Содержание макро- и микроэлементов в эмали находится в прямой корреляционной зависимости от их концентрации в ротовой жидкости. Минеральные компоненты, поступающие в эмаль из слюны, не только повышают ее сопротивляемость к кариесу, но и задерживают начальные его проявления, усиливая процессы реминерализации [2].
Важная роль в поддержании гомеостаза полости рта принадлежит ферментам смешанной слюны, которые ускоряют поступление в эмаль фосфорных и кальциевых соединений из ротовой жидкости. На активность ферментов влияют состав микрофлоры и гигиена полости рта [3].
Внутренний дисколорит может возникать из-за девитального окрашивания. Как известно, депульпирование зуба часто приводит к изменению его цвета, особенно если лечение проводили резорцин-формалиновым методом. Применение эндометазона для пломбирования корневых каналов также приводит к выраженному окрашиванию депульпированных зубов. Изменение цвета депульпированных зубов объясняется расположением дентинных трубочек, выходящих на поверхность зуба, и определяется химическим составом паст и пломбировочных материалов. Кроме того, зубы могут потемнеть в результате окисления, когда в канале могут оставаться обломки эндодонтических инструментов или при пломбировании каналов с использованием штифтов из неблагородных металлов [4, 9].
Для улучшения цвета девитальных зубов применяют различные методы отбеливания, после проведения которых повышается проницаемость эмали, что, вероятно, не может не отразиться на составе ротовой жидкости [5, 6].
В связи с этим целью нашего исследования явилось проведение корреляционного анализа между некоторыми биохимическими показателями эмали и ротовой жидкости и показателями стоматологического статуса пациентов с девитальными зубами.
Материал и методы
В исследовании приняли участие 55 пациентов, которым проводили отбеливание девитальных зубов профессиональной системой с концентрированной перекисью карбамида (4 процедуры комбинированного отбеливания с кратностью в неделю). Все пациенты после отбеливания зубов применяли зубную пасту с кальцием в течение 1 мес. Кроме того, всем пациентам провели 10 аппликаций геля с 5% гидроксиапатитом или фосфатом кальция (по 20 мин). Через 1 месяц после отбеливания зубов пациентам поставили прокладку из стеклоиономерных цементов, а затем постоянные пломбы из композитного материала.
Обследование пациентов включало: определение индекса эффективности гигиены полости рта РНР [11], оценку состояния тканей пародонта при помощи индекса РМА [10, 12].
Для оценки изменения проницаемости эмали проводили прижизненную кислотную биопсию до отбеливания эмали, после лечения и применения профилактических средств. Забор биоптатов осуществляли с вестибулярной поверхности резцов и клыков верхней и нижней челюстей. Перед биопсией поверхность зубов обрабатывали 3% раствором перекиси водорода и высушивали, на исследуемую область эмали наклеивали липкую полиэтиленовую пленку с круглым окошком диаметром 5 мм. На «окно» наносили 1 каплю деминерализующей смеси (рН 0,37). По истечении 30 с каплю убирали кусочком фильтровальной бумаги клиновидной формы, после чего добавляли 1 мл бидистиллированной воды и настаивали в течение 2 сут и исследовали на содержание химических веществ [6, 7].
Кроме того, мы изучали состав нестимулированной смешанной слюны, забор которой осуществляли до начала лечения (натощак или через 3 ч после приема пищи), после проведения процедур отбеливания и курса реминерализующей терапии.
В биоптатах определяли концентрацию общего и ионизированного кальция, общего фосфата, а в пробах смешанной слюны - общего и ионизированного кальция, общего фосфата, железа; концентрацию органических веществ и активность ферментов [8].
Анализы выполнены на автоматическом анализаторе Ultra Kone (рис. 1).
Концентрацию общего кальция в пробах измеряли комплексонометрическим методом с индикатором крезолфталеином [8].
Для определения содержания общего фосфата использовали метод Daly и Ertinghausen (1972) в модификации Wang. В результате реакции происходит образование стабильного фосфомолибдата, измеряемого при длине волны 340 нм [8].
