Нодулярная лимфома Ходжкина с лимфоцитарным преобладанием (НЛХЛП) развивается из активных герминативных центров и характеризуется нодулярным, диффузно-нодулярным или диффузным паттерном роста [1—3]. Неопластическим субстратом для НЛХЛП являются клетки лимфоцитарного преобладания, или LP-клетки, которые имеют вариабельный морфологический вид и располагаются среди полиморфно-клеточного инфильтрата, представленного мелкими лимфоцитами, гистиоцитами, эпителиоидными клетками в различном соотношении.

Для НЛХЛП характерным является широкий морфологический спектр проявлений как на светооптическом уровне при окраске гематоксилином и эозином, так и при проведении иммуногистохимического (ИГХ) исследования, что обусловливает большой процент диагностических ошибок [4]. На основании вариабельной гистологической картины Z. Fan и соавт. выделили 6 иммуноархитектурных паттернов, которые в 2017 г. вошли в классификацию ВОЗ [5, 6].

В отличие от неопластических клеток при классической лимфоме Ходжкина (КЛХ) для LP-клеток характерным является сохранный B-клеточный иммунофенотип с экспрессией клетками CD20, CD79a, BOB-1, OCT2 при отсутствии экспрессии CD30, CD15 [7, 8]. Несмотря на то что LP-клетки происходят из активных герминативных центров, что подтверждают экспрессия BCL6 и обнаруженная соматическая гипермутация в вариабельной части тяжелой цепи иммуноглобулина [1, 3], была установлена экспрессия клетками IgD-маркера, который характерен для наивных B-лимфоцитов зоны мантии. Проведение ИГХ-исследования с анти-IgD обычно не входит в рутинную практику при установлении диагноза НЛХЛП. До недавнего времени выполнено небольшое количество работ, изучающих частоту экспрессии IgD LP-клетками. При этом в единичных работах зарубежных авторов [9—11] была рассмотрена частота ассоциации экспрессии IgD с типами паттернов, однако исследований, проведенных на территории РФ, нет.

Таким образом, цель настоящей работы — определение частоты встречаемости IgD-позитивных случаев при НЛХЛП у детей с последующей оценкой частоты ассоциации с типами иммуноархитектурных паттернов.

Материал и методы

За период с 2014 по 2021 г. диагноз НЛХЛП в патолого-анатомическом отделении ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Д. Рогачева» был установлен в 77 случаях среди детей в возрасте от 2 до 18 лет. Ретроспективная оценка экспрессии LP-клетками IgD стала возможна в 52 (67,5%) случаях. Позитивный статус устанавливался при обнаружении мембранной экспрессии LP-клетками вне зависимости от количества позитивных клеток и интенсивности экспрессии. При обнаружении отрицательной реакции среди всех клеток неопластического субстрата определялся негативный статус.

Все случаи были пересмотрены с целью установления одного из шести иммуноархитектурных паттернов в соответствии с классификацией Z. Fan [5], которые в последующем были разделены на две группы: типичные (A, B) и атипичные паттерны, или варианты (C, D, E, F). Оценка типа иммуноархитектурного паттерна проводилась при ИГХ-исследовании с анти-CD20, OCT2. При распределении на группы учитывались не только основной, преобладающий паттерн, но и минорная фракция. В случае наличия нескольких фрагментов лимфатического узла оценка проводилась во всех доступных исследованию срезах. При выявлении минорной фракции атипичного паттерна в составе типичного, случай относился в группу атипичных паттернов.

Статистика

В работе был использован точный критерий Фишера для оценки экспрессии IgD в группах типичных и атипичных паттернов.

Результаты

Проведение ИГХ-исследования с анти-IgD было выполнено в 52 случаях НЛХЛП. При оценке иммуноархитектурных паттернов типичный паттерн был установлен в 23 случаях, атипичный — в 29 (таблица). В 3 из 23 случаев с типичным вариантом A было установлено парциальное синхронное поражение лимфатического узла субстратом НЛХЛП с прогрессивной трансформацией герминативных центров (ПТГЦ).

