Особенности T-клеточного иммунитета у пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом различной степени тяжести

Герпесвирусные инфекции являются одной из актуальных проблем здравоохранения в современном мире ввиду повсеместной распространенности и способности к пожизненной персистенции в организме человека. Генитальный герпес в большинстве случаев (80%) вызывается вирусом простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2), однако регистрируется достоверный рост этиологической значимости ВПГ-1 в развитии данной патологии, особенно у женщин репродуктивного возраста [1, 2].

По экспертным оценкам, в возрастной группе от 15 до 49 лет генитальный герпес (ВПГ-2 и ВПГ-1) диагностирован почти у 500 млн (13,2%) человек, из которых 313,5 млн составили женщины и 178,0 млн — мужчины [3]. В Российской Федерации обязательная регистрация генитального герпеса установлена в 1993 г. Согласно официальной статистике, с момента введения обязательной регистрации отмечается устойчивый медленный рост показателей заболеваемости. С 2021 г. распространенность выросла с 8,7 случая на 100 тыс. населения до 19,6 случая на 100 тыс. человек к 2024 г. [4, 5]. Однако объективная оценка истинной распространенности генитального герпеса на основе данных обращаемости и клинических проявлений существенно затруднена. Текущая эпидемиологическая ситуация остается неустойчивой вследствие превалирования скрытых, малосимптомных и атипичных форм [6], а также большого количества неверифицированных эпизодов заболевания. Данный фактор осложняет своевременную диагностику и одновременно создает иллюзию благоприятной эпидемический обстановки, в то время как латентное носительство вируса не отменяет факт распространения вируса среди населения.

Стратегическая важность проблемы генитального герпеса обусловлена поражением лиц преимущественно репродуктивного возраста, что влечет за собой глубокий психосоциальный дискомфорт и существенное снижение качества сексуальной и социальной жизни [7].

Показано, что взаимодействие ВПГ и организма хозяина строится на динамическом балансе между вирусной активностью и эффективностью T-клеточного надзора [8—10]. После первичного инфицирования именно клеточное звено иммунитета становится критическим фактором, ограничивающим репликацию вируса. Как известно, T-клетки выступают в роли основных эффекторов, поддерживающих репрессию вирусного генома в нейронах и обеспечивающих быстрый ответ при миграции вируса на слизистые оболочки, а также определяя характер течения, частоту и интенсивность рецидивов герпесвирусной инфекции [8]. Клиническая практика подтверждает, что определяющее значение для контроля над инфекцией имеет клеточный, а не гуморальный иммунитет [8, 9, 11]. Таким образом, клинический фенотип заболевания — от бессимптомного до часто рецидивирующего течения — напрямую обусловлен функциональной состоятельностью T-клеточного звена иммунной системы. Это определяет необходимость детального анализа субпопуляционного состава лимфоцитов в качестве основного прогностического критерия тяжести течения генитального герпеса.

Цель исследования — провести комплексный анализ субпопуляций T-лимфоцитов и нейтрофильно-лимфоцитарного индекса периферической крови у пациенток с разной степенью тяжести рецидивирующего генитального герпеса.

Проведено поперечное одноцентровое исследование у пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом. Исследование проведено на базе ООО «Профессорская клиника Юцковских» Владивостока в период с 2022 по 2025 г. В исследование включены 56 пациенток в возрасте от 26 до 68 лет с диагнозом A60 «Аногенитальная герпетическая вирусная инфекция». С учетом клинических рекомендаций «Аногенитальная герпетическая вирусная инфекция» (2024) пациентки распределены на три группы в зависимости от тяжести течения. В группу I с легкой формой инфекции (1—2 рецидива в год) вошли 11 (19,6%) пациенток, в группу II со среднетяжелой формой (3—5 рецидивов в год) — 24 (42,9%), в группу III с тяжелой формой (6 рецидивов в год и более) — 21 (37,5%).