Содержание железа определяли феррозиновым методом (H. Williams, 1977). В кислой среде железо диссоциирует из комплекса с трансферрином и переходит в раствор в виде свободных трехвалентных ионов железа, которые восстанавливаются аскорбиновой кислотой в двухвалентные, реагирующие с ферразином, образуя при этом интенсивно окрашенное пурпурное соединение [8].
Для определения содержания общего белка использовали биуретовую реакцию (модификация, предложенная Godwin, Flack, Wollen, 1972). Пептидные соединения белка реагируют с ионами Cu2+ в щелочной среде с образованием сине-фиолетового комплекса [8].
Методика определения содержания глюкозы была основана на энзиматическом методе, предложенном Keilen, Hartree (1948), в модификации Sleen с использованием гексокиназы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. В процессе реакции образование НАДН
Концентрацию креатинина определяли с помощью реакции Яффе (D. Young и соавт., 1975) между щелочным пикратом и креатинином. В результате реакции развивалась ярко-красная окраска пропорционально концентрации креатинина [8].
Активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) выявляли по методу Henry и соавт. (1974). Фермент восстанавливает никотинамидаденин-динуклеотид (НАД) до НАДН, и активность ЛДГ определяют по повышению абсорбции на длине волны 340 нм [8].
Активность аспартатаминотрансферазы (AСT) определяли по методу Karmen (1955) в модификации Henry. Результатом является уменьшение абсорбции на длине волны 340 нм, которое прямо пропорционально активности AСT [8].
Определение активности аланинаминотрансферазы (AЛT; по унифицированному, оптимизированному оптическому методу Raytman-Frenkel, 1972) основано на расщеплении L-аланина и измерении оптической плотности продуктов распада [8].
Для определения активности щелочной фосфатазы (ЩФ) используют метод Bessey, Lowry, Brock (1972) в модификации Wilkinson с применением в качестве субстрата р-нитрофенолфосфата. Повышение абсорбции на длине волны 405 нм пропорционально активности ЩФ [8].
Методика определения активности креатинфосфокиназы (KФK) основана на расщеплении креатинфосфата по методу Lohman, Lehman (1976) в модификации Szazs [8].
В основу метода определения активности α-амилазы положен усовершенствованный сахарогенический метод Wallenfels и Blair. Скорость образования р-нитрофенола пропорциональна активности α-амилазы [8].
Анализы выполнены на ионселективном электроде AWL (рис. 2).
Концентрацию ионизированного кальция определяли ионселективным методом на аппарате AWL. Биологическую пробу засасывали в ион - селективный электрод и сразу получали результаты. Калибровку проводили по стандартным растворам калия и кальция.
Результаты осмотров заносили в специально разработанные карты. Данные стоматологических осмотров переносили в компьютер IBM PC/AT и осуществляли статистическую обработку клинического материала с использованием пакетов прикладных программ. Статистически достоверные различия между показателями стоматологического статуса, выходом макро-, микроэлементов в биоптаты, содержанием химических веществ и активностью ферментов в смешанной слюне пациентов с «тетрациклиновыми» зубами определяли с помощью t-критерия Стьюдента и критерия χ2 с общепринятым уровнем значимости р=0,05. Для определения зависимости между отдельными параметрами применяли простой корреляционный и регрессионный анализы, а также коэффициент сопряженности признаков Пирсона [1].
Результаты и обсуждение
Для выявления взаимозависимости показателей стоматологического статуса у пациентов с девитальными зубами по индексам РНР и РМА с биохимическим составом эмали и смешанной слюны были построены матрицы, которые характеризуют корреляционные связи между исследованными показателями (рис. 3-5).
Математическим анализом удалось выявить высокую степень положительной связи между следующими признаками в смешанной слюне и биоптатах лиц с депульпированными зубами: ионизированным (r=0,99), общим кальцием (r=0,91), фосфатом (r=0,97), железом (r=0,95).
