Сайт издательства «Медиа Сфера»
содержит материалы, предназначенные исключительно для работников здравоохранения. Закрывая это сообщение, Вы подтверждаете, что являетесь дипломированным медицинским работником или студентом медицинского образовательного учреждения.

Володченко А.И.

Вятский государственный гуманитарный университет, Киров

Циркин В.И.

Вятский государственный гуманитарный университет, Киров;
Казанский государственный медицинский университет

Хлыбова С.В.

Кафедра акушерства и гинекологии Института последипломного образования Кировской государственной медицинской академии

Дмитриева С.Л.

Кафедра акушерства и гинекологии Института последипломного образования Кировской государственной медицинской академии;
Северная городская клиническая больница, Киров

Изменение скорости адренозависимой агглютинации эритроцитов у женщин на различных этапах репродуктивного процесса

Авторы:

Володченко А.И., Циркин В.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л.

Подробнее об авторах

Журнал: Российский вестник акушера-гинеколога. 2013;13(6): 10‑15

Просмотров: 237

Загрузок: 0

Как цитировать:

Володченко А.И., Циркин В.И., Хлыбова С.В., Дмитриева С.Л. Изменение скорости адренозависимой агглютинации эритроцитов у женщин на различных этапах репродуктивного процесса. Российский вестник акушера-гинеколога. 2013;13(6):10‑15.
Volodchenko AI, Tsirkin VI, Khlybova SV, Dmitrieva SL. Changes in the rate of adrenal dependent agglutination in the red blood cells of women at different stages of a reproductive process. Russian Bulletin of Obstetrician-Gynecologist. 2013;13(6):10‑15. (In Russ.).

?>

Считается, что в регуляции сократительной деятельности матки и развитии акушерской патологии большую роль играет β-адренорецепторный ингибирующий механизм (β-АРИМ), формирующийся, вероятно, под влиянием прогестерона [1, 5, 11]. Его влияние проявляется в том, что во время беременности за счет повышения числа β-адренорецепторов (β-АР) в миоцитах матки [10], а также в результате повышения содержания в крови и околоплодных водах эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов (ЭСБАР) [11] возрастает способность эндогенных агонистов β-АР тормозить сократительную деятельность матки (СДМ). Перед родами в результате уменьшения эффективности активации β-АР степень ингибирующего влияния β-АРИМ на миоциты матки снижается, что индуцирует родовую деятельность [11]. Предполагается, что нарушение функционирования β-АРИМ может приводить к развитию преждевременных родов, слабости родовой деятельности и других акушерских осложнений [1, 11]. Поэтому в акушерской практике возникает потребность в определении состояния β-АРИМ, в том числе β-адренореактивности миометрия. Ранее были предложены методы ее оценки по β-адренореактивности эритроцитов беременных женщин [2, 3, 7, 8, 12]. Однако до настоящего времени эти методы не нашли применения в клинической практике. Вместе с тем очевидно, что благодаря наличию в эритроцитах α- и β-АР [15], эти безъядерные клетки крови могут быть удобным объектом исследования, позволяющим определять эффективность активации адренорецепторов, а тем самым - адренореактивность висцеральных органов, в том числе матки. Исходя из этих представлений, в 2008 г. было предложено [13] оценивать адренореактивность эритроцитов человека по степени изменения под влиянием адреналина скорости агглютинации эритроцитов в изогемагглютинирующей сыворотке анти-(А+В) у людей с группами крови А, В и АВ. Однако этот метод до настоящего времени не применялся для оценки адренореактивности эритроцитов женщин, находящихся на различных этапах репродуктивного процесса. В связи с этим в работе была поставлена цель - оценить по изменению скорости агглютинации под влиянием адреналина адренореактивность эритроцитов у небеременных женщин в фолликулярную или лютеиновую фазы цикла и у женщин с неосложненным течением беременности (I, II и III триместры) и родов (латентная фаза первого периода).

