В настоящее время кожа человека может подвергаться агрессивному воздействию техногенных факторов окружающей среды, что может вызывать дизрегуляцию поддержки иммунной системы и в целом гомеостаза на всех его уровнях: центральном, системном, а также клеточном и молекулярном. В результате микробиоценоз кожи человека претерпевает существенный сдвиг в направлении патогенности. Появляется флора, обладающая мембраноповреждающим действием, что способствует в целом росту дерматологических заболеваний, в том числе и угревой болезни [1—4].

Известно, что угревая болезнь сопровождается гиперпродукцией кожного сала, дисбактериозом, усиленным размножением бактерий Propionbacteriumacnes, изменением микроциркуляции, а также хронической перифолликулярной инфильтрацией. В целом все эти процессы протекают на фоне иммунного дисбаланса [5—8]. При этом совершенствование методов лечения угревой болезни и применение целого спектра новых противоугревых лекарственных средств все же не позволяют добиться стойкой ремиссии, а также предотвратить косметические дефекты на коже. Это приводит к поиску новых направлений в лечении акне, в том числе с применением физических факторов, которые уменьшают дисфункцию состояния иммунной системы [9—14].

Цель — экспериментальное и клиническое исследование влияния электростимуляции биполярно-импульсными токами (ЭС БТИ) от аппарата Мимодель-10 на периферическую иммунную систему кроликов и больных угревой болезнью.

Исследования проводились на половозрелых самках кроликов породы Советская шиншилла (30 особей). Содержание животных, оперативные вмешательства и эвтаназию осуществляли в соответствии с нормативами, данными в руководстве «Guide for сare and use of laboratory animals» (ILAR publication, 1996, National Academy Press) и с требованиями приказа Минздрава России № 267 от 19 июля 2003 г. «Об утверждении правил лабораторной практики в Российской Федерации». Животные содержались в виварии при свободном доступе к пище и воде и естественной смене дня и ночи.

В проведенном нами эксперименте исследовались околоушные лимфатические узлы (ОЛУ) кроликов в трех группах (10 особей в каждой). 1-я (контрольная) группа животных воздействия не получала. 2-я и 3-я (основные) группы получали воздействие ЭС БТИ в области жевательных мышц в течение 7 дней, по 8 мин каждый раз. Силу тока при этом постепенно увеличивали до слабого видимого сокращения мышц под электродами.

Морфометрия ОЛУ кроликов изучалась в 1-й и 2-й группах через 8 дней после воздействия, а в 3-й группе — через 20 дней после воздействия.

Гистологические срезы ОЛУ кроликов окрашивались гематоксилином и эозином и затем исследовались с помощью оптического микроскопа Karl Zeiss при увеличениях в 50, 100, 200, 400 и 1000 раз.

В проведенном рандомизированном и контролируемом клиническом исследовании наблюдались больные (n=142) в возрасте 24,4±2,5 года, с папулопустулезной формой акне, средней степени тяжести, с давностью заболевания 5,1±2,2 года. При этом все пациенты были сопоставимы по возрастно-половому составу и выраженности клинико-функциональных характеристик. Межгрупповые различия носили лишь количественный характер.

Критериями исключения являлись: легкое и тяжелое течение угревой болезни, а также общие противопоказания к использованию физиотерапии. Все эти больные разделены на 2 равноценные группы. 1-я группа (контрольная, n=30) получала одну только стандартную лекарственную терапию. 2-я группа (основная, n=112) дополнительно получала еще микротоковую терапию БТИ в области лица, а также одновременно многоканальную электростимуляцию биполярно-импульсными токами (МЭС БТИ) в области шеи и абдоминально-поясничной области одновременно.

Параметры воздействия МЭС БТИ составляли: сила тока — от легкого до умеренного сокращения мышц под электродами, частотная модуляция — от 20 до 120 Гц, длительность посылок и пауз по 2 с, время воздействия 10—20 мин, курс 10—12 процедур. При этом микротоковая терапия отличалась лишь силой воздействия — до 900 мкА и проводилась одновременно с МЭС БТИ.

