Известно, что на преаналитический этап приходится более половины от общего числа ошибок, оказывающих существенное влияние на конечный результат исследования [1, 2]. Мы остановимся на нескольких важных моментах. Относительное и абсолютное количество клеток в популяциях лимфоцитов у детей имеет существенное отличие, так как их иммунная система еще полностью не сформирована (особенно у них преобладают В-лимфоциты и NK-клетки). По мере формирования иммунной системы число клеток этих популяций уменьшается и увеличивается число Т-лимфоцитов. После 55—60 лет число Т-лимфоцитов вновь снижается и увеличивается число NK-клеток [3, 4]. Изменения количества клеточных популяций и субпопуляций лимфоцитов наблюдают и в зависимости от географического места проживания и воздействия на организм различных неблагоприятных экологических факторов [2, 3]. Очень важны для данных исследований национальность обследуемых пациентов и принадлежность к определенному типу, например у японцев иммунорегуляторный индекс ниже, чем у европейцев, за счет повышенного уровня клеток CD8+ [5]. На абсолютное и относительное число клеток оказывает большое влияние и образ жизни пациентов. Прием пищи (особенно жирной) влечет за собой значительное увеличение лейкоцитов (пищевой лейкоцитоз) [1, 2, 6]. Курение вызывает повышение количества лейкоцитов, в частности клеток CD4+, употребление алкоголя сопутствует повышению числа лимфоцитов, но не меняет соотношения субпопуляций, регулярное применение героина вызывает увеличение числа Т-хелперов [7], тогда как кортикостероидная терапия и лечение интерфероном могут вызывать уменьшение числа Т-хелперов [8]. Ряд авторов [9] выявили, что у пациентов с инсулинзависимым сахарным диабетом в зависимости от происхождения применяемого ими препарата инсулина может наблюдаться различная картина распределения субпопуляций лимфоцитов: человеческий инсулин значительно снижает содержание клеток CD4+ и CD8+, а применение свиного инсулина приводит к повышению относительного содержания CD4+ и CD8+ по сравнению с исходным уровнем. Выявлено, что процентное содержание CD4 у женщин несколько выше, чем у мужчин, так же как и отношение CD4: CD8 (на 0,17 ед.) [10]. При беременности происходят изменения в субпопуляционном составе лимфоцитов. Так, при I—II триместрах беременности наблюдается снижение абсолютного количества Т-хелперов, при этом относительное количество не меняется. Этот показатель нормализуется к III триместру [7]. Обманчиво высокое количество Т-хелперов у пациентов с ВИЧ возможно при сочетанной инфекции вирусом HTLV-1, а также после спленэктомии [11, 12].
В данном контексте приобретает особую важность строгое соблюдение правил преаналитического этапа.
Цель настоящего исследования — предоставление опыта Иркутской области по снижению количества отбракованного биоматериала, направленного в Иркутский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями, с целью исследования количества Т-хелперов у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Результаты
Иркутская область является одной из самых больших по площади областей Российской Федерации. Площадь ее составляет 767 900 км2, с плотностью населения — 3,3 человека на 1 км2 (в северных территориях 0,02—0,1 человека на 1 км2). Общая численность населения на прикрепленной территории — 2 408 901 человек. В связи с довольно напряженной ситуацией с ВИЧ-инфекцией на территории Иркутской области (на диспансерном наблюдении находятся около 22 000 человек) и большим числом пациентов, получающих антиретровирусную терапию, постоянно увеличивается количество исследований на число Т-хелперов у пациентов с ВИЧ-инфекцией. Биологический материал в ГБУЗ ИОЦ СПИД доставляют из 38 административных территорий Иркутской области и 43 медицинских организаций Иркутска.
Поскольку данные исследования проводятся только на базе ГБУЗ ИОЦ СПИД, то доставка биологического материала, в данном случае цельной крови с К3 ЭДТА, осуществляется различными видами транспорта. Для понимания структуры брака в доставленном биологическом материале были разработаны журналы, в которых отражались все виды и количество забракованных проб (см. таблицу).
По каждому зарегистрированному случаю брака проводили методическую работу с медицинской организацией, отправившей пробы. Она состояла из письменных замечаний на направлениях с бракованными пробами, замечаний по телефону и в специализированной системе «Интермед», которая объединяет данные по пациентам, находящимся на диспансерном наблюдении, в Иркутском областном центре СПИД и медицинских организациях Иркутской области (рис. 1).
Также проводили планомерную работу с процедурными медицинскими сестрами как нашей организации, так и других медицинских организаций области. Ежегодно организовывали практические семинары и научно-практические конференции по усовершенствованию преаналитического этапа, проводили разбор ошибок взятия крови, дефектов доставки и оформления медицинской документации (рис. 2).
Обсуждение и выводы
Благодаря системе разработанных мер по уменьшению ошибок на преаналитическом этапе и устранению дефектов в доставке биологического материала продемонстрировано снижение количества брака при доставке проб, несмотря на то что иммунограмма — это одно из самых сложных в преаналитическом смысле исследований. Наряду с соблюдением стандартных преаналитических условий еще очень важен временной фактор. Учитывая большие расстояния между медицинскими организациями и ГБУЗ ИОЦ СПИД, непростые климатические условия (более полугода на территории устанавливается низкая температура воздуха), наблюдается отчетливая положительная динамика в устранении брака, которая сложилась в нашей медицинской организации, это говорит о правильных технологиях и подходах, которые мы реализуем. На наш взгляд, очень важным является объединение усилий административного и общественных ресурсов, что, несомненно, сказалось на качестве проведения лабораторных исследований, интерпретации полученных результатов, улучшении диагностики нарушений функционирования иммунной системы и адекватности назначаемой иммунотерапии.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Источником финансирования являлись средства ГБУЗ ИОЦ СПИД.
*e-mail: doktorinna68@mail.ru;
ОRCID:http://orcid.org/0000-0002-4162-0375