Сайт издательства «Медиа Сфера»
содержит материалы, предназначенные исключительно для работников здравоохранения. Закрывая это сообщение, Вы подтверждаете, что являетесь дипломированным медицинским работником или студентом медицинского образовательного учреждения.

Самоукина А.М.

Кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ТГМА, Тверь

Михайлова Е.С.

Кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ТГМА, Тверь

Червинец В.М.

Кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ТГМА, Тверь

Алексеева Ю.А.

Тверская государственная медицинская академия Минздрава России, 170100, Тверь, Россия

Жмакин И.А.

ФГБОУ ВО «Тверской государственный медицинский университет» Минздрава России, Тверь, Россия

Андреева О.В.

Клиника головной боли и вегетативных расстройств академика А. Вейна, Москва

Микробиологический мониторинг ротовой жидкости у клинически здоровых детей

Авторы:

Самоукина А.М., Михайлова Е.С., Червинец В.М., Алексеева Ю.А., Жмакин И.А., Андреева О.В.

Подробнее об авторах

Журнал: Стоматология. 2015;94(1): 11‑13

Просмотров: 740

Загрузок: 14


Как цитировать:

Самоукина А.М., Михайлова Е.С., Червинец В.М., Алексеева Ю.А., Жмакин И.А., Андреева О.В. Микробиологический мониторинг ротовой жидкости у клинически здоровых детей. Стоматология. 2015;94(1):11‑13.
Samoukina AM, Mikhaĭlova ES, Chervinets VM, Alekseeva IuA, Zhmakin IA, Andreeva OV. Microbiological monitoring of oral fluid of clinically healthy children. Stomatology. 2015;94(1):11‑13. (In Russ.)
https://doi.org/10.17116/stomat201594111-13

Рекомендуем статьи по данной теме:
Ди­на­ми­ка кон­цен­тра­ции об­ще­го IgE в ро­то­вой жид­кос­ти па­ци­ен­тов при не­пе­ре­но­си­мос­ти ак­ри­ла­тов. Рос­сий­ская сто­ма­то­ло­гия. 2025;(1):18-22
Роль вза­имос­вя­зей по оси мозг—ки­шеч­ник—мик­ро­би­ом в ре­гу­ля­ции цир­ка­ди­ан­ных рит­мов, ме­ха­низ­мах сна и их на­ру­ше­ний. Жур­нал нев­ро­ло­гии и пси­хи­ат­рии им. С.С. Кор­са­ко­ва. Спец­вы­пус­ки. 2024;(5-2):79-86
Из­ме­не­ния мик­ро­би­оце­но­за ки­шеч­ни­ка у де­тей школь­но­го воз­рас­та, ас­со­ци­иро­ван­ные с на­ли­чи­ем блас­то­цист (Blastocistis homi­nis). Ла­бо­ра­тор­ная служ­ба. 2024;(2):20-29

Формирование здорового поколения - приоритетная задача современного здравоохранения [2, 6]. Микробное сообщество различных биотопов детского организма достаточно быстро реагирует на воздействие экзогенных и эндогенных факторов качественными и количественными изменениями при отсутствии клинических симптомов и жалоб [1, 5, 7]. Численность микроорганизмов или их индикаторные свойства могут рассматриваться как параметры, позволяющие тестировать интенсивность внешнего и внутреннего воздействия [4, 9]. Классическое бактериологическое исследование является "золотым стандартом" микробиологии и позволяет изучить широкий спектр параметров микробиоценозов, однако оно длится достаточно долго, является трудоемким и экономически затратным. Выявление наиболее часто встречающихся изменений в различных биотопах желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), выбор более доступного для исследования биоматериала у клинически здоровых детей имеет большое практическое значение [8, 10].

Мы поставили перед собой задачу - изучить видовой и количественный состав микробиоценоза ротовой жидкости (РЖ) и кишечника у клинически здоровых детей и подростков для выявления микробных маркеров экологического неблагополучия и оценки резервов адаптации.

Исследование явилось компонентом научно-исследовательской работы (НИР) "Проблемы формирования здоровья детей подросткового возраста в современных социально-средовых условиях" в рамках научной платформы "Педиатрия"; НИР проводится во исполнение приказа МЗ РФ №281 от 30.04.13.

Материал и методы

Качественные и количественные параметры микробиоценозов РЖ и фекалий оценивали у 74 лиц мужского и женского пола разного возраста. В 1-ю группу вошел

31 человек в возрасте 12-16 лет (16 девочек, 15 мальчиков), во 2-ю - 43 студента I курса ТГМА 17-18 лет

(6 юношей и 37 девушек).