Статистическая обработка полученного материала заключалась в регрессионном анализе (по программе Statistica 10.0). Рассчитывались среднеарифметическое значение показателя и его средняя ошибка (M±m), n — количество объектов. Использовался также метод наименьших квадратов, при минимизации суммы квадратичных отклонений между наблюдаемыми и расчетными величинами, где R² — коэффициент достоверности аппроксимации. Данный метод позволял краткосрочно прогнозировать результаты воздействий. При этом адекватность полученной статистической модели проверялась по t-критерию Стьюдента и F-критерию, где p<0,05 — достоверность изменений между показателями в группах по сравнению с исходными значениями показателей; р<0,05* — достоверность изменений между значениями показателей в 1-й и 2-й группах в те же сроки наблюдения.

В настоящее время принято считать, что различные физиологические процессы, обеспечивающие гомеостаз, в филогенезе интегрировались на основе компонентов иммунной и нервно-эндокринной систем, что в процессе эволюции привело к обмену наследственной информацией между этими двумя системами. В результате сформировались генетически похожие биологические вещества, такие как гормоны и нейромедиаторы и др., синтез которых в клетках лимфоидной и нервной тканей гуморальным путем обеспечивает защиту организма от чужеродных клеток. В связи с этим важным остается вопрос о влиянии физических факторов на состояние иммунной системы [15].

В результате нашего эксперимента было выявлено, что под влиянием ЭС БТИ происходило изменение количества клеток в зонах ОЛУ подопытных кроликов. Так, в 1-й группе кроликов количество ретикулоцитов в паракортикальной зоне ОЛУ в итоге составило 4,1±0,5% от общего числа клеток, тогда как во 2-й группе после курса ЭС через 8 дней оно увеличилось до 5,8±0,2%; а в 3-й группе после курса ЭС через 20 дней оно составляло 5,1±0,3%. В мозговой зоне ОЛУ значения в указанных трех группах составили 5,0±0,2, 6,8±0,1 и 9,7±0,2% соответственно; а в герминативном центре ОЛУ — 8,1±0,3, 8,4±0,2 и 9,7±0,2%.

Считается, что ретикулоциты выполняют роль не только стромальных элементов, но и активных фагоцитов. Увеличение их количества при проведении эксперимента мы расценивали как реакцию дендритных клеток на ускорение дифференцировки бластных клеток лимфоидного ряда — в ответ на раздражающее действие импульсных токов.

В пользу сказанного выше может свидетельствовать и некоторое увеличение количества больших и средних лимфоцитов в ОЛУ кроликов при воздействии ЭС БТИ. Так, в паракортикальной зоне этих ОЛУ количество больших и средних лимфоцитов в 1-й группе составляло 6,3±0,3%, через 8 дней во 2-й группе оно не определялось, через 20 дней в 3-й группе недостоверно увеличилось до 6,7±0,2%. В мозговой зоне ОЛУ соответствующие значения этих клеток составили: 8,7±0,2, 8,2±0,3 и 8,8±0,1%. В герминативном центре ОЛУ они появлялись во 2-й группе через 8 дней — 4,9±0,1% и через 20 дней в 3-й группе составляли уже 5,8±0,2%.

Количество малых лимфоцитов в паракортикальной зоне ОЛУ составляло: в 1-й группе 86,8±1,1% от общего числа клеток; во 2-й группе через 8 дней 82,0±1,4%; в 3-й группе через 20 дней 68,0±1,5%. В мозговой зоне ОЛУ в этих же группах — соответственно 77,1±1,7, 75,4±1,3 и 83,5±1,2%. В герминативном центре — 64,3±1,5, 61,8±1,2 и 74,2±1,3%.