Проведено лабораторное исследование, включавшее анализ адаптивного клеточного иммунитета: содержание зрелых T-лимфоцитов (CD3+CD19−), T-хелперов (CD3+CD4+) и цитотоксических T-лимфоцитов (CD3+CD8+) определено методом проточной цитофлуориметрии. Выражали в относительных (%) и абсолютных (×10⁹/л) величинах. Рассчитывали коэффициент иммунорегуляции (CD3+CD4+/CD3+CD8+). Значение индекса <1,2 интерпретировалось как признак дисбаланса в клеточном звене и показатель степени истощения T-клеточного иммунного ответа. Нейтрофильно-лимфоцитарный индекс (НЛИ) определяли на основании абсолютных значений количества нейтрофилов (Н; ×10⁹/л) и лимфоцитов (Л; ×10⁹/л), по формуле: НЛИ=Н/Л. Для верификации отклонений в исследовании использован общепринятый референсный диапазон 1,7—1,9.

После получения результатов обследования все исследуемые параметры внесены в электронную таблицу, а также сформирована база данных. Статистический анализ проводили с использованием программы StatTech 4.14.3 (ООО «Статтех», Россия). Для проверки распределения использовали критерии Шапиро—Уилка. Сравнение групп по количественному показателю, распределение которого отличалось от нормального, выполнялось с помощью критерия Краскела—Уоллиса, апостериорные сравнения — с использованием критерия Данна с поправкой Холма. Параметрические показатели анализировали с помощью F-критерия Фишера. Количественные данные с нормальным распределением описывали с применением среднего арифметического (M) и стандартного отклонения (SD). В качестве меры репрезентативности указывали границы 95% доверительного интервала (ДИ). В случае отсутствия нормального распределения применяли медиану (Me), нижний и верхний квартили (Q1—Q3). Корреляционные связи оценивали с помощью коэффициента корреляции Пирсона (R). Тесноту связи определяли по шкале Чеддока. Различия считали статистически значимыми при p<0,05.

Оценка показателей адаптивного иммунитета у пациенток с аногенитальной герпетической вирусной инфекцией, разделенных на группы в зависимости от степени тяжести течения, представлена в табл. 1.

Таблица 1. Результаты определения показателей CD3+CD19–, CD3+CD4+, CD3+CD8+, иммунорегуляторного индекса (CD4+/CD8+) и нейтрофильно-лимфоцитарного индекса

Примечание. CD3+CD19− — T-лимфоциты; CD3+CD4+ — T-хелперы; CD3+CD8+ — цитотоксические T-лимфоциты; ИРИ — иммунорегуляторный индекс; НЛИ — нейтрофильно-лимфоцитарный индекс.

Нейтрофильно-лимфоцитарный индекс рассматривается как интегральный маркер клеточной реактивности, отражающий динамическое равновесие между эффекторами неспецифической (нейтрофилы) и специфической (лимфоциты) защиты [4]. В ходе исследования установлено следующее распределение уровней НЛИ: снижение — у 35 (62,5%) пациенток, повышение — у 13 (23,21%), норма — у 8 (14,29%). Общая картина распределения НЛИ свидетельствует о выраженной иммунологической перестройке внутри исследуемой группы. Отклонения от нормативных значений зафиксированы у подавляющего большинства (85,71%) пациенток, что указывает на специфическую реакцию клеточного звена на патологический процесс. Из полученных данных заметно преобладание (62,5%) лиц с показателями ниже нормативного порога. С иммунологической точки зрения такая тенденция к снижению НЛИ при герпесвирусной инфекции закономерна и отражает состояние относительного лимфоцитоза, характерного для хронического вирусного процесса при отсутствии острого бактериального компонента [4]. Тот факт, что 85,71% выборки находятся вне зоны физиологической нормы, требует проведения дифференцированного анализа, чтобы определить, является ли данный сдвиг универсальным для всей выборки или ассоциирован с тяжестью определенного клинического течения.

