ВВЕДЕНИЕ
Оценка поствакцинального иммунитета против гриппа преимущественно основана на исследовании гуморального звена, в то время как роль клеточного иммунного ответа, обеспечивающего перекрестную защиту и долговременную иммунную память, часто остается без внимания из-за отсутствия стандартизированных коммерческих методов его оценки.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
И апробировать методики определения антиген-специфического T-клеточного ответа к вирусу гриппа подтипов A(H1N1), A(H3N2) и типа B методами ELISPOT и ИФА.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование выполнено в два этапа: на первом (n=20 доноров) подобрана оптимальная концентрация антигенов (200–1 мкг/мл), на втором этапе проанализирована динамика иммунного ответа у 100 добровольцев до и после вакцинации (на 7-й и 28-й дни) с использованием методов ELISPOT (подсчет IFNγ-продуцирующих клеток) и ИФА (количественное определение IFNγ и IL-2). Статистическая обработка проведена непараметрическими методами.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Установлена оптимальная концентрация для всех тестируемых антигенов гриппа — 10 мкг/мл, обеспечивающая специфический сигнал без неспецифической активации клеток. Анализ образцов добровольцев выявил статистически значимое увеличение всех изучаемых показателей клеточного иммунитета (IL-2 и IFNγ и IFNγ-продуцирующих клеток) к 28-му дню после вакцинации по сравнению с исходным уровнем (p<0,001). При этом пик секреции IL-2 и IFNγ наблюдался на 7-й день, с последующим незначительным снижением к 28-му дню.
ВЫВОДЫ
Разработаны и апробированы методики оценки T-клеточного иммунитета к вирусу гриппа, позволяющие отслеживать динамику иммунного ответа после вакцинации. Полученные данные подтверждают формирование специфического клеточного ответа и подчеркивают важность его мониторинга для комплексной оценки иммуногенности вакцин.