Такая динамика клеточного состава, наблюдавшаяся во всех зонах ОЛУ кроликов во 2-й и 3-й группах, могла свидетельствовать о физиологической перестройке клеточного иммунитета под воздействием ЭС БТИ. Все это, возможно, происходило как ответная реакция напряжения иммунной системы подопытных кроликов на воздействие ЭС БТИ к 8-му дню и сопровождалось адаптационными процессами и нормализацией ответной реакции к 20-му дню. При этом наряду с нормальными по морфологическим признакам клетками к 8-му дню появлялись и погибающие клетки с очень мелкими гиперхромными и пикнотическими ядрами, а также апоптозные тела в разной стадии фрагментации, но через 20 дней этих клеток становилось значительно меньше. Подобные изменения, возможно, были связаны с ускорившейся дифференцировкой этих клеток и последующим увеличением пула малых лимфоцитов, что подтверждалось также и наличием митозов в других клетках ОЛУ кроликов.

В отношении клинических исследований наших больных с акне можно отметить, что у больных в 1-й и 2-й группах сбалансированность иммунологических реакций до начала лечения была нарушена. Так, содержание лейкоцитов до начала лечения у больных в 1-й и 2-й группах было достоверно снижено на 36,2±1,4 и 36,6±1,2% (по сравнению с нормой) соответственно. После курса лечения у больных 2-й группы произошло достоверное повышение концентрации лейкоцитов на 39,5±1,3% (р<0,05, р<0,05*); через 1 мес — на 39,8±1,1% (p<0,05, р<0,05*); через 3 мес — на 37,1±1,4% (р<0,05, р<0,05*); через 6 и 9 мес — на 33,7±1,2% (р<0,05, р<0,05*); и 33,1±1,3% (р<0,05, р<0,05*) соответственно, и на протяжении всего срока наблюдения эти значения достоверно положительно отличались от соответствующих значений у больных 1-й группы. Все это сопровождалось клиническим улучшением состояния больных 2-й группы.

Концентрация лимфоцитов в крови также свидетельствовала о наличии хронического воспалительного процесса и до начала лечения у больных в 1-й и 2-й группах была повышена на 24,1±1,5 и 24,3±1,2% (по сравнению с нормой) соответственно. После курса комплексного лечения у больных 2-й группы содержание лимфоцитов снизилось на 14,6±1,1% (по сравнению с исходными значениями); через 1 мес — на 14,0±1,2%; через 3 мес и до года наблюдения это снижение было не менее чем на 12,2±1,2%.

При регрессионном анализе (рис. 1) была выявлена положительная тенденция в отношении концентрации лейкоцитов и лимфоцитов у больных 2-й группы с положительным прогнозом на два будущих периода (R²=0,7864 и R²=0,853 соответственно; р<0,05). В те же сроки этот тренд у больных 1-й группы отдалялся от нормы (R²=0,7638 и R²=0,9471 соответственно; р<0,05).

У больных 1-й и 2-й групп были найдены выраженные сдвиги, характерные для нарушения иммунной системы, сопровождающие, как правило, хронические воспалительные проявления. При этом у всех больных уровень Т-лимфоцитов по сравнению с нормой был снижен более чем на 20%, а уровень В-лимфоцитов повышен — более чем на 29%. Под воздействием комплексного лечения у больных 2-й группы уменьшились клинические проявления угревой болезни, а также положительно изменилась и динамика данных показателей. При этом Т-лимфоциты после курса лечения начали превышать свои исходные значения на 6,2±1,4%, а к 3-му месяцу уже на 14,8±1,3% и затем держались на этих значениях до 9 мес. В то же время концентрация В-лимфоцитов после курса комплексного лечения снизилась на 17,4±1,2% и держалась на этом уровне до 6 мес, а затем к 9 мес начала несколько увеличиваться.

Из данных регрессионного анализа (рис. 2) следует, что у больных 2-й группы степенные тренды показателей концентрации Т-лимфоцитов (R²=0,7181; р<0,05) и В-лимфоцитов (R²=0,7773; р<0,05) в большей степени приближались к норме, и можно было думать о положительным прогнозе для данных показателей еще на два будущих периода. С другой стороны, аналогичные тренды у больных 1-й группы к норме не приближались (R²=0,7005 и R²=0,7289 соответственно; р<0,05). При этом нельзя было дать положительного прогноза.

