Введение

Реимплантация экстракорпорально выпрямленных фрагментов хряща перегородки носа в том или ином виде используется при любом способе септопластики [1—3]. Подготовка аутотрансплантатов нередко проводится путем их механического сдавления с помощью серийно выпускаемых или авторских разработанных устройств [4].

Для обеспечения оптимального приживления аутотрансплантата хряща большое значение имеет изучение хондрогенного и регенерационного потенциала хряща [5]. В литературе имеются единичные исследования морфологических изменений хрящевой ткани при разных методах воздействия на нее [6—8], а также экспериментальные работы [9, 10] по изучению приживаемости таких аутоимплантатов.

Цель исследования — изучить ультраструктуру четырехугольного хряща перегородки носа при разной степени его сдавления с помощью пресса.

Материал и методы

Ультраструктурному исследованию подвергали фрагменты аутотрансплантатов хряща размером 1—2 мм², подготовленных для реимплантации при септопластике. Забор материала производили интраоперационно после предварительного расплющивания хряща с помощью пресса [11] на ¹/₃ и ²/₃ первоначальной толщины (по 5 образцов в каждой серии) с целью выпрямления. Контрольную группу составили фрагменты хряща, не подвергавшиеся механическому воздействию (5 фрагментов), взятых у больных той же возрастной группы, что и опытные серии (22—38 лет).

Для изучения нормального и расплющенного хряща фрагменты хрящей фиксировали в 2,5% растворе глутарового альдегида и 1% растворе тетраоксида осмия на фосфатном буфере при pH=7,4. После обезвоживания в спиртах возрастающей концентрации и ацетоне материал заливали в аралдит. Ультратонкие срезы получали с помощью ультрамикротома LKB 8800 и помещали на медные сеточки. После контрастирования в уранилацетате и цитрате свинца срезы изучали с применением электронного микроскопа JEM-100 (Jeol).

Результаты

Участки нативной хрящевой ткани были представлены изогенными группами клеток и межклеточным матриксом. Среди клеток изогенных групп выявлены хондробласты и хондроциты разной степени дифференцированности. Хондробласты имели округлую слабо отростчатую форму, крупное ядро и небольшой ободок цитоплазмы (рис. 1). В ядре преобладал деконденсированный хроматин, цитоплазма была слабо дифференцирована с единичными митохондриями со светлым матриксом и не определяющимися кристами, цистернами гранулярной эндоплазматической сети. Свободные участки цитоплазмы были заполнены гранулами гликогена. Зрелые хондроциты характеризовались наличием диффузного хроматина и гранулированного ядрышка в ядре, хорошо развитой гранулярной эндоплазматической сетью и пластинчатым комплексом Гольджи (рис. 2), что отражает их синтетическую активность. Экстерриториальное межклеточное вещество представлено тонкими, длинными разнонаправленными хондриновыми волокнами с характерной поперечной исчерченностью и гранулами протеогликанов. Расположенная в лакунах вокруг клеток перицеллюлярная капсула также была представлена гранулами протеогликанов и тонкими минорными коллагеновыми микрофибриллами.

Рис. 1. Ультраструктура хондробласта и межклеточного вещества четырехугольного хряща перегородки носа в норме. Ув. 6000.

Рис. 2. Ультраструктура хондроцита в норме. Ув. 6500.

После расплющивания хряща на ¹/₃ его толщины электронно-микроскопическое (ЭМ) исследование показало сохранность ультраструктуры клеток и межклеточного вещества хряща. В ядрах хондробластов сохранялись деконденсированный хроматин и ядрышки, в которых преобладал гранулярный компонент (рис. 3). Цитолемма была сохранна и четко контурирована. В цитоплазме отмечали исчезновение включений гликогена. Хондроциты также характеризовались сохранностью ультраструктуры (рис. 4). В цитоплазме хондроцитов определялись хорошо развитый гранулярный эндоплазматический ретикулум и комплекс Гольджи. Наряду с этим в их цитоплазме наблюдалось формирование небольших вакуолей с электронно-плотным содержимым (рис. 5). В этой серии эксперимента были выявлены сохранность коллагенового остова межклеточного вещества, представленного сетью микрофибрилл, уменьшение количества гранул протеогликанов.

Рис. 3. Ультраструктура хондробласта после расплющивания хряща на одну треть его первоначальной толщины. Ув. 14 000.

Рис. 4. Ультраструктура хондроцита после расплющивания хряща на одну треть его первоначальной толщины. Ув. 6000.

Рис. 5. Ультраструктура хондроцита после расплющивания хряща на одну треть его первоначальной толщины. Ув. 14 000.

В эксперименте по расплющиванию хряща на ²/₃ первоначальной толщины ЭМ-исследование позволило выявить деструктивные изменения клеток и межклеточного вещества хряща. В хондробластах и хондроцитах наблюдались деструкция ядра, вакуолизация цитоплазмы, гомогенизация структуры органелл (рис. 6). Цитолемма имела извилистые контуры с разрывами и выходом внутриклеточного содержимого в межклеточное вещество. Были заметны фрагментация, гомогенизация и локальное исчезновение коллагеновых микрофибрилл.

Рис. 6. Ультраструктура хондроцита и межклеточного вещества после расплющивания хряща на две трети его первоначальной толщины. Ув. 12 000.

Заключение

Таким образом, расплющивание хряща на ²/₃ его толщины приводит к деструкции клеток и межклеточного вещества хряща, тогда как расплющивание хряща на 1/3 обеспечивает его морфологическую сохранность.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования — Н.В. Бойко

Сбор и обработка материала — Н.В. Бойко, И.В. Стагниева, И.А. Залесская

Написание текста — Н.В. Бойко

Редактирование — Н.В. Бойко

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.