ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Конструирование и изучение свойств прототипа однократной интраназальной вакцины на основе рекомбинантного вируса Сендай штамма Москва, экспрессирующего в качестве иммуногена S белок варианта JN.1, и оценка его перекрестной активности в отношении ряда других вариантов SARS-CoV-2.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Рекомбинантный вирус Сендай с инсерцией трансгена S(JN.1) между генами P и M был получен методами генетической инженерии и ОТ-ПЦР. Анализ экспрессии S(JN.1) проводили методом иммуноблоттинга. Иммуногенность вакцинного конструкта оценивали методами ИФА и в реакции нейтрализации на мышах линии BALB/c. Протективность оценивали на мышах линии K18-hACE2 по уровню снижения репликации (метод ОТ-ПЦР-РВ) и инфекционного титра (на Vero E6 клетках) SARS-CoV-2 в тканях носовой полости и легких вакцинированных животных.
РЕЗУЛЬТАТЫ
На основе вируса Сендай штамма Москва разработана вакцинная конструкция Sen-S-JN.1(M), которая экспрессирует S белок циркулирующего варианта JN.1 SARS-CoV-2. Показано, что S белок эффективно экспонируется на вирионах Sen-S-JN.1(M) и индуцирует формирование мукозального и системного гуморального иммунного ответа против JN.1 варианта SARS-CoV-2 при однократной интраназальной вакцинации мышей линии BALB/c. Анализ перекрестной нейтрализующей активности выявил значительное снижение титров антител против вариантов Delta, BA.1, XBB.1.5 и EG.5.1 с сохранением высокого уровня нейтрализации в отношении XBB.1.16 и BA.5.2. Мыши линии K18-hACE2, вакцинированные Sen-S-JN.1(M), были хорошо защищены от инфекции SARS-CoV-2 (JN.1) за счет значимого (более чем в 106 раз) подавления репликативной активности вируса. Ни один из образцов легких и носовых раковин вакцинированных мышей не содержал детектируемого уровня инфекционного SARS-CoV-2, что свидетельствует об остановке инфекции.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Рекомбинантный вирус Sen-S-JN.1(M) является перспективным вакцинным конструктом и может обеспечить перекрестную защиту от циркулирующих и эволюционно близких вариантов SARS-CoV-2 линии Омикрон.