Для оценки влияния тяжести инфекционного процесса на выраженность иммунного ответа был проведен сравнительный анализ НЛИ в трех клинических группах, результаты представлены в табл. 2. Анализ данных демонстрирует отсутствие статистически значимых различий между группами (p=0,669), что свидетельствует об отсутствии связи дисбаланса этих клеток с тяжестью процесса. Однако важно, что 95% ДИ для всех трех групп имеют общую зону пересечения, что математически подтверждает гомогенность выборки по данному признаку. Средние значения во всех группах (1,43; 1,59; 1,48) стабильно находятся ниже нижней границы нормы (1,7). Данный факт подтверждает устойчивость патологического процесса и свидетельствует о том, что системные изменения иммунного статуса носят стабильный характер вне зависимости от клинической тяжести течения рецидивирующего генитального герпеса.

Таблица 2.Статистический анализ нейтрофильно-лимфоцитарного индекса в зависимости от группы

T-лимфоциты (CD3+CD19−) служат ключевыми интегральными показателями функционального состояния T-клеточного иммунитета. При персистирующей вирусной инфекции динамика данного показателя отражает интенсивность мобилизации адаптивного звена защиты [9]. Согласно полученным данным, анализ общей популяции T-лимфоцитов показал четкую градацию интенсивности иммунного ответа. Проведенный статистический анализ подтвердил системный характер изменений в T-клеточном звене, результаты представлены в табл. 3. Зафиксирована высокая степень статистической значимости различий между группами: p=0,022 (·10⁹/л) и, соответственно, p<0,001 (%). Пациенты I группы характеризуются наиболее низкими значениями, тогда как у пациентов III группы выявлены максимальные значения показателей (p_III—I=0,041 и p_III—I<0,001 соответственно). Это свидетельствует о компенсаторных механизмах активации T-клеточного иммунитета при утяжелении тяжести рецидивирующего генитального герпеса у пациенток, включенных в исследование.

Таблица 3. Статистический анализ содержания T-лимфоцитов в зависимости от группы

Примечание. * — различия показателей статистически значимы (p<0,05).

В клинической иммунологии мониторинг субпопуляций T-клеточного звена выступает фундаментальным инструментом оценки адекватности противовирусного ответа. При рецидивирующем генитальном герпесе T-хелперы (CD3+CD4+) и цитотоксические T-лимфоциты (CD3+CD8+) определяют характер иммунной защиты, отвечая за координацию клеточного взаимодействия и непосредственную элиминацию инфицированных вирусом клеток [2, 8, 11]. Понимание количественных и качественных трансформаций этих популяций позволяет не только оценить текущий иммунный статус, но и прогнозировать риски прогрессирования заболевания.

При статистическом анализе содержания T-хелперов прослеживается линейная тенденция к росту уровня CD3+CD4+ по мере нарастания тяжести рецидивирующего генитального герпеса (табл. 4). Следует отметить, что статистически значимые различия не обнаружены (p=0,079; p=0,092), но наблюдаемая тенденция к увеличению показателя по мере утяжеления степени тяжести рецидивирующего генитального герпеса указывает на системную активацию T-хелперного звена. Отсутствие статистической значимости, вероятнее всего, связано с объемом выборки, однако с клинической точки зрения это свидетельствует о повышении функциональной активности иммунной системы, пытающейся компенсировать реактивацию вируса герпеса при тяжелом течении. Дополнительно при анализе уровня цитотоксических T-лимфоцитов не выявлено статистически значимых различий (p=0,444; p=0,634), результаты представлены в табл. 4. Динамика CD3+CD8+ демонстрирует ту же направленность, что и у T-хелперов — постепенный рост при утяжелении течения. Тем не менее данная популяция характеризуется более высокой стабильностью.

Таблица 4. Статистический анализ T-хелперов и цитотоксических T-лимфоцитов в зависимости от группы

В клинической иммунологии соотношение основных субпопуляций T-лимфоцитов, выражаемое посредством иммунорегуляторного индекса (ИРИ), рассматривается как фундаментальный индикатор функционального состояния адаптивного иммунитета [8, 9]. При ведении пациентов с герпесвирусными инфекциями мониторинг этого показателя приобретает большое значение, позволяя верифицировать адекватность T-клеточного ответа на вирусную нагрузку и сбалансированность T-хелперной и цитотоксической активности [10, 12]. Изменение параметров ИРИ указывает на дисбаланс (снижение уровня <1,2) в клеточном звене иммунитета и степень истощения T-клеточного иммунного ответа. Дисбаланс ИРИ напрямую коррелирует с увеличением частоты клинических манифестаций вируса, что делает его ценным диагностическим показателем при ведении пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом: чем ниже показатель, тем выше вероятность персистенции вируса и частота рецидивов. Таким образом, удержание ИРИ в физиологических границах является необходимым условием для эффективного контроля над репликацией вируса, что обусловливает необходимость его регулярного мониторинга.