Распределение иммуноархитектурных паттернов при IgD-позитивных и негативных случаях НЛХЛП

Примечание. * — данные случаи отнесены к группе атипичных паттернов, см. раздел «Материал и методы»; ** — м.ф. — минорная фракция, C/A — 3, C/D — 1, C/E — 2, C/F — 4.

Из 52 случаев НЛХЛП в 26 (50%) была выявлена позитивная экспрессия LP-клетками IgD (рис. 1). Среди них в 3 случаях отмечалась слабая мембранная экспрессия отдельными неопластическими клетками (типичный паттерн — 1, атипичный — 2). В остальных случаях была установлена яркая мембранная экспрессия, интенсивность которой превышала интенсивность экспрессии мелкими реактивными B-лимфоцитами микроокружения (рис. 2 и 3).

Рис. 1. Экспрессия LP-клетками IgD в зависимости от типа иммуноархитектурного паттерна.

Рис. 2. Особенности экспрессии LP-клетками IgD при типичных паттернах (паттерн А).

а, б — среди мелких IgD-позитивных B-лимфоцитов зоны мантии определяются IgD-негативные LP-клетки, вокруг которых просматриваются плотно расположенные IgD-негативные фолликулярные T-хелперы с формированием розеточных структур. В одном наблюдении (вставка) отмечена крайне слабая экспрессия IgD отдельными клетками; в, г — внутри нодулярных структур, представленных IgD-позитивными B-лимфоцитами зоны мантии, располагаются крупные IgD-позитивные LP-клетки.

ИГХ-исследование с анти-IgD, а — ×40, б, г — ×600, в — ×80.

Рис. 3. Особенности экспрессии LP-клетками IgD при атипичных паттернах.

а, б — паттерн C: нодули сформированы IgD-позитивными B-лимфоцитами, за пределами нодулей определяются IgD-позитивные LP-клетки; в, г — паттерн E: определяются дискретно расположенные IgD-позитивные LP-клетки, IgD-позитивные мелкие B-лимфоциты единичные.

ИГХ-исследование с анти-IgD. а, в — ×80, б, г — ×600.

В группе типичных паттернов позитивный статус был установлен лишь в 5 (21,7%) случаях из 23. При этом IgD-позитивные или негативные LP-клетки располагались внутри крупных нодулярного вида структур, состоящих преимущественно из мелких реактивных IgD-позитивных B-лимфоцитов зоны мантии. Вокруг LP-клеток определялись IgD-негативные мелкие лимфоциты — фолликулярные T-хелперы, характерной чертой которых является формирование розеточных структур вокруг опухолевых клеток при НЛХЛП. В 1 из 5 случаев была выявлена слабая экспрессия отдельными клетками (см. рис. 2).

В 3 случаях с парциальным поражением лимфатического узла, ассоциированным с синхронным развитием ПТГЦ, была установлена негативная реакция.

Значительно чаще экспрессия IgD LP-клетками наблюдалась в случаях с атипичными паттернами, которая была выявлена в 21 (72,4%) из 29 случаев. В 19 случаях определена яркая распространенная экспрессия, в 2 — слабая в части клеток. Чаще остальных в структуре иммуноархитектурных паттернов (см. таблицу) встречались паттерн C (n=6) и его различные сочетания (n=10), которые характеризовались относительной сохранностью нодулярных структур, представленных реактивными IgD-позитивными B-лимфоцитами. Однако в отличие от типичных паттернов отмечалось экстранодулярное расположение крупных LP-клеток. Значительно реже в структуре были представлены паттерны F, E и различные их сочетания (n=5).

При сравнении показателей с использованием точного критерия Фишера были получены статистически значимые различия: p=0,0003 (типичный паттерн — 5/23, 21,7% против атипичного — 21/29, 72,4%).

Обсуждение

Была рассмотрена экспрессия LP-клетками IgD при НЛХЛП в зависимости от типа иммуноархитектурного паттерна.