Материал и методы

Исследовали гепаринизированную венозную кровь, полученную в объеме 1-2 мл у 60 женщин с их личного устного согласия и доставленную в научно-исследовательскую лабораторию «Физиология мышц и биологически активных веществ» Вятского государственного гуманитарного университета в пределах 1 ч. Все обследованные женщины были разделены на 6 групп: 1-я группа - 10 небеременных женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла (3-12-й день, в среднем на 6,6±0,9 дня цикла; M±m), она представлена студентками Кировской государственной медицинской академии в возрасте от 18 до 23 лет, в среднем 19,9±0,6 года; 2-я группа - 10 небеременных женщин в лютеиновую фазу цикла (16-27-й день, в среднем 21,2±1,1), она представлена студентками Кировской государственной медицинской академии в возрасте 19-22 года, в среднем 19,8±0,3 года; 3-я группа - 10 беременных женщин в I триместре (5-12 нед, в среднем 8,1±0,8 нед) в возрасте 18-35 лет в среднем 26,3±1,6 года; 4-я группа - 10 беременных женщин во II триместре (14-20 нед, в среднем 17,4±0,5 нед) в возрасте от 20 до 40 лет, в среднем 28,0±2,5 года; 5-я группа - 10 беременных женщин в III триместре (28-37 нед, в среднем 30,2±1,0 нед) в возрасте от 23 до 36 лет, в среднем 29,9±1,6 года. Женщины 3-й, 4-й и 5-й групп наблюдались в женских консультациях № 2 и 7 Кирова; 6-я группа - 10 рожениц в латентную фазу первого периода неосложненных родов (39-40 нед беременности, в среднем 39,6±0,2 нед) в возрасте 25-39 лет, в среднем 29,6±1,6 года. Из них 8 женщин были первородящими, роды проходили в родильном отделении Северной городской клинической больницы.

В исследование не включали женщин, имеющих группу крови 0, а также имеющих в анамнезе острые и хронические соматические заболевания, а среди беременных женщин и рожениц - имеющих какие-либо акушерские осложнения, избыточную массу тела.

Для проведения эксперимента 1 мл крови смешивали с 0,25 мл раствора гепарина (50 ЕД на 1 мл раствора Кребса), т.е. в соотношении 4:1. Адренореактивность эритроцитов определяли по методике В.И. Циркина и соавт. [13] - по изменению времени начала их агглютинации в изогемагглютинирующей сыворотке анти-(А+В) под влиянием адреналина в концентрациях 10-10, 10-9, 10-8, 10-7, 10-6 г/мл или раствора Кребса. Для исследования на плоскость наносили 3 капли: 1) каплю гепаринизированной крови, 2) каплю раствора Кребса (контроль) и каплю адреналина в каждой из исследуемых концентраций (опыт) и 3) каплю изогемагглютинирующей сыворотки анти-(А+В). Стеклянной палочкой смешивали первую и вторую капли, а через 10 с к ним примешивали каплю сыворотки и с этого момента определяли время начала агглютинации (ВНА) эритроцитов по появлению ее первых визуальных признаков – «зернышек» агглютината. Во всех 6 группах ВНА оценивали в секундах, при этом значения ВНА при добавлении адреналина выражали в процентах от численных значений ВНА в контроле, т.е. значений ВНА в отсутствие адреналина (при применении капли раствора Кребса). Необходимость выражения ВНА в процентах связана с тем, что в контроле абсолютные значения ВНА варьируют в определенных пределах.

Результаты исследования подвергнуты статистическому анализу с использованием программы SPSS 11.5.0 и BioStat 2009 Professional. 5.8.4. (в тексте они представлены в виде M±m, так как большинство выборок подчиняется нормальному распределению, определяемому по критерию Шапиро-Уилка). Учитывая небольшой объем выборок, различия между ними оценивали по критерию Манна-Уитни, считая их статистически значимыми при р<0,05. Зависимость эффекта адреналина от его концентрации оценивали по критерию ранговой корреляции Спирмена.