Исследование проводилось с разрешения Этического комитета ТГМА. У всех испытуемых получено информированное согласие на сбор материала. Ответы на вопросы анкеты содержали сведения об отсутствии хронических заболеваний ЖКТ и других систем органов, данные семейного анамнеза и др. Все указанные лица были осмотрены педиатром и узкими специалистами (стоматолог, оториноларинголог, хирург, эндокринолог); проводились функциональные исследования (антропометрия, физиометрия, соматоскопия, кардиореспираторные нагрузочные пробы, спирография, УЗИ щитовидной железы и органов брюшной полости, 12-канальная ЭКГ, энцефалография).

В целях микробиологического мониторинга РЖ собирали в стерильные одноразовые пластиковые контейнеры утром, натощак, перед проведением процедуры гигиенического ухода за полостью рта. Видовой и количественный состав микрофлоры исследовали с использованием классических бактериологических методов [3]. Для культивирования применяли питательные среды: 5% кровяной Columbia Agar, Sabouraud Dextrose Agar, маннит-солевой агар с добавлением эмульсии куриного желтка, стрептококковый агар, хромогенный агар для грибов рода Candida (Himedia), среду Эндо (Оболенск). Посевы инкубировали при температуре 37 °С в течение 24-48 ч в

аэробных, микроаэрофильных и анаэробных условиях с использованием микроанаэростатов (BBL) и газогенераторных пакетов Gas Pack Plus (BBL). Количество бактерий определяли путем подсчета колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 г фекалий или 1 мл РЖ (lg КОЕ/г, lg КОЕ/мл).

Для статистической обработки использовали стандартный пакет программ Excel и определяли средние значения, стандартное отклонение, стандартную ошибку.

Результаты и обсуждение

В ходе бактериологического анализа РЖ было установлено, что у испытуемых 1-й группы в 48,4% случаев, а во 2-й группе - в 46,5% случаев отмечались компенсированные дисбиотические сдвиги, характеризующиеся снижением содержания лактобацилл и бифидобактерий и незначительным количественным преобладанием 1 вида условно-патогенной микрофлоры (УПМ). Качественные параметры микробного пейзажа РЖ в разных возрастных группах не имели существенных различий и были представлены микроорганизмами родов

Streptococcus, Lactobacillus, Staphylococcus, Candida, Bacteroides, Bacillus, Actinomyces, Peptococcus, Peptostreptococcus, Veillonella, Bifidobacterium

и Clostridium. Микроорганизмы рода Streptococcus определялись в 100% образцов РЖ в обеих группах. Количество стрептококков в 1-й группе колебалось от 6,42 до 7,7 lg КОЕ/мл, в среднем - 7,37±0,63 lg КОЕ/мл, а во 2-й группе - от 6,8 до 8,1 lg КОЕ/мл, в среднем - 8,12±1,1 lg КОЕ/мл. Гемолитические стрептококки не определялись. Количество бифидобактерий было снижено на 1-2 порядка в 86,4% образцов РЖ в 1-й группе и в 83,7% образцов - во 2-й группе: в среднем соответственно 3,4±0,97 и 2,6±0,62 lg КОЕ/мл (табл. 1
).

У детей 1-й возрастной группы Staphylococcus spp. определялся в 64,5% случаев в количестве от 1 до 5,48 lg КОЕ/мл, в среднем - 3,12±1,07 lg КОЕ/мл; S. aureus - в 61,3% случаев в количестве от 1 до 4 lg КОЕ/мл, в среднем - 2,59±0,71 lg КОЕ/мл. S. epidermidis и другие коагулазо­отрицательные стафилококки - в 66,7% случаев, и их количество колебалось от 1,69 до 3,3 lg КОЕ/мл, в среднем - 2,19±0,54 lg КОЕ/мл; дрожжеподобные грибы рода Candida - в 32,3% случаев в количестве от 1,18 до 3 lg КОЕ/мл, в среднем - 1,79±0,64 lg КОЕ/мл; в 55,6% случаев положительных образцов была идентифицирована

C. albicans; представители рода Lactobacillus выделены в 29,03% образцов в количестве от 1,14 до 3,2 lg КОЕ/мл, в среднем - 1,95±0,7 lg КОЕ/мл. В РЖ количество лактобактерий составило <3 lg КОЕ/мл в 95,5% образцов и <2 lg КОЕ/мл - в 86,4%. Микроорганизмы рода Bacillus выделены в 25,8% образцов в количестве от 1,69 до 2,78 lg КОЕ/мл, в среднем - 2,14±0,37 lg КОЕ/мл (см. табл. 1

).

У 2 (6,5%) обследованных детей была обнаружена Klebsiella pneumoniae. У всех обследованных 1-й группы в РЖ отсутствовали патогенные представители семейства Enterobactericeae и гемолитические эшерихии. Количество лактозонегативных эшерихий, эшерихий с нормальной ферментативной активностью и клостридий в РЖ не превышало допустимых значений.