Для более глубокой оценки иммунного статуса у всех наших больных изучались показатели трех классов иммуноглобулинов: G, A и M. При этом у больных в 1-й и 2-й группах до начала лечения уровни IgG и IgA были повышенными по сравнению с нормой: на 19,5±1,2 и 19,2±1,3% и на 23,2±1,4 и 21,4% соответственно. В то же время хронический воспалительный процесс отразился на концентрации IgM в крови, который до начала лечения у больных в 1-й и 2-й группах был снижен соответственно на 21,1±1,3 и 22,0±1,2% по сравнению с нормой.

Проведение курса комплексного лечения у больных 2-й группы способствовало снижению IgG и IgA и повышению IgM. Только к 9 мес наблюдений все три отмеченных показателя начали ухудшаться. Такая направленность динамики иммунологических показателей при регрессионном анализе дает возможность положительного прогноза на два будущих периода у больных 2-й группы (рис. 3).

На рис. 3 видно, что степенные тренды концентраций IgG (R²=0,9339; р<0,05), IgA (R²=0,7435; р<0,05) и IgM (R²=0,6582; р<0,05) у больных 2-й группы были направлены ближе к норме, с положительным прогнозом на два будущих периода, чем таковые у больных 1-й группы (R²=0,6258; р<0,05; R²=0,6037; р<0,05; R²=0, 5748; р<0,05 соответственно).

После проведения больным 2-й группы с акне комплексного лечения, включавшего МЭС БТИ и микротоковую терапию, отмечена выраженная положительная динамика клинической картины. При этом у больных 2-й группы через 6 мес рецидив отмечался у 8,9%, через год — у 10,7%. Ухудшение состояния больных в виде обострения заболевания в 1-й группе через 6 мес наступило у 13,3% больных и к концу года — у 80% больных.

1. Эксперимент показал, что под влиянием ЭС БТИ к 20-му дню ретикулоциты увеличиваются во всех зонах ОЛУ по сравнению с интактными животными. Большие и средние лимфоциты увеличиваются в паракортикальной зоне и герминативном центре и практически не изменяются в мозговом центре. Малые лимфоциты увеличиваются в герминативном центре и мозговой зоне, а также снижаются в паракортикальной зоне, что, возможно, связано с перераспределением клеток во всех зонах ОЛУ под влиянием сокращения мышц.

2. В результате эксперимента были выявлены закономерности изменения клеточного состава в ОЛУ кроликов под влиянием ЭС БТИ, при этом наблюдались клетки, находящиеся на разных этапах дифференцировки, характеризующиеся высокой пролиферативной, миграционной и ферментативной активностью, что могло стимулировать репаративные процессы.

3. Общая картина изменений иммунного статуса у пациентов с угревой болезнью до начала лечения была представлена нарушением концентрации иммунокомпетентных клеток, сопровождающемся лейкопенией и лимфоцитозом, а также гуморальных факторов IgG, IgA и IgM. При этом наблюдалось количественное уменьшение Т-лимфоцитов и повышение В-лимфоцитов.

4. Маркером нормализации клеточного иммунитета у больных угревой болезнью средней степени тяжести во 2-й группе, получавших микротоковую терапию и МЭС БТИ в комплексном лечении, являлась нормализация концентрации лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови.

5. Использование предложенного нами комплексного лечения у больных угревой болезнью усиливало клинический эффект от проводимой терапии и позволило у пациентов 2-й группы улучшить показатели гуморального иммунитета. Наиболее значимым в этом отношении являлось устранение дисбаланса концентрации Т- и В-лимфоцитов, а также иммуноглобулинов на фоне продолжающейся ремиссии в течение 12 мес у 80,4% больных во 2-й группе.

Таким образом, проанализирована возможность использования микротоковой терапии и МЭС БТИ в качестве физического фактора в комплексной терапии больных угревой болезнью папулопустулезной формы средней степени тяжести, положительно влияющего на состояние иммунной системы данных больных.

Конфликт интересов отсутствует.

Участие авторов:

Концепция и дизайн: В.П.

Сбор и обработка материала: Н.Л., М.С.

Статистическая обработка данных: О.Т.

Написание текста: Н.Л.

Редактирование: С.С.