Результаты

Установлено, что ВНА эритроцитов в контроле, т.е. при внесении эритроцитов в изогемагглютинирующую сыворотку с добавлением раствора Кребса, у женщин в фолликулярную фазу менструального цикла составило 18±2 с, в лютеиновую фазу - 15±1 с (различия между ними статистически незначимы, р>0,05). Это позволяет заключить, что у женщин скорость фоновой агглютинации эритроцитов не зависит от фазы менструального цикла. У женщин в I, II и III триместрах беременности ВНА составило соответственно 13±1, 13±2 и 12±2 с. При этом различия с показателями ВНА у небеременных женщин статистически незначимы (р>0,05). В родах ВНА составило 11±1 с, что статистически значимо ниже, чем у небеременных женщин, находящихся в фолликулярной (р<0,01) или в лютеиновой фазе (р<0,05). Таким образом, при физиологическом течении беременности скорость фоновой агглютинации существенно не меняется (см. рисунок)

Рисунок 1. Время начала агглютинации (в % от значений в контроле) эритроцитов женщин в изогемагглютинирующей сыворотке анти-(А+В) в присутствии адреналина: 1 - у небеременных женщин, находящихся в фолликулярной фазе и 2 - у женщин в III триместре беременности. * - различия со значениями в контроле статистически значимы по критерию Манна-Уитни (р<0,01).
и возрастает (по сравнению с таковой у небеременных) в родах.

Показано (см. таблицу и рисунок),

что у небеременных женщин в фолликулярной фазе цикла (1-я группа) адреналин в концентрациях 10-10-10-6 г/мл статистически значимо (р<0,01) и дозозависимо, судя по значению коэффициента Спирмена (–0,338; р<0,05), снижает ВНА эритроцитов. В лютеиновую фазу цикла (2-я группа) адреналин ни в одной из исследованных концентраций (10-10-10-6 г/мл) не влиял на ВНА - все изменения, вызываемые адреналином, были статистически незначимы (р>0,05). Значения ВНА на фоне адреналина (10-10-10-6 г/мл) в фолликулярную фазу цикла (1-я группа) были статистически значимо ниже (р<0,01), чем в лютеиновую фазу цикла (2-я группа). Таким образом, способность адреналина изменять скорость агглютинации эритроцитов зависит от фазы цикла - в фолликулярную фазу цикла добавление адреналина повышает ее, а в лютеиновую - не меняет.

Выявлено (см. таблицу), что у женщин в I триместре беременности (3-я группа) добавление адреналина во всех исследуемых концентрациях не изменяло ВНА. Значения ВНА в присутствии адреналина у женщин этой группы были статистически значимо выше, чем у женщин 1-й группы (р<0,01), и не отличались от значений у женщин 2-й группы (р>0,05). Следовательно, в I триместре беременности, так же как и в лютеиновую фазу цикла, добавление адреналина не повышает скорость агглютинации.

Установлено, что у женщин во II триместре беременности (4-я группа) наличие адреналина в концентрациях 10-9, 10-8, 10-7 и 10-6 г/мл не снижало ВНА, а в концентрации 10-10 г/мл увеличивало ВНА до 109% от значения в контроле (р<0,01). Значения ВНА на фоне адреналина у женщин во II триместре беременности были статистически значимо выше, чем у небеременных женщин в фолликулярную фазу цикла (р<0,01), и не отличались от значений, характерных для лютеиновой фазы (р>0,05). Статистически значимые различия между 3-й и 4-й группами характерны только для ВНА на фоне адреналина в концентрации 10-10 г/мл (р<0,01). Это означает, что добавление адреналина в крови беременных, находящихся во II триместре, способствует снижению скорости агглютинации эритроцитов, но при условии использования его в низких концентрациях.

Выявлено (см. таблицу, рисунок), что у женщин в III триместре беременности (5-я группа) добавление адреналина в концентрациях 10-10, 10-8, 10-7и 10-6 г/мл статистически значимо увеличивало ВНА. Значения ВНА под действием адреналина (10-10-10-6 г/мл) у женщин 5-й группы были статистически значимо выше, чем у женщин 1-й группы (р<0,01), и не различались от показателей у женщин 2-й и 4-й групп (р>0,05). Статистически значимые отличия между значениями ВНА у женщин 5-й и 3-й групп выявлены в опытах с адреналином в концентрациях 10-9и 10-7г/мл (р<0,01), а также 10-6 г/мл (р<0,05). Эти данные указывают на то, что добавление адреналина к крови беременных, находящихся в III триместре беременности, способствует снижению скорости агглютинации эритроцитов по сравнению с таковой у беременных I триместра.