Во 2-й возрастной группе микроорганизмы рода Lactobacillus определялись в 55,8% образцов РЖ. Количество лактобацилл колебалось от 2,6 до 5,4 lg КОЕ/мл, в среднем - 3,79±0,72 lg КОЕ/мл. Бактерии рода Bacillus выявлены в 79,1% образцов в количестве от 2,48 до 5,78 lg КОЕ/мл, в среднем - 3,98±0,78 lg КОЕ/мл. Общее количество коагулазоположительных и коагулазоотрицательных стафилококков колебалось от 2,3 до 10,56 lg КОЕ/мл, в среднем - 5,29±1,9 lg КОЕ/мл. Микроорганизмы рода Staphylococcus были выделены в 95,3% случаев. S. aureus идентифицирован в 62,8% случаев в количестве от 2,3 до 5,78 lg КОЕ/мл, в среднем - 3,57±0,99 lg КОЕ/мл. S. epidermidis и другие коагулазоотрицательные стафилококки обнаружены в 86% образцов, количество их колебалось от 2 до 4,55 lg КОЕ/мл, в среднем - 3,35±0,84 lg КОЕ/мл. Дрожжеподобные грибы рода Candida были выделены в 67,4% случаев в количестве от 2 до 5,9 lg КОЕ/мл, в среднем - 3,64±1,06 lg КОЕ/мл.

При сравнении результатов бактериологического исследования РЖ у испытуемых разных возрастных групп оказалось, что во 2-й возрастной группе достоверно чаще выделялись микроорганизмы родов Lactobacillus, Staphylococcus, Candida и Bacillus, и количество их было достоверно большим, чем у детей 1-й группы (см. табл. 1

).

При бактериологическом анализе кала у детей 1-й группы нормобиоценоз и дисбиоз II степени был выявлен в 22,2% случаев, дисбиоз I степени - в 55,6% (табл. 2

). Дисбиотические изменения характеризовались снижением количества Bifidobacterium spp. до уровня <8 lg КОЕ/г у 7 (38,9%) детей, Lactobacillus spp. до уровня <6 lg КОЕ/г - у 15 (83,3%). Количество спорообразующих анаэробов (клостридий) было незначительно увеличено - на 1 lg КОЕ/г - у 10 (55,6%) детей. S. aureus обнаруживался у 5 (27,7%) человек в концентрации 4,8±0,4 lg КОЕ/г. У 10 (55,6%) испытуемых S. aureus был обнаружен в образцах РЖ и кале. Дрожжеподобные грибы рода Candida выявлены у 4 (22,3%) детей в количестве 4±1,06 lg КОЕ/г, у 50% была идентифицирована C. albicans. Снижение количества эшерихий с нормальной ферментативной активностью наблюдалось у 5 (27,8%) детей. Количество лактозонегативных и гемолитических эшерихий соответствовало возрастной норме. Из других представителей УПМ в кале были обнаружены C. freundii, E. aerogenes, E. cloacae.

Во 2-й группе нарушения, соответствующие I степени дисбиоза, выявили у 28,6% детей, II степени - у 52,4%, III степени - у 4,8%, т.е. дисбиоз в целом обнаружен у 85,8% лиц этой группы. Таким образом, дисбиоз II степени достоверно чаще выявлялся во 2-й группе, а I степени - в 1-й (см. табл. 2

). У 100% лиц 2-й группы количество представителей индигенной микрофлоры (бифидо- и лактобактерий) было ниже нормы в среднем на 2,7±0,82 lg КОЕ/г. S. aureus был обнаружен у 12 (57,1%) студентов в концентрации 4,7±0,82 lg КОЕ/г. У 8 (38%) студентов

S. aureus выявлен в образцах РЖ и кале. Дрожжеподобные грибы рода Candida определялись у 10 (47,6%) студентов в количестве 4,4±0,92 lg КОЕ/г, что достоверно чаще, чем в 1-й группе.

Таким образом, в биотопах ЖКТ клинически здоровых детей и подростков разных возрастных групп выявлены изменения качественных и количественных параметров микробиоценозов, характеризующиеся снижением содержания индигенной микрофлоры и увеличением количества представителей УПМ. Наиболее часто выявлялись микроорганизмы родов Staphylococcus, Bacillus и Candida, количество которых с возрастом достоверно увеличивалось. Микроэкологические изменения в разных биотопах ЖКТ тесно взаимосвязаны между собой, дисбиотические изменения возникают на различных уровнях ЖКТ у одних и тех же детей. РЖ как более доступный для сбора и проведения бактериологического исследования биоматериал может быть использована для оценки состояния микроэкологии ЖКТ и своевременного выявления групп риска с последующим проведением адекватной коррекции на стадии функционального дисбаланса.

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо со ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail

Мы используем файлы cооkies для улучшения работы сайта. Оставаясь на нашем сайте, вы соглашаетесь с условиями использования файлов cооkies. Чтобы ознакомиться с нашими Положениями о конфиденциальности и об использовании файлов cookie, нажмите здесь.