После проведения профессионального отбеливания зубов и комплекса профилактических мероприятий степень связи также осталась высокой между показателями: ионизированным кальцием (r=1,0 и r= –0,97), общим кальцием (r=0,99 и r= –0,92), фосфатом (r=0,94 и r= –0,96) и железом (r=0,92) соответственно.
В смешанной слюне лиц с депульпированными зубами выявлена высокая положительная корреляционная связь между ионизированным (r=0,98), общим кальцием (r=0,90) и фосфатом. После проведения профессионального отбеливания и комплекса профилактических мероприятий степень связи осталась высокой: между ионизированным кальцием (r=0,95 и r=0,93), общим кальцием (r=0,96 и r=1,0) и фосфатом соответственно.
Кроме того, математический анализ выявил высокую связь ионизированного (r=0,98), общего кальция (r=0,96), фосфата (r=0,98) с активностью ЩФ. После профессионального отбеливания произошло незначительное изменение этих значений до r=1,0, r=0,99, r=0,97 соответственно. После проведения комплекса профилактических мероприятий наблюдалось снижение коэффициента корреляции между ионизированным (r=0,94), общим кальцием (r=0,90), фосфатом (r=0,94) и активностью ЩФ.
Кроме того, в начале лечения отмечалась высокая степень корреляционной связи между фосфатом и креатинином (r=0,95), фосфатом и KФK (r=0,98), креатинином и KФK (r=0,98). После лечения и проведения комплекса профилактических мероприятий происходило снижение корреляционной связи между фосфатом и креатинином (r=0,92 и r=0,83), фосфатом и KФK (r=0,95 и r=0,91), креатинином и KФK (r=0,99 и r=0,97).
Математическим анализом удалось выявить средний уровень зависимости между амилазой (r=0,67), ЛДГ (r=0,53) и глюкозой. В конце исследования произошло увеличение корреляционной связи между глюкозой и амилазой (r= –0,85), тогда как между ЛДГ и глюкозой наметилась тенденция ее ослабления (r=0,41).
Кроме того, в начале лечения была обнаружена высокая степень корреляции между РНР (r=0,91), РМА (r=0,93) и общим белком, которая после отбеливания несколько изменилась и составила: r= –0,91, r=0,97 соответственно. В конце исследования коэффициент корреляции между РНР, РМА и общим белком составил r=0,95 и r=0,92 соответственно.
У лиц с депульпированными зубами был выявлен средний уровень корреляции между РНР (r=0,51), РМА (r=0,62) и AСT. После профессионального отбеливания произошло его увеличение между РНР (r= –0,73), РМА (r=0,62) и AСT. После проведения комплекса профилактических мероприятий коэффициент корреляции между РНР, РМА и AСT остался на среднем уровне (r=0,61).
Между РНР (r=0,81), РМА (r=0,91) и AЛT наблюдалась высокая степень корреляционной связи. После профессионального отбеливания и комплексной профилактики она снизилась до среднего уровня (между РНР и AЛT r= –0,58 и r=0,54; PMA и AЛT r=0,49 и r=0,55).
Анализ полученных данных показал, что при изучении корреляционной зависимости различных параметров эмали и ротовой жидкости у пациентов с девитальными зубами обращает на себя внимание тот факт, что при изменении одного биохимического показателя параллельно изменяется и ряд других. Нами была выявлена динамика корреляционных взаимосвязей показателей стоматологического статуса, состава эмали, содержания макроэлементов, общего белка, креатинина, глюкозы и активности ферментов в ротовой жидкости пациентов с девитальными зубами, которая свидетельствует об изменении гомеостаза полости рта после смешанного отбеливания зубов и, вероятно, об уменьшении реминерализирующего потенциала ротовой жидкости. Тогда как после применения средств профилактики, напротив, наблюдалось повышение реминерализующей активности ротовой жидкости.
Таким образом, лицам с девитальными зубами после отбеливания зубов следует использовать средства гигиены, в состав которых входят кальций, фосфаты и гидроксиапатит, с целью повышения резистентности эмали.