В настоящей работе частота экспрессии IgD при НЛХЛП составила 50% (n=26/52: типичный — 5/23, 21,7% против атипичного — 21/29, 72,4%). Частота IgD-позитивных случаев НЛХЛП сильно варьирует в исследованиях других авторов. S. Prakash и соавт. [9] обследовали пациентов с НЛХЛП различного возраста (от 7 лет до 81 года, медиана 38 лет), частота экспрессии составила 27% (n=48/180: типичный паттерн — 5/48, 10,4% против атипичного — 43/48, 89,6%). При этом показано, что IgD-позитивные случаи чаще встречались у лиц молодого возраста. Медиана возраста в группе пациентов с позитивным статусом составила 21 год, с негативным — 44 года. Еще в одной работе [12], выполненной среди взрослых, частота встречаемости IgD-позитивных случаев НЛХЛП составила 16,3% (n=8/49: типичный паттерн — 1 против атипичного — 7). Также в представленной работе был отмечен более молодой возраст пациентов в IgD-позитивной группе (IgD+ медиана — 29,6 года против IgD-медианы — 40,3 года). В двух работах при обследовании детей и лиц молодого возраста были получены более высокие показатели частоты встречаемости IgD-позитивных случаев НЛХЛП. Одна из работ была выполнена среди 130 пациентов в возрасте до 22 лет. Частота выявления экспрессии IgD составила 50% (n=65/130) [10]. Еще в одной работе [11] с участием детей в возрасте до 18 лет экспрессия IgD была выявлена несколько чаще и составила 63,4% (n=26/41: типичный паттерн — 15/28, 54% против атипичного — 11/13, 85%). Суммируя результаты представленных четырех работ и настоящего исследования, можно сделать вывод о тенденции к более частому выявлению IgD-позитивных случаев НЛХЛП среди лиц детского возраста, что объясняет низкие показатели частоты экспрессии LP-клетками IgD в двух исследованиях, выполненных среди взрослых.

Как и в настоящем исследовании, в работах зарубежных авторов [9—12] была отмечена стойкая ассоциация экспрессии IgD с атипичными паттернами, при этом чаще других встречался паттерн C, что, вероятно, связано в целом с более высокой встречаемостью паттерна C среди атипичных вариантов.

Экспрессия IgD неопластическими клетками при НЛХЛП может служить потенциальным дифференциально-диагностическим маркером. Атипичные паттерны при НЛХЛП, в частности паттерны E, F с выраженной деплецией числа реактивных B-лимфоцитов, имеют явное морфологическое сходство с богатой T-лимфоцитами/гистиоцитами крупноклеточной B-клеточной лимфомой (богатая T-лимфоцитами/гистиоцитами КБКЛ), что затрудняет категоризацию диагноза. В настоящей работе была выявлена стойкая взаимосвязь экспрессии IgD LP-клетками с атипичными паттернами, позитивный статус был установлен в 21 (72,4%) из 29 случаев. В одной из работ ИГХ-исследование с анти-IgD было выполнено у 20 пациентов с богатой T-лимфоцитами/гистиоцитами КБКЛ, среди которых позитивная реакция установлена лишь в одном наблюдении [9]. Для КЛХ экспрессия Ig на поверхности мембраны клеток Ходжкина и Рид—Штернберга является нехарактерной [13], в связи с чем экспрессия IgD LP-клетками может в части случаев служить дифференциально-диагностическим маркером.

Заключение

В настоящей работе выявлена высокая частота (50%) экспрессии LP-клетками IgD при НЛХЛП. В связи с чем ИГХ-исследование с анти-IgD может использоваться в рутинной практике при проведении дифференциальной диагностики с другими нозологическими формами, такими как КЛХ и богатая T-лимфоцитами/гистиоцитами КБКЛ и служить одним из дифференциально-диагностических маркеров.

Установлена стойкая ассоциация экспрессии LP-клетками IgD с атипичными вариантами иммуноархитектурных паттернов, что, вероятно, может обусловливать различную биологию неопластических клеток внутри одной нозологической формы.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования — М.А. Сенченко, Д.М. Коновалов

Сбор и обработка материала — М.А. Сенченко

Статистическая обработка — М.А. Сенченко

Написание текста — М.А. Сенченко

Редактирование — Д.М. Коновалов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.