Предлагаемые в настоящее время приемы светолечения весьма разнообразны и по физическим характеристикам, и по аппаратному воплощению. Многие из них нашли широкое применение [1, 2]. При этом в оценке эффективности светолечения важным критерием является микробная обсемененность раны.

Цель исследования - оценить эффективность применения коротковолнового ультрафиолетового облучения в условиях эксперимента при курсовой терапии модельной стандартизованной ожоговой раны кожи у кроликов, начиная с пролиферативной стадии заживления, влияние приемов светолечения на систему крови, микробную обсемененность раны.

В исследование были включены 24 кролика серой масти массой 3600±150 г, выращенных в специализированном виварии НИИ биофизики АнГТУ и находившихся в стандартных условиях содержания. Животные были разделены на 2 группы по 12 особей в каждой: контрольную (без лечения) и опытную (лечение с помощью аппарата БОП-4). Рану формировали унифицированным методом, температура обжигающей поверхности на выбритую кожу боковой поверхности тела составляла 800 °C, время контакта - 3 с, площадь раны - 24 см² (III-IV степень), наркоз тиопенталовый (2-4 мл 0,1% раствора внутривенно). На выполнение работ получено согласие локального этического комитета. Все работы проводились в соответствии с требованиями Минздрава России и ГОСТ [3, 4]. Лечение начинали с 5-го дня после нанесения раны (пролиферативная стадия заживления, согласно классификации ожогов) с помощью аппарата БОП-4, режим терапии представлен в табл. 1.

В целях определения скорости уменьшения ран измеряли их площадь.

Образцы тканей для морфологического исследования брали из пограничной области. Материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, проводили через спирты, заключали в парафин и воск, готовили срезы толщиной 5-7 мкм, окрашивали их гематоксилином и эозином и по методу Ван Гизона. По качественным характеристикам (степени деструкции клеток в очаге воспаления, отеку, ростовой активности эпидермиса, направлению коллагеновых волокон, наличию плазматических клеток и фибробластов) оценивали воспалительный процесс и документировали микроснимками. Снятие показателей проводилось дважды: непосредственно перед началом терапии и в конце лечения (на 10-й день). Состояние крови оценивалось по исходным данным (до нанесения раны), непосредственно перед началом терапии и в день окончания лечения. Образцы крови для установления содержания в ней гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, лимфоцитов и тромбоцитов забирались из краевой вены уха с помощью гемоанализатора. Полученную сыворотку исследовали на содержание глюкозы (глюкозооксидазным методом), мочевины (уреазным методом), общего белка (биуретовым методом), холестерина (ферментным методом), креатинина (по методу Поппера), аланинаминотрансферазы (колориметрическим методом). Одновременно осуществляли смыв физиологическим раствором с 6 см² раны для подсчета микробного числа на агаре без микробиологической дифференциации.

Полученные данные обрабатывали статистически.

Планиметрическое исследование иллюстрирует табл. 2, в которой приведены площадь раневой поверхности и доля ее сокращения в определенный срок наблюдения. Из табл. 2 видно, что спонтанное заживление проходило медленно, динамика сокращения площади раневой поверхности составила 1,84±0,02%. При лечении ультрафиолетовым светом регенерация достигла 3,21±0,04%.

У животных, леченых с применением аппарата БОП-4 (см. рисунок), эпителизация проходила равномерно. На 10-е сутки рана покрывалась плотным, тонким струпом, лейкоцитарный вал был менее выражен, представлен нейтрофилами (20%) и макрофагами. Эпидермис подрастал от края к центру с образованием гребешков и сосочков. Дно раны было заполнено грануляционной тканью. Концентрических вакуолей, отека эпидермиса и дермы не наблюдалось. В дерме коллагеновые волокна располагались рыхло, хотя прослеживалось различие между сосочковым и сетчатым слоями дермы с умеренной пролиферацией капилляров. Плазматические клетки и фибробласты располагались рассеянно. Производные кожи вблизи раны соответствовали контролю. Следовательно, благодаря выраженному антибактериальному эффекту ультрафиолетового излучения, а также его поверхностному действию, нами зафиксировано отсутствие микроабсцессов и клеточной инфильтрации.

Установление микробного числа в смывах показало, что среди животных контрольной группы оно было высоким на протяжении первых 5 дней исследования, затем снижалось (табл. 3).

Микробную обсемененность ран у животных возможно использовать как индивидуальную характеристику, соотносимую с приемом лечения. При этом тип микроорганизмов не играет роли в плане риска развития инфекции [3, 5].

Гематологический анализ выявил снижение содержания эритроцитов к 5-му дню эксперимента (~50%) как следствие ожоговой раны (табл. 4).

Изменение гематологических показателей у исследуемых животных патогенетически обусловлено стадией ожогового процесса. Характер этих признаков, как правило, не обсуждается и соотносится с неспецифической адаптацией и другими системными реакциями на обширный и глубокий ожог кожи. Указывается и на изменение базовых функций полиморфноядерных лейкоцитов преимущественно в ранний период развития острого воспаления, вызванного термическим ожогом кожи в эксперименте [6]. Так, 10-дневный курс лечения с помощью аппарата БОП-4 способствовал восстановлению показателей эритроцитов, гемоглобина и тромбоцитов в крови животных. При этом биохимический анализ выявил (см. табл. 4), что содержание общего белка в сыворотке крови животных после его повышения в результате получения ожоговой раны в процессе терапии снижалось и не отличалось от контрольных значений. Содержание глюкозы в сыворотке крови животных в первые 5 дней после нанесения раны снижалось по сравнению с контролем и исходными величинами. В дальнейшем содержание глюкозы повышалось. В первые 5 дней содержание общего холестерина и мочевины возрастало, а в процессе светолечения снижалось. Содержание креатинина в сыворотке крови через 5 дней от момента нанесения термической травмы оказалось повышенным, но в процессе лечения снизилось до контрольного уровня. Содержание аланинаминотрансферазы в сыворотке крови повышалось в течение всего периода лечения, однако это не связано с повреждением клеток печени, а индуцировано повышением уровня аланина - спутника ожогов.

Таким образом, облучение ожоговых ран ультрафиолетовым светом коротковолнового спектра является эффективным способом их лечения. Полагаем, что при ожоге формируется ответ организма на травму, что отражается в изменении биохимических показателей сыворотки крови животных. При облучении ускоряются пролиферативно-репаративные процессы, а также корригируется состояние крови. Гематологические и микробиологические показатели могут быть использованы в оценке эффективности влияния светолечения.

Конфликт интересов отсутствует.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования: Г. Ю., М.Р., И.М.

Сбор и обработка материала: В.И., Н.М., В.Б., О.С.

Статистическая обработка данных: И.М.

Написание текста: Г. Ю.

Редактирование: М.Р., Т.Ф.