Статистический анализ демонстрирует отсутствие различий в уровне ИРИ между исследуемыми группами (p=0,901), результаты представлены в табл. 5. С клинической точки зрения такая стабильность свидетельствует о гармоничном характере иммунологической реорганизации. Несмотря на увеличение общего T-клеточного пула, иммунная система сохраняет регуляторное равновесие. При этом предварительно, перед проведением статистического анализа, выполнен детальный анализ индивидуальных показателей ИРИ, при котором выявлено снижение у 6 (10,71%) пациенток II группы, к тому же у 3 (5,36%) женщин III группы показатель находился на нижней границе нормы (1,2). Снижение уровня ИРИ у некоторых пациенток свидетельствует, скорее всего, в пользу активации компенсаторных механизмов адаптивного T-клеточного иммунитета.

Таблица 5. Статистический анализ иммунорегуляторного индекса (CD4+/CD8+) в зависимости от группы

Несмотря на межгрупповую стабильность ряда показателей, детальное изучение адаптивных механизмов обусловливает необходимость оценки их взаимного влияния. Проведение корреляционного анализа позволило выявить наиболее показательные критерии структурных изменений в T-клеточном звене адаптивного иммунитета, которые определяют характер иммунного ответа.

В ходе анализа НЛИ получены результаты, представленные в табл. 6: выявлена обратная связь заметной тесноты с CD3+CD19− (R=−0,500; p<0,001) и CD3+CD8+ (R=−0,510; p<0,001); при этом отмечена обратная связь умеренной тесноты с CD3+CD4+ (R=−0,312; p<0,019) и CD3−CD16+CD56+ (R=−0,338; p<0,011), а с ИРИ — прямая связь умеренной тесноты (R=0,315; p<0,018). Это подтверждает, что снижение уровня НЛИ у пациенток, включенных в исследование, происходит закономерно за счет активации T-клеточного звена.

Таблица 6. Корреляционный анализ взаимосвязи нейтрофильно-лимфоцитарного индекса у пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом

Примечание. * — различия показателей статистически значимы (p<0,05). НЛИ — нейтрофильно-лимфоцитарный индекс; CD3−CD16+CD56+ — естественные киллеры (NK-клетки).

Согласно результатам корреляционного анализа содержания T-лимфоцитов (табл. 7), выявлена прямая связь высокой тесноты между общей популяцией T-лимфоцитов и основными субпопуляциями — CD3+CD4+ (R=0,858; p<0,001) и CD3+CD8+ (R=0,822; p<0,001). Это свидетельствует о структурной обусловленности адаптивного ответа: расширение пула T-лимфоцитов происходит сбалансированно за счет данных показателей.

Таблица 7. Корреляционный анализ взаимосвязи общей популяции T-лимфоцитов (·109/л) у пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом

Примечание. * — различия показателей статистически значимы (p<0,05). ИРИ — иммунорегуляторный индекс.

При анализе содержания T-хелперов (табл. 8) установлена прямая связь умеренной тесноты с CD3+CD8+ (R=0,382; p=0,004), что демонстрирует функциональную синергию: количественное увеличение T-хелперов сопровождается ростом содержания цитотоксических T-лимфоцитов, необходимых для элиминации вируса. Наряду с этим выявлена прямая связь умеренной тесноты с ИРИ (R=0,303; p=0,023), что подтверждает вклад T-хелперов в поддержание гомеостаза. Кроме того, выявлена обратная корреляционная связь слабой тесноты с NK-клетками (R=−0,118; p=0,038), что отражает разнонаправленность путей активации.

