22. https://cnikvi.ru/docs/2335_maket_30.pdf
Cregger M, Lenz KM, Leary E, Leach RE, Fazleabas AT, White BA, et al. Reproductive Microbiomes: Using the Microbiome as a Novel Diagnostic Tool for Endometriosis. Reproductive Immunology: Open Access. 2017;2(3):36. https://doi.org/10.21767/2476-1974.100036
Mändar R, Punab M, Borovkova N, Lapp E, Kiiker R, Korrovits P, et al. Complementary seminovaginal microbiome in couples. Research in Microbiology. 2015;166(5):440-447. https://doi.org/10.1016/j.resmic.2015.03.009
Tao X, Franasiak JM, Zhan Y, Scott RT, Rajchel J, Bedard J, et al. Characterizing the endometrial microbiome by analyzing the ultra-low bacteria from embryo transfer catheter tips in IVF cycles: Next generation sequencing (NGS) analysis of the 16S ribosomal gene. Human Microbiome Journal. 2017;3:15-21. https://doi.org/10.1016/J.HUMIC.2017.01.004
Freitas AC, Chaban B, Bocking A, Rocco M, Yang S, Hill JE, et al.; VOGUE Research Group. The vaginal microbiome of pregnant women is less rich and diverse, with lower prevalence of Mollicutes, compared to non-pregnant women. Scientific Reports. 2017;7(1):9212. https://doi.org/10.1038/s41598-017-07790-9
Budd WT, Harwich MD, Meyers G, Dilts JR, Woody JR, Reynolds T. Metagenomics Analysis Using Next Generation Sequencing of Vaginal Samples from Community Practices in the US. MOJ Cell Science and Report. 2015;2(2):16-25. https://doi.org/10.15406/mojcsr.2015.02.00020
García-Velasco JA, Menabrito M, Catalán IB. What fertility specialists should know about the vaginal microbiome: a review. Reproductive Biomedicine Online. 2017;35(1):103-112. https://doi.org/10.1016/j.rbmo.2017.04.005
Сапожкова Ж.Ю. Способ микроскопической диагностики качества спермы после седиментации эякулята. Патент РФ на изобретение №2686685/30.04.2019. Бюл. №13. Ссылка активна на 28.01.22. https://test2.fips.ru/ofpstorage/Doc/IZPM/RUNWC1/000/000/002/686/685/%D0%98%D0%97-02686685-00001/DOCCLAIM.PDF
Sapozhkova Z, Kasoyan K, Kovalchuk E, Shabalova I. Sperm Sediment Cytology: A New Technique for Diagnosing Occult Urologic Infections. Acta Cytologica. 2017;61(3):247-251. https://doi.org/10.1159/000469653
Сапожкова Ж.Ю., Милованова Г.А., Пацап О.И. Лабораторная диагностика мужского бесплодия. Маркеры и методы. Часть II. Лабораторная и клиническая медицина. Фармация. 2021;1(2):65-79. https://doi.org/10.14489/lcmp.2021.02.pp.065-079
Сапожкова Ж.Ю., Шабалова И.П., Касоян К.Т. Исследование осадка эякулята в диагностике инфекций, передаваемых половым путем: учебное пособие. М.—Тверь: Триада; 2017.
Сапожкова Ж.Ю., Милованова Г.А., Пацап О.И. Лабораторная диагностика мужского бесплодия. Маркеры. Часть I. Лабораторная и клиническая медицина. Фармация. 2021;1(1):57-68. https://doi.org/10.14489/lcmp.2021.01.pp.057-068
Jarvi K, Lacroix JM, Jain A, Dumitru I, Heritz D, Mittelman MW. Polymerase chain reaction-based detection of bacteria in semen. Fertility and Sterility. 1996;66(3):463-467.

Закрыть метаданные