
Результат 3D-культивирования клеток слезной железы человека (пилотное исследование)
Журнал: Вестник офтальмологии. 2026;142(4):19-25.
DOI: 10.17116/oftalma202614204119
Прочитано: 308 раз
Резюме
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Апробировать метод 3D-культивирования клеток слезной железы (СЖ) человека с формированием структур, позволяющих проводить последующее изучение механизмов патогенеза ее заболеваний.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Материал для проведения культурального исследования был отобран в процессе диагностической биопсии при коррекции рецидива пролапса СЖ. Морфологических изменений в ткани СЖ выявлено не было. Клетки из образца ткани выделяли путем последовательной механической и ферментативной диссоциации. Полученные клеточные популяции разделяли дифференциальной трипсинизацией. Сфероиды формировали, заключая клеточную суспензию в купол из концентрированного раствора матригеля. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью двойного окрашивания кальцеином-AM и гомодимером этидия, экспрессию специфичных маркеров (Muc5AC, Na/K-АТФаза, panCK) анализировали методом иммуноцитохимии.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Из послеоперационного материала выведено в культуру достаточное количество жизнеспособных клеток для формирования сфероидов в матригеле. Получены и охарактеризованы сфероиды из эпителиальных и фибробластоподобных клеток СЖ человека. Эпителиальные клетки экспрессируют Muc5AC и Na/K-АТФазу, фибробласты образуют характерные сетчатые структуры в матриксе.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Апробированный протокол позволяет формировать жизнеспособные сфероидные структуры, сохраняющие морфофункциональные свойства нативной ткани СЖ. Созданная in vitro модель СЖ человека может быть использована для изучения механизмов патогенеза ее заболеваний, в частности хронического неспецифического дакриоаденита.
Ключевые слова
- слезная железа
- 3D-культивирование
- сфероиды
- дакриоаденит
- Muc5AC
- Na/K-АТФаза
Дата поступления: 23.07.2025
Дата принятия в печать: 22.04.2026
Дата публикации: 18.08.2026
- Bannier-Hélaouët M, Post Y, Korving J, Trani Bustos M, Gehart H, Begthel H, Bar-Ephraim YE, van der Vaart J, Kalmann R, Imhoff SM, Clevers H. Exploring the human lacrimal gland using organoids and single-cell sequencing. Cell Stem Cell. 2021;28(7):1221-1232.e7. https://doi.org/10.1016/j.stem.2021.02.024
- Tóth-Molnár E, Ding C. New insight into lacrimal gland function: Role of the duct epithelium in tear secretion. Ocul Surf. 2020;18(4):595-603. https://doi.org/10.1016/j.jtos.2020.07.002
- Singh S, Chopra P, Necker F, Scholz M, Liphardt AM, Schuster L, Paulsen F, Bräuer L. Internal vascular anatomy of the human lacrimal gland: A protocol based on cadaver dissection and three-dimensional micro-computed tomography. Ann Anat. 2024;252:152207. https://doi.org/10.1016/j.aanat.2023
- Kuony A, Brezak M, Mège RM, Sumbalova Koledova Z. Organotypic 3D Cell Culture of the Embryonic Lacrimal Gland. Methods Mol Biol. 2024; 2764:145-156. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-3674-9_10
- Singh S, Basu S. The human lacrimal gland: Historical perspectives, current understanding, and recent advances. Curr Eye Res. 2020;45(10):1188-1198. https://doi.org/10.1080/02713683.2020.1774065
- Andrew NH, McNab AA, Selva D. Review of 268 lacrimal gland biopsies in an Australian cohort. Clin Exp Ophthalmol. 2015;43(1):5-11. https://doi.org/10.1111/ceo.12371
- Derbel A, Salah RB, Boukhzar R, Frikha F, Marzouk S, Bahloul Z. Dacryoadenitis: do not forget ANCA vasculitis. Rom J Ophthalmol. 2024;68(2): 187-190. https://doi.org/10.22336/rjo.2024.35
- Spindle J, Tang SX, Davies B, Wladis EJ, Piozzi E, Pellegrini M, Lally SE, Shields C, Shinder R. Pediatric Idiopathic Orbital Inflammation: Clinical Features of 30 Cases. Ophthalmic Plast Reconstr Surg. 2016;32(4):270-274. https://doi.org/10.1097/IOP.0000000000000494
- Jowett GM, Coales I, Neves JF. Organoids as a tool for understanding immune-mediated intestinal regeneration and development. Development. 2022; 149(8):dev199904. https://doi.org/10.1242/dev.199904
- Halliday LA, Wood JPM, Chidlow G, Casson RJ, Selva D, Sun MT. Establishing human lacrimal gland cultures from biopsy-sized tissue specimens. Eye (Lond). 2023;37(1):62-68. https://doi.org/10.1038/s41433-021-01872-9
- Shubha Tiwari, Rohini M Nair, Praseeda Vamadevan, Mohammad Javed Ali, Milind N Naik, Santosh G Honavar, Geeta K Vemuganti. Establishing and characterizing lacrispheres from human lacrimal gland for potential clinical application. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2018;256(4):717-727. https://doi.org/10.1007/s00417-018-3926-8
- Jeong SY, Choi WH, Jeon SG, Lee S, Park JM, Park M, Lee H, Lew H, Yoo J. Establishment of functional epithelial organoids from human lacrimal glands. Stem Cell Res Ther. 2021;12(1):247. https://doi.org/10.1186/s13287-021-02133-y
- Abdal Dayem A, Bin Jang S, Lim N, Yeo HC, Kwak Y, Lee SH, Shin HJ, Cho SG. Advances in lacrimal gland organoid development: Techniques and therapeutic applications. Biomed Pharmacother. 2025;183:117870. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2025.117870
- Rodboon T, Yodmuang S, Chaisuparat R, Ferreira JN. Development of high-throughput lacrimal gland organoid platforms for drug discovery in dry eye disease. SLAS Discov. 2022;27(3):151-158. https://doi.org/10.1016/j.slasd.2021.11.002
- СафоноваТ.Н., Зайцева Г.В. Клеточные технологии как основа разработки регенераторных принципов лечения заболеваний слезной железы. Вестник офтальмологии. 2024;140(2.2):158-165. https://doi.org/10.17116/oftalma2024140022158
- Lu Q, Yