Исследование связи между системой sCD40-sCD40L и течением рассеянного склероза

Звеном патогенеза многих аутоиммунных заболеваний, включая рассеянный склероз (РС), является избыточное образование аутореактивных лимфоцитов и/или недостаточность апоптоза этих клеток [1, 2], что определяет дефект иммунологического надзора. При Р.С. это приводит к повреждению гематоэнцефалического барьера, массивному проникновению аутореактивных лимфоцитов в ЦНС с развитием каскада воспалительных и нейродегенеративных процессов. Предполагается, что избыточное образование популяции аутореактивных Th1-лимфоцитов при РС может быть связано с повышенной активностью системы CD40—CD40L [3].

CD40L, называемый также CD40-лиганд (CD154, gp39), — это белок семейства фактора некроза опухоли, который экспрессируется на клеточной мембране активированных Тh-лимфоцитов и связывается с трансмембранным гликопротеидом CD40 на антигенпрезентирующих клетках, включая В-лимфоциты. В результате этого взаимодействия запускаются пролиферация, дифференцировка B-лимфоцитов и продукция этими клетками аутоантител. Кроме того, В-лимфоциты как антигенпрезентирующие клетки стимулируют дифференцировку Th0-лимфоцитов в Th1-лимфоциты против антигенов мозга, главным образом против основного белка миелина [4, 5].

Цель исследования — оценка связи уровня растворимых форм CD40 и CD40L (sCD40, sCD40L) в сыворотке крови больных РС с основными характеристиками течения этого заболевания.

В одномоментное сравнительное исследование были включены 80 больных РС, 52 женщины и 28 мужчин. Диагноз Р.С. ставили на основании критериев МакДональда (2005).

Критериями включения пациентов в исследование были: ремиттирующий тип течения РС, длительность заболевания не менее 5 лет, инвалидизация не более 6,5 балла по EDSS. Критерием невключения было лечение препаратами, изменяющими течение РС (ПИТРС).

Длительность заболевания в общей группе больных составила 8,2±8,0 года, скорость прогрессирования РС — 0,46±0,55 балла в год (от 0 до 3,0). Часть больных были включены в исследование в стадии обострения РС (37 пациентов, инвалидизация 3,5±2,1 балла по EDSS) до проведения курса кортикостероидов, другая часть больных — в стадии ремиссии заболевания (43 пациента, инвалидизация 2,1±1,6 балла по EDSS) не ранее чем через 3 мес после завершения стандартного курса кортикостероидов.

Тяжесть клинического состояния и степень инвалидизации больных оценивали по расширенной шкале инвалидизации (Expanded Disability Status Scale — EDSS). Скорость прогрессирования РС (СП) рассчитывали делением степени инвалидизации в баллах по EDSS на длительность болезни в годах. Частоту обострений РС оценивали по отношению числа обострений за весь период болезни к длительности болезни в годах.

Магнитно-резонансную томографию проводили на томографе Impact («Siemens-Magnetom», Япония) с напряженностью магнитного поля 1 Тл с получением Т1- и Т2-изображений, а также в режиме TIRM. Для контрастирования вводили гадолинийсодержащие препараты гадовист («Bayer Schering Pharma», ФРГ) и омнискан («Nycomed», Норвегия) в стандартной дозе 0,1—0,3 ммоль/кг массы тела.

Концентрацию sCD40 и sCD40L в сыворотке венозной крови определяли методом иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов и по протоколам Bender MedSystems (США).

Статистический анализ выполнен с использованием программы Statistica 6.0. Межгрупповые сравнения проводили по критериям Манна—Уитни и Фишера, связи между переменными оценивали по коэффициенту корреляции Спирмена (rs). Относительный риск оценивали по величине отношения шансов (ОШ), рассчитанной методом логистического регрессионного анализа. Для количественных переменных результаты представлены в виде выборочного среднего (М) с указанием стандартного отклонения (±SD), в ряде случаев — 95% доверительного интервала (ДИ). Для всех использованных статистических критериев принят критический уровень значимости р<0,05.

Проведение исследования было разрешено этическим комитетом Алтайского государственного медицинского университета.

В период обострения РС по сравнению с периодом ремиссии не было выявлено значимого изменения уровня sCD40L, также как sСD40 (табл. 1).

Анализ гендерных особенностей динамики инвалидизации больных РС показал, что СП РС у мужчин в 2 раза выше, чем у женщин (0,76±0,24 и 0,38±0,06 балла в год соответственно, р=0,009). Мужской пол положительно коррелировал со СП (rs=0,41, р=0,004) и ассоциировался с повышенным риском высокой СП (ОШ=2,13; ДИ 1,94—2,35; р=0,015). У мужчин по сравнению с женщинами выявлены такие особенности течения РС, как более короткий период первой ремиссии (24,2±18,3 и 38,7±29,0 мес соответственно, р=0,041), меньшая частота моноочагового дебюта (54,2 и 72,4%, р=0,013), более редкое клиническое проявление дебюта оптическим невритом (53,8 и 21,0%, р<0,001). При этом ни по одному из исследованных показателей системы CD40-СD40L не выявлено различий в характере реагирования мужчин и женщин на экзацербацию заболевания.

Выявлена положительная корреляционная связь между частотой обострений и уровнем sCD40L (табл. 2). Этот результат может отражать известный феномен подавления экспрессии CD40 растворимыми формами лигандов для этого рецептора (sCD40L) [3]. Предполагается, что данная реципрокная регуляция рецептора лигандом играет позитивную роль в условиях патологических взаимоотношений иммунокомпетентных клеток при аутоиммунных процессах. В то же время при логистическом регрессионном анализе не было выявлено снижения риска частоты обострений (менее одного раза в год) при уровне sCD40L выше медианы (0,42 пкг/мл). Среднее значение ОШ составило 1,5 (ДИ 0,3—6,7; р=0,585).

Полученные результаты не позволяют говорить о связи показателей активности системы sCD40—sCD40L в крови с экзацербацией РС, выраженностью, а также скоростью нарастания неврологического дефицита при этом заболевании.

С учетом современных представлений о патогенетической роли системы CD40—CD40L в развитии иммунного воспаления и нейродегенерации при РС, логичным представляется, что активность этой цитокиновой системы значима не столько для развития системного дисбаланса иммунокомпетентных клеток, сколько для аутоиммунных реакций непосредственно в ткани-мишени — белом веществе мозга. Для проверки этой гипотезы целесообразно исследование в качестве показателей активности системы CD40—CD40L в крови не только ее растворимых форм, но и уровня экспрессии этих молекул в лимфоцитах отдельных субпопуляций.