Показано, что у женщин в латентную фазу первого периода родов (6-я группа) присутствие адреналина во всех концентрациях (10-10-10-6 г/мл) статистически значимо снижало ВНА эритроцитов. Значения ВНА в 6-й группе статистически значимо отличались от таковых 1-й группы при добавлении адреналина в концентрации 10-10 г/мл (р<0,05) и при добавлении всех концентраций адреналина (т.е. 10-10-10-6 г/мл) - от показателей 2, 3, 4 и 5-й групп (р<0,01). Эти данные позволяют заключить, что в латентную фазу первого периода срочных родов восстанавливается способность адреналина повышать скорость агглютинации эритроцитов.

Обсуждение

Нами впервые показано, что фоновая скорость агглютинации эритроцитов у женщин не меняется на протяжении менструального цикла и при беременности, но возрастает (в сравнении с небеременными) в родах. Это мы объясняем известным из публикаций [14] ростом концентрации фибриногена в родах, так как, согласно данным Н.В. Корнеевой [6], фибриноген увеличивает вероятность межэритроцитарного взаимодействия и тем самым скорость агглютинации.

Мы подтвердили ранее полученные нами данные [4, 13] о том, что адреналин способен повышать скорость агглютинации эритроцитов. В частности, это выявлено в отношении эритроцитов женщин, находящихся в фолликулярной фазе цикла, и рожениц. В то же время впервые выявили, что эта способность зависит от гормонального статуса - адреналин не способствует повышению скорости агглютинации эритроцитов женщин, находящихся в лютеиновой фазе менструального цикла и в I триместре беременности. Более того, нами показано, что адреналин приобретает способность снижать скорость агглютинации эритроцитов женщин, находящихся во II и III триместрах беременности, а в родах адреналин вновь восстанавливает способность повышать скорость агглютинации эритроцитов.

Ранее нами в опытах с эритроцитами мужчин было показано, что адреналин повышает скорость их агглютинации [13]. Результаты этих опытов, в которых использовались неселективный блокатор α-АР ницерголин, селективный блокатор альфа2-АР йохимбин, неселективный блокатор β-АР пропранолол и селективный блокатор бета1-АР атенолол, позволили утверждать, что повышение скорости агглютинации эритроцитов под действием адреналина связано с активацией α1-АР. При этом активация α2- и β1-АР не влияет на эту способность, а активация β2-АР препятствует ее проявлению. Полагаем, что полученные в этих опытах сведения о роли соответствующих АР в изменении скорости агглютинации под влиянием адреналина применимы для объяснения изменений адренореактивности эритроцитов у небеременных, беременных и рожениц. В частности, мы считаем, что выявленные нами изменения обусловлены изменением под влиянием прогестерона и эстрогенов числа α1- и β2-АР и эффективности их активации. Наиболее вероятно, что у женщин в фолликулярную фазу цикла, как и у мужчин, в эритроцитах число α1-АР и эффективность их активации выше, чем число и эффективность активации β-АР. Поэтому адреналин повышает скорость агглютинации эритроцитов у этих женщин. В лютеиновую фазу цикла и при беременности (особенно во II и III триместрах) под влиянием прогестерона снижается число и эффективность активации α1-АР и возрастает число и эффективность активации β2-АР. Поэтому адреналин утрачивает способность повышать скорость агглютинации (в лютеиновую фазу и в I триместре беременности) и даже приобретает способность снижать ее (во II и III триместрах). В родах вследствие прекращения влияния прогестерона на клетки организма, в том числе на эритроциты, вновь возрастают число и эффективность активации α1-АР и снижаются число и эффективность активации β2-АР. Все это приводит к тому, что адреналин вновь приобретает способность повышать скорость агглютинации эритроцитов.

