Гликопротеины слезы и ротовой жидкости при офтальмогерпесе

В последние годы наблюдается неуклонный рост числа заболеваний глаз, вызванных вирусом простого герпеса [1—3]. В России ежегодно регистрируется 300—500 тыс. случаев офтальмогерпеса. Рецидивы заболевания возникают в 25% случаев после первой атаки вируса простого герпеса и в 75% — после повторных [1—3]. Ферментативный анализ слезной жидкости предложен для прогнозирования рецидивов офтальмогерпеса [4, 5]. Неинвазивная диагностика заболеваний по анализу слезы, слюны приобретает особую актуальность, особенно в педиатрической практике, когда взятие крови для биохимического исследования затруднительно и небезопасно [2, 4, 6]. При герпетической инфекции изменяется белковый и минеральный состав слезы и ротовой жидкости (РЖ) [4—8].

Цель исследования — сравнить содержание белков острой фазы (БОФ) воспаления в слезе, РЖ и плазме крови больных с герпетическим кератитом и использовать полученные результаты для оценки эффективности лечения.

При герпетическом кератите в слезе, РЖ, плазме крови 22 взрослых и 34 детей исследовали содержание 6 гликопротеинов (белков острой фазы воспаления): турбидиметрическим методом определяли содержание орозомукоида (кислого α1-гликопротеина), α1-антитрипсина (α1-АТ), трансферрина, С-реактивного белка (СРБ) по [9], спектрофотометрически определяли содержание общего белка биуретовым методом по [10], церулоплазмина (ЦП) — по [11]. В качестве контроля служили слеза, РЖ и плазма крови 68 здоровых лиц. Слезу собирали по методу [12], РЖ — по методу [6].

В плазме крови здоровых людей содержание белка более чем на порядок выше по сравнению с таковым в слезе и РЖ (табл. 1, 2). В РЖ детей содержание общего белка в 1,5 раза выше, чем у взрослых (р<0,001). В слезе герпесинфицированного глаза уровень белка достоверно снижается в 1,5—2 раза как у детей, так и у взрослых. Белки в слезу в основном секретируют слезные железы, а их количество зависит от скорости слезотечения [5, 13]. Уменьшение концентрации общего белка в слезе при деструкции эпителия роговицы в период разгара заболевания связано с интенсификацией слезоотделения и истощением секреторных резервов слезной железы. После лечения офтальмогерпеса содержание общего белка в слезной жидкости нормализуется. Достоверных изменений уровня общего белка в РЖ и плазме крови при офтальмогерпесе не установлено.

Содержание изученных БОФ воспаления в слезе, РЖ и плазме крови больных при герпетическом кератите изменяется как у взрослых, так и у детей (см. табл. 1, 2, рисунок). Наиболее значительно, почти в 4 раза, у детей в плазме крови при офтальмогерпесе увеличивается содержание СРБ, тогда как у взрослых — лишь в 2 раза (см. табл. 1, 2). Значительное повышение в плазме крови уровня СРБ свидетельствует об остроте воспалительного процесса при инфицировании роговицы вирусом простого герпеса. В плазме крови больных с герпетическим кератитом в 1,5—2 раза увеличивается содержание ЦП, α1-АТ, орозомукоида, а уровень трансферрина не изменяется по сравнению с таковым в контроле (см. табл. 1, 2). Повышение содержания БОФ воспаления в плазме крови детей и взрослых при герпетическом кератите не зависит от клинической формы заболевания. После лечения при глубоких формах офтальмогерпеса уровень α1-АТ в плазме крови взрослых и содержание орозомукоида в плазме крови детей, а также уровень СРБ в крови всех больных с герпетическим кератитом остается высоким. Нормализации уровня ЦП в плазме крови на фоне лечения у всех больных с герпетическим кератитом не наблюдается.

В слезе здоровых людей из изученных БОФ воспаления концентрация СРБ оказалась минимальной, а содержание трансферрина в 2—2,5 раза выше уровня орозомукоида, α1-АТ и на порядок больше содержания ЦП (см. табл. 1, 2, рисунок). Герпетический кератит сопровождается разнонаправленными изменениями содержания в слезе изученных белков. В слезной жидкости больных при офтальмогерпесе содержание СРБ, орозомукоида увеличивается в 3—4 раза по сравнению с аналогичными показателями в контроле. При анализе по клиническим формам выявлено достоверное увеличение при метагерпетическом кератоиридоциклите с изъязвлением содержания орозомукоида в слезной жидкости всех больных и СРБ только в слезе взрослых лиц по сравнению с показателями при древовидном герпетическом кератите.

Содержание тканевого ингибитора протеиназ α1-АТ снижается в слезе взрослых при герпетическом кератите в 1,5 раза, а у детей — почти в 3 раза по сравнению с результатами контроля. Данные изменения могут быть связаны с повышенным использованием этого белка на ингибирование активных протеолитических ферментов при воспалении роговицы. В слезе взрослых лиц наблюдаются достоверные различия уровня α1-АТ в зависимости от глубины поражения роговицы вирусом простого герпеса. Дефицит этого белка способствует накоплению и агрессии протеолитических гидролаз в очаге повреждения, что поддерживает хроническое воспаление роговицы и рецидивирующее течение офтальмогерпеса [13].

Степень изменения концентрации БОФ воспаления в слезе больных с герпетическим кератитом коррелирует с глубиной поражения роговицы, частотой рецидивов и динамикой развития заболевания. Содержание БОФ воспаления изменяется в слезе не только герпесинфицированного, но и контралатерального глаза, что требует лечения обоих глаз при герпетическом кератите. При офтальмогерпесе в слезе детей и взрослых снижается в 1,5—2 раза содержание отрицательного реактанта воспаления и неферментативного антиоксиданта трансферрина (см. рисунок).

Из изученных гликопротеинов в слезной жидкости наиболее значительно изменяется содержание ЦП, его уровень в слезе здоровых детей достоверно не отличается от такового в слезе взрослых. В слезной жидкости детей и взрослых больных с офтальмогерпесом содержание ЦП снижается почти на порядок по сравнению с показателями контроля при всех клинических формах заболевания (см. табл. 1, 2).

При выписке из стационара после проведенного лечения офтальмогерпеса содержание трансферрина нормализуется в слезной жидкости детей и взрослых (см. рисунок). При этом уровень СРБ и орозомукоида в слезе герпесинфицированного глаза нормализуется только при поверхностных формах офтальмогерпеса, тогда как при глубоких формах кератита нормализации содержания этих белков в слезе не наблюдается (см. табл. 1, 2). Содержание Ц.П. в слезной жидкости взрослых после лечения герпетического кератита остается низким, а у детей в динамике заболевания мы наблюдали нормализацию уровня ЦП лишь при древовидном герпетическом кератите.

Источником плазменных протеинов в полости рта является десневая жидкость. При офтальмогерпесе в РЖ и плазме крови детей и взрослых увеличивается содержание всех изученных гликопротеинов, за исключением трансферрина (см. табл. 1, 2). При этом в РЖ наиболее значительно повышается содержание СРБ, орозомукоида, α1-АТ. Это связано с избирательной пропускной способностью гематосаливарного барьера пародонта для БОФ воспаления [14].

Биохимический анализ слезы и РЖ позволяет оценить интенсивность воспаления и эффективность лечения больных офтальмогерпесом. Высокий уровень СРБ, орозомукоида и низкое содержание ЦП, α1-АТ, трансферрина в слезе при герпетическом кератите, отсутствие нормализации содержания БОФ воспаления в биологических жидкостях при выписке является прогностически неблагоприятным признаком, отражает интенсивность процессов воспаления в роговице, свидетельствует о незавершенности воспалительного процесса и необходимости продолжения лечения.

Количественное определение содержания белков острой фазы воспаления в слезе и ротовой жидкости является ранним чувствительным индикатором воспаления, может применяться для неинвазивного мониторинга и контроля эффективности противовирусной терапии офтальмогерпеса. Исследование ротовой жидкости позволяет расширить возможности неинвазивной диагностики офтальмогерпеса, что особенно актуально для детей.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования: Н.Т.

Сбор и обработка материала: С.Р.

Статическая обработка: С.Р.

Написание текста: Н.Т., С.Р.

Редактирование: Н.Т.

Конфликт интересов отсутствует.