Таблица 8. Корреляционный анализ взаимосвязи T-хелперов (·109/л) у пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом

Примечание. * — различия показателей статистически значимы (p<0,05). ИРИ — иммунорегуляторный индекс.

Анализ цитотоксических T-лимфоцитов выявляет иной характер взаимодействий, представленных в табл. 9: отмечена обратная связь заметной тесноты с ИРИ (R=−0,599; p<0,001). Это наиболее значимая взаимосвязь: высокая статистическая значимость подтверждает тот факт, что снижение ИРИ у некоторых пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом происходит за счет роста именно цитотоксических T-лимфоцитов, тем самым делая именно эту корреляционную связь наиболее показательным критерием структурных изменений в T-клеточном звене. Таким образом, мониторинг ИРИ и анализ его связи с уровнем CD3+CD8+ позволяют не только оценить текущую адекватность противовирусной защиты, но и своевременно прогнозировать вероятность персистенции вируса и тяжести течения рецидивирующего генитального герпеса. Помимо этого, установлена связь слабой тесноты с NK-клетками (R=0,128; p=0,046), отражающая синергичность между различными типами иммунного ответа.

Таблица 9. Корреляционный анализ взаимосвязи цитотоксических T-лимфоцитов (·109/л) у пациенток с рецидивирующим генитальным герпесом

Примечание. * — различия показателей статистически значимы (p<0,05). ИРИ — иммунорегуляторный индекс.

Данное исследование позволило определить закономерность между нарастанием частоты рецидивов у пациенток с герпесвирусной инфекцией и активацией T-клеточного звена адаптивного иммунитета, которая проявляется статистически значимым увеличением общего пула T-лимфоцитов (CD3+CD19−), p=0,022; p<0,001, что выступает в качестве ключевого компенсаторного механизма, направленного на подавление вирусной персистенции. При этом вне зависимости от степени тяжести течения рецидивирующего генитального герпеса зафиксировано снижение нейтрофильно-лимфоцитарного индекса у 62,5% пациенток, что свидетельствует о лимфоцитозе, характерном для вирусной персистенции. Средние значения нейтрофильно-лимфоцитарного индекса (1,43—1,59) во всех группах стабильно находились ниже нормативного порога. Отсутствие статистически значимых различий (p=0,669) свидетельствует о том, что системная перестройка иммунитета носит устойчивый характер и не зависит от частоты рецидивов. Данный факт подтверждается обратными корреляционными связями заметной тесноты с общим пулом T-лимфоцитов (R=−0,500; p<0,001) и цитотоксических T-клеток (R=−0,510; p<0,001), а также умеренной тесноты с T-хелперами (R=−0,312; p=0,019).

Наиболее чувствительным критерием структурных изменений в T-клеточном звене является иммунорегуляторный индекс. Его индивидуальное снижение до нижней границы нормы или ниже (≤1,2) выявлено у 10,71% пациенток со среднетяжелым и у 5,36% — с тяжелым течением, что обусловлено ростом цитотоксических T-лимфоцитов (R=−0,599; p<0,001). Данная динамика свидетельствует о напряженности компенсаторных механизмов и функциональном истощении T-клеточного звена.

Проведенное исследование доказывает, что клинический фенотип и тяжесть течения рецидивирующего генитального герпеса определяются функциональным состоянием T-клеточного иммунитета. Таким образом, комплексный мониторинг показателей CD3+CD19−, иммунорегуляторного индекса и нейтрофильно-лимфоцитарного индекса является необходимым для объективной оценки функциональной состоятельности адаптивного иммунитета и прогнозирования рисков прогрессирования герпесвирусной инфекции, что следует учитывать при разработке персонализированных подходов к профилактике рецидивов и оценке эффективности противовирусной терапии.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования — Маркелова Е.В.

Сбор и обработка материала — Байбарина Е.В., Кузнецов А.С.

Статистический анализ данных — Цой А.П.

Написание текста — Цой А.П., Бодренкова С.В.

Редактирование — Маркелова Е.В.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

The authors declare no conflicts of interest.