В литературе имеются данные о том, что при беременности возрастает содержание ЭСБАР [11] и это связано, как полагают О.В. Колчанова и В.И. Циркин [5], с влиянием прогестерона. Это означает, что ЭСБАР повышает эффективность активации β-АР миоцитов матки и других клеток, в том числе и эритроцитов. Очевидно, что, как и предполагали А.В. Крысова и соавт. [7], ЭСБАР встраивается в мембрану эритроцитов и тем самым повышает эффективность активации их β2-АР. Полагаем, что по этой причине адреналин утрачивает способность повышать скорость агглютинации эритроцитов. Известно также [10], что прогестерон повышает экспрессию гена β-АР в миометрии и тем самым увеличивает число этих рецепторов. Очевидно, что подобная ситуация наблюдается и в костном мозге в отношении β-АР эритроцитов. Поэтому, как мы полагаем, по мере прогрессирования беременности в крови увеличивается процент эритроцитов с высоким содержанием β-АР. Этот процент, вероятно, достигает максимума в III триместре беременности, что проявляется в способности адреналина снижать скорость агглютинации эритроцитов в этот период. Перед родами, когда снижается чувствительность тканей к прогестерону и возрастает чувствительность к эстрогенам, в миометрии и, вероятно, в эритроцитах возрастает число α-АР. В этот период, как показано Е.О. Самоделкиной и соавт. [9], возрастает содержание эндогенного сенсибилизатора α-АР (ЭСААР), что увеличивает эффективность активации α1-АР в миоцитах матки и в других клетках организма, включая эритроциты. Все это приводит к восстановлению способности адреналина повышать скорость агглютинации эритроцитов.

Наши данные об изменении адренореактивности эритроцитов при беременности коррелируют с данными об изменении эффективности активации АР миометрия женщин, которые мы получили ранее. Эти данные установлены в экспериментах с изолированным миометрием женщин. В частности, в них было показано, что адреналин повышает сократительную активность миометрия небеременных женщин (за счет активации α-АР), снижает ее у беременных женщин (за счет активации β2-АР) и вновь повышает ее у рожениц (за счет активации α-АР). Это подтверждает наше представление о том, что характер изменения адренореактивности эритроцитов при беременности и в родах в определенной степени отражает изменение содержания и эффективности активации β-АР и α-АР в миометрии женщин и не противоречит представлению о том, что такая способность эритроцитов зависит от наличия в крови ЭСБАР, ЭСААР и других эндогенных модуляторов адренореактивности. Поэтому полагаем, что оценка α1- и β2-адренореактивности эритроцитов женщин, определяемая по изменению времени агглютинации эритроцитов в присутствии адреналина, может использоваться для определения состояния β-АРИМ. Отметим, что предлагаемая нами методика оценки адренореактивности эритроцитов не позволяет обследовать женщин с группой крови 0, так как в их эритроцитах отсутствуют агглютиногены А и В. Возможно, что использование определенного фитогемагглютинина вместо изогемагглютинирующей сыворотки анти-(А+В) или цоликлона анти-(А+В) позволит в будущем снять это ограничение для использования данной методики в клинике.

Выводы

1. Скорость фоновой агглютинации эритроцитов женщин, судя по времени начала их агглютинации в изогемагглютинирующей сыворотке на фоне раствора Кребса, не меняется на протяжении менструального цикла и при физиологически протекающей беременности, но возрастает (по сравнению с таковой у небеременных) в родах.

2. Способность адреналина изменять скорость агглютинации эритроцитов зависит от этапа репродуктивного процесса, т.е. от гормонального фона. Так, добавление адреналина в опыте повышает скорость агглютинации эритроцитов у женщин, находящихся в фолликулярной фазе менструального цикла, не изменяет ее у женщин в лютеиновой фазе цикла и у женщин в I триместре беременности, снижает у женщин во II и III триместрах беременности и вновь повышает ее у рожениц.

3. Способность адреналина повышать скорость агглютинации эритроцитов объясняется доминированием эффективности активации α1-АР, что характерно для женщин, находящихся в фолликулярной фазе цикла, и для рожениц. Утрата этой способности или ее инверсия обусловлены доминированием эффективности активации β2-АР у женщин, находящихся в лютеиновой фазе цикла, и у женщин во время беременности.

4. Оценка адренореактивности эритроцитов женщин, определяемая по изменению времени их агглютинации в присутствии адреналина, может использоваться для определения состояния β-адренорецепторного ингибирующего механизма (β-АРИМ).

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо с ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail