Установление личности человека в следственной и судебно-медицинской практике имеет большое значение при обнаружении неопознанных трупов, а также в случаях выявления изолированных фрагментов тканей и органов при массовой гибели людей вследствие террористических актов, техногенных и природных катастроф [1].
Возраст человека — один из важных идентификационных признаков. В современной судебной медицине разработаны и внедрены в практику методики определения возрастных изменений различных тканей и органов, в том числе по морфологии трубчатых костей, размерным характеристикам щитовидного хряща, степени облитерации швов черепа и др. [2—5].
Ногтевые пластинки и их фрагменты представляют значительный интерес для судебно-медицинской идентификации, поскольку они могут длительное время сохраняться во внешней среде при различных условиях.
Имеются работы, посвященные изучению морфометрических характеристик ногтевой пластинки: ширины, толщины, микрорельефа ее наружной поверхности [6]. Отмечено, что изменения наружной поверхности ногтей рук отчетливо проявляются у людей старше 56 лет и не определяются у детей.
Цель работы — установление гистологических особенностей строения внутренней поверхности свободного края ногтя у детей в возрасте от 0 до 1 года и от 1 года до 17 лет для судебно-медицинской практики.
Материал и методы
Изучили фрагменты свободных (концевых) краев ногтевых пластинок пальцев кистей живых детей, срезанные в ходе гигиенических процедур, и трупов лиц мужского и женского пола в возрасте от 0 до 17 лет, поступивших в морг Нижегородского областного бюро судебно-медицинской экспертизы в период с 2016 по 2019 г.
Забор материала и его исследования одобрены решением этического комитета ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России (протокол №5 от 02.04.19).
Гистологические препараты фрагментов концевых краев ногтевых пластинок изготавливали по определенной методике.
1. Проводили декальцинирование ногтевых пластинок в 5% растворе азотной кислоты в течение 7—9 суток. По мере вымывания солей кальция под действием кислоты твердая ткань ногтя становилась мягкой, при этом их гистологическая структура сохранялась.
2. После декальцинации ногтевые пластинки закладывали в пластиковые одноразовые кассеты, промывали в этиловом спирте и затем в проточной воде 24 ч.
3. Для заливки в парафин и изготовления гистологических срезов использовали гистопроцессор ThermoScientificSTP 120, станцию заливки ESD-2800 и микротом HM—325 ThermoScientific.
4. Полученные срезы наклеивали на предметное стекло, смазанное смесью белка и глицерина в пропорции 1:1, подсушивали на воздухе.
5. Проводили окрашивание препаратов гематоксилином и эозином с помощью мультистейнера ThermoScientificGeminiAS.
6. Микроскопическое изучение выполняли в проходящем свете на биологическом микроскопе XSZ-147E при увеличении от 54 до 400 [7—9], в ходе которого анализировали особенности строения внутренней поверхности ногтей.
Подстриженные свободные края ногтевых пластинок у детей исследовали в интервале от 6 часов до 30 суток с момента их изъятия.
Материал взяли от 35 человек. Изготовили и изучили 250 гистологических препаратов: в 1-й возрастной группе (0—1 год) — 100, во 2-й (от 1 года и до 17 лет) — 150 препаратов.
Результаты и обсуждение
В ходе исследования выявили устойчивые различия в строении внутренней поверхности свободного края ногтевых пластинок у детей 1-й и 2-й групп. Так, у детей 1-й группы внутренняя поверхность свободного края ногтей имеет гладкий рельеф, к ней прилежат клеточные элементы, соответствующие клеткам росткового слоя кожи и шиповатым клеткам (рис. 1, на цв. вклейке), которые расположены в несколько слоев в виде плотно прилегающих «волн» уплощенно-ромбической формы, со светлой слабобазофильной цитоплазмой. Ядра их обладают плеоморфизмом: ближе к роговому веществу ногтя и на гребнях «волн» округлые и овальные, а по мере удаления от свободного края и в промежутках между гребнями «волн» ядра клеток теряют интенсивность окраски и приобретают все более вытянутую форму.
Рис. 1. Клеточные элементы, соответствующие (а) шиповатым клеткам и (б) клеткам росткового слоя кожи на внутренней поверхности концевого отдела ногтевой пластины, ее гладкий рельеф и (в) «волнистое» расположение слоев клеток у детей в возрасте от 0 до 1 года (гематоксилин-эозин; ув. 100).
У детей 2-й группы внутренняя поверхность ногтевой пластинки имеет неровный фестончатый рельеф, клетки росткового слоя отсутствуют (рис. 2, на цв. вклейке). На 1-м году жизни встречаются удлиненные ромбовидные клетки, расположенные на поверхности хаотично и в виде «волн». Затем они приобретают эозинофильную окраску цитоплазмы, утрачивают ядра, располагаются черепицеобразно относительно друг друга и по мере приближения к свободному краю ногтевой пластинки все более соответствуют роговым чешуйкам кожи. В первые месяцы 2-го года жизни эти клетки полностью исчезают, замещаясь роговыми чешуйками [10].
Рис. 2. Отсутствие клеток росткового слоя кожи и (в) наличие неровного фестончатого рельефа на внутренней поверхности концевого отдела ногтевой пластины в возрастной группе детей от 1 года до 17 лет (гематоксилин-эозин; ув. 100).
Заключение
Таким образом, выявленные возрастные различия в гистологическом строении внутренней поверхности свободного края ногтевой пластинки могут служить дополнительным диагностическим критерием при установлении возраста детей, что позволит повысить доказательность и объективность экспертных выводов.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.