Состояние регенеративной активности тканей барабанной перепонки и результаты мирингопластики на разных сроках ремиссии экспериментального среднего отита

Исследования последних лет показали, что результаты мирингопластики во многом зависят от степени бактериальной обсемененности барабанной полости, используемого трансплантата и сроков выполнения операции [1, 2].

Цель исследования - определить регенеративные возможности тканей барабанной перепонки на разных сроках ремиссии экспериментального среднего отита и оценить результаты выполненной мирингопластики.

Для выполнения работы были отобраны 23 беспородные собаки без признаков «спонтанного» отита. У 20 подопытных животных был воспроизведен односторонний экспериментальный гнойный средний отит по методике В.А. Долгова [3]. В качестве возбудителя заболевания использовался штамм золотистого стафилококка (S. aureus) из коллекции культур Института клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения РАН. Контрольную группу составили 3 здоровых собаки. Через 2 нед после развития среднего отита подопытных животных лечили (внутримышечно вводили по 0,5 г цефазолина два раза в день, местно промывали слуховой проход раствором фурацилина) до получения «сухого» уха. После этого всем животным производилась мирингопластика. По срокам проведения операции мирингопластики животные были объединены в четыре группы (по 5 собак в каждой группе).

1-й группе животных мирингопластика выполнялась через 1 нед после прекращения воспалительного процесса в среднем ухе, животным 2-й группы - через 2 нед, животным 3-й группы - через 3 нед и животным 4-й группы - через 4 нед. В качестве трансплантата использовался биопластический материал гиаматрикс, представляющий собой тонкую эластичную пленку, созданную на основе гиалуроновой кислоты [4].

Прооперированных животных выводили из опыта через 2 нед после мирингопластики. Мирингопластику и взятие материала (барабанную перепонку с трансплантатом) для гистологического исследования проводили под операционным микроскопом. Полученный материал фиксировали в 12% водном растворе нейтрального формалина, спирт-формоле, жидкости Буэна. Парафиновые срезы толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином Майера и эозином, перйодатом калия и реактивом Шиффа по Мак Манусу [5]. Исследуемые структуры барабанной перепонки сопоставляли с данными литературы по этому вопросу [6].

На гистологических препаратах барабанная перепонка здоровых животных представляла собой тонкую соединительнотканную пластинку, которая со стороны наружного слухового прохода покрыта многослойным плоским эпителием, со стороны барабанной полости - однослойным эпителием. Соединительнотканная основа барабанной перепонки состояла из коллагеновых волокон, которые лежали в два слоя, в наружном слое они располагались радиально, а во внутреннем - циркулярно.

В 1-й группе животных, прооперированных через 1 нед после стихания воспалительного процесса в среднем ухе, трансплантат прижился у 4 из 5 собак и закрыл дефект барабанной перепонки. Наблюдалась эпителизация трансплантата как со стороны среднего, так и наружного уха. В области края перфорации барабанной перепонки наслаивающийся эпителиальный пласт характеризовался высокой пролиферативной активностью эпителиоцитов. В соединительной ткани барабанной перепонки располагалось большое количество клеточных элементов фибробластического дифферона с преобладанием малодифференцированных и дифференцированных фибробластов.

Наличие большого количества малодифференцированных и дифференцированных фибробластов указывает на высокие регенераторные возможности соединительной ткани. Коллагеновые волокна в межклеточном веществе соединительной ткани располагались беспорядочно в разных направлениях. Лейкоцитарная инфильтрация соединительной ткани отсутствовала, встречались лишь единичные лимфоциты (см. таблицу).

Во 2-й группе у всех 5 прооперированных животных трансплантат прижился и закрыл перфорацию барабанной перепонки. Поверхность гиаматрикса была покрыта эпителием. Морфофункциональная характеристика эпителия, а также структура соединительной ткани барабанной перепонки не отличалась от ее строения в 1-й группе животных. Однако в соединительной ткани барабанной перепонки 2-й группы животных была повышена доля дифференцированных фибробластов и фиброцитов, что указывало на некоторое снижение ее репаративных возможностей.

Из 10 животных 3-й и 4-й групп, прооперированных через 3 и 4 нед после достижения «сухого» уха, только у 7 наблюдалось приживление трансплантата. В 3-й группе подопытных собак эпителизации подверглось примерно ³/4 площади трансплантата, а в 4-й группе - около половины. В соединительной ткани барабанной перепонки животных обеих групп наблюдалось увеличение фибриллярных структур и снижение содержания клеточных элементов. Среди клеток преобладали фиброциты и дифференцированные фибробласты. Пролиферативная активность эпителиоцитов и клеток соединительной ткани барабанной перепонки была значительно ниже, чем у животных, которым мирингопластика выполнялась на более ранних сроках.

Проведенные исследования показали, что наиболее оптимальными для мирингопластики являются первые две недели после прекращения воспалительных явлений в среднем ухе, поскольку пролиферативная активность эпителиальных тканей барабанной перепонки в этот период ремиссии оказалась максимальной. В этот же период в соединительнотканной основе барабанной перепонки наблюдалось образование молодой соединительной ткани, которая характеризовалась высоким содержанием дифференцированных фибробластов, активно синтезирующих компоненты межклеточного вещества. Такое состояние эпителиальных и соединительнотканных структур барабанной перепонки указывает на оптимальное развитие в ней репаративных процессов, что способствует лучшему закрытию повреждений барабанной перепонки.