ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Изучить влияние активных метаболитов биофлавоноидов гесперидина и диосмина (гесперетина и диосметина) на уровень маркеров ремоделирования (фактор фон Виллебранда (vWF), молекула клеточной адгезии тромбоцитов к эндотелиальным клеткам-1 (CD31), фибронектин (FN), виментин (VIM), ингибитор активации плазминогена 1-го типа (PAI-1)) в первичной культуре эндотелиоцитов.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследование проводили на первичных культурах эндотелиальных клеток пуповины человека (HUVEC) in vitro. Концентрации веществ были выбраны на основе данных литературы, согласно оценке содержания в плазме крови активных метаболитов действующих веществ после приема лекарственных препаратов, содержащих диосмин и гесперидин, а также на основе исследований in vitro.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Гесперетин в концентрации 0,5 мкМ и диосметин в концентрации 1,5 мкМ не оказывали влияния на относительное количество VIM в культурах клеток HUVEC. При концентрации диосметина 15 мкМ наблюдали снижение маркера на 45,6% (p=0,0006). Комбинация гесперетина (5 мкМ) и диосметина (15 мкМ) приводила к снижению VIM на 38,8% (p=0,0016). При увеличении концентраций до 150 мкМ для диосметина и 50 мкМ для гесперетина отмечали снижение уровня VIM на 60,2% (p=0,0001) и 49,5% (p=0,0004) соответственно. Гесперетин, диосметин и их комбинация в концентрациях 0,5 и 1,5 мкМ снижали относительное количество vWF на 56,3, 43,6 и 22,3% соответственно (p<0,0001). При увеличении концентраций до 15 мкМ для диосметина и 5 мкМ для гесперетина регистрировали снижение vWF на 53,9% (p<0,0001) и 50,9% (p=0,0001). Комбинация диосметина (150 мкМ) и гесперетина (50 мкМ) приводила к снижению vWF на 37,2% (p=0,001). Гесперетин в концентрациях 0,5 и 5 мкМ и диосметин в концентрации 1,5 мкМ не оказывали влияния на относительное количество CD31. При увеличении концентрации диосметина до 15 мкМ наблюдали снижение CD31 на 32,7% (p=0,002). Комбинация диосметина (150 мкМ) и гесперетина (50 мкМ) приводила к более значительному снижению CD31 на 53,4% (p<0,0001). В концентрациях 0,5 и 1,5 мкМ гесперетин и диосметин не оказывали влияния на экспрессию PAI-1. При увеличении концентраций гесперетина до 5 мкМ и диосметина до 15 мкМ выявлено снижение PAI-1 на 38,2% (p=0,0044) и 38,3% (p=0,0064) соответственно. Комбинация диосметина (150 мкМ) и гесперетина (50 мкМ) приводила к снижению PAI-1 на 40,7% (p=0,0032). Гесперетин и диосметин в концентрациях 0,5 и 1,5 мкМ не оказывали влияния на FN. При увеличении концентраций диосметина до 15 мкМ наблюдали снижение FN на 36,5% (p=0,0004). Комбинация диосметина (150 мкМ) и гесперетина (50 мкМ) приводила к более значительному снижению FN — на 45,6% (p=0,0001).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Гесперетин и комбинация гесперетина и диосметина значимо влияют на маркеры ремоделирования в первичных культурах эндотелиальных клеток. Комбинация двух активных метаболитов (гесперетин и диосметин) проявляет наиболее выраженный эффект. Это косвенно указывает на целесообразность использования комбинации двух компонентов (гесперидин и диосмин) для воздействия на процессы ремоделирования в эндотелии сосудов.
