В последние годы значительно возрос интерес к изучению роли липидов в механизмах регуляции метаболических процессов в норме и при патологических состояниях. Показано, что липиды могут регулировать активность связанных с мембраной ферментов, определять эффективность действия гормонов, токсинов и других физиологически активных веществ, изменять транспорт ионов и субстратов, активно вмешиваться в процессы образования энергии, синтеза белков и нуклеиновых кислот [1, 2]. Поэтому любые изменения состава и структуры липидов вызывают функциональные нарушения в органах и тканях организма, что приводит к возникновению патологических процессов. Нами изучались отдельные классы липидов в сыворотке крови у больных витилиго.
Витилиго — широко распространенное заболевание кожи человека [3, 4]. Следует указать, что, несмотря на проведенные в достаточном количестве исследования, этиология и патогенез витилиго остаются все еще не установленными [5, 6]. Остается также нерешенным вопрос о методах лечения данного дерматоза [7, 8]. Разработка новых подходов терапии обусловливает необходимость проведения разносторонних исследований по определению всех основных звеньев метаболических нарушений как в коже, так и в организме больного в целом. В связи с этим целью данной работы является сравнительное исследование содержания холестерина (ХС), а также качественного и количественного состава фосфолипидов (ФЛ) в сыворотке крови здоровых лиц и больных витилиго.
Материал и методы
Исследовали сыворотку крови 12 здоровых лиц и 25 больных витилиго. Экстракцию общих липидов из сыворотки крови и их очистку от не липидных примесей осуществляли по методике Фольча [9], в модификации Кейтса [10] с использованием хлороформметаноловой смеси в соотношении 2:1. Полученный общий липидный экстракт использовали для определения содержания ХС, общих ФЛ и их отдельных фракций. Фракционирование общих ФЛ проводили с помощью одномерной восходящей хроматографии на тонком слое силикагеля с использованием стеклянной пластинки размером 13×18 см; применяли систему растворителей, содержащей хлороформ: метанол: уксусная кислота: вода (65:43:16:4). О количестве общих ФЛ и их отдельных фракций судили по содержанию в них фосфора (Р), который определяли после минерализации образцов по методике Vaskovsky [11]. Содержание ХС в общем липидном составе сыворотки крови определяли по методике Илька [12].
Статистическую обработку полученных данных проводили по Стьюденту—Фишеру. Использовали пакет программ Microsoft Office. Статистически значимыми считали различия при р<0,05.
Результаты исследования и обсуждение
Исследование холестерина. Согласно полученным нами данным, при витилиго значительно снижена концентрация ХС в сыворотке крови (см. рисунок).
ХС является родоначальником большой группы биологически важных соединений, синтезируемых в организме человека и животных [13]. Из ХС образуются желчные кислоты, гормоны коркового вещества надпочечников и половых желез; в коже под влиянием УФ-лучей ХС превращается в витамин D [14], т.е. физиологическая функция ХС в организме человека многообразна. На основании полученных нами данных можно предполагать, что при витилиго либо ингибируется биосинтез ХС, либо ускоряется его превращение в указанные физиологически активные соединения. Подтверждением этого предположения могут служить данные литературы о нарушении функции коркового вещества надпочечников с достоверно высоким содержанием минералокортикоидов в сыворотке крови у больных витилиго [15]. Таким образом, результаты наших исследований свидетельствуют, что изменения метаболизма ХС имеют определенное значение в патогенезе данного дерматоза.
Исследование фосфолипидов. Следующим этапом настоящей работы явилось изучение содержания общих ФЛ и их качественного и количественного состава в сыворотке крови здоровых лиц и больных витилиго. Результаты исследования представлены в таблице.
Фракционирование общих ФЛ сыворотки крови с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле позволило выявить на хроматограммах 8 фракций как у здоровых лиц, так и у больных витилиго. При сравнительном анализе результатов исследования было обнаружено различие в количественном содержании отдельных фракций ФЛ в сыворотке крови здоровых лиц и больных витилиго. В отличие от нормы, при витилиго наблюдается статистически значимое повышение количества лизофосфатидилхолина (ЛФХ) и фосфатидной кислоты (ФК) на фоне незначительного снижения содержания фосфатидилинозита (ФИ) и кардиолипина (КЛ). Так, если содержание ЛФХ в сыворотке крови здоровых лиц составляет в среднем 6,6% и ФК — 2,52% от общих ФЛ, то в сыворотке крови у больных витилиго — 8,6 и 4,13% соответственно. В норме содержание ФИ составляет в среднем 4,97% и КЛ — 1,67%, а при витилиго — 4,11 и 0,7% соответственно. Количественное содержание остальных фракций ФЛ в сыворотке крови у больных витилиго практически не отличалось от нормы.
По нашим данным, наиболее глубокому изменению при витилиго подвергаются фракции ЛФХ и ФК. Отмечалось резкое увеличение содержания этих фракций ФЛ в сыворотке крови у больных витилиго по сравнению с нормой.
Основные фракции ФЛ, как нейтральных, так и кислых, синтезируются из фосфатидной кислоты и диацилглицерола [16]. Поэтому накопление ФК в сыворотке крови больных витилиго, по нашему мнению, можно объяснить либо торможением превращения ФК в другие, более сложные ФЛ, либо усилением распада основных фракций ФЛ. Действительно, результаты настоящей работы свидетельствуют о снижении уровней ФХ, ФИ и КЛ в сыворотке крови больных витилиго по сравнению с нормой.
Повышение концентрации ЛФХ в сыворотке крови у больных витилиго можно объяснить интенсификацией перекисного окисления липидов (ПОЛ) в организме таких больных, что было продемонстрировано в исследованиях ряда авторов [5, 6, 17]. Окислительный стресс, наблюдаемый при витилиго, может привести к повышению активности фосфолипазы А2 или подавлению реацилирования ЛФХ, что приводит к увеличению концентрации последнего.
Таким образом, анализ результатов наших исследований позволяет сделать следующее заключение: во-первых, витилиго является системным заболеванием организма; во-вторых, выявленные нарушения в метаболизме ХС и ФЛ занимают особое место в молекулярном механизме развития депигментации в коже при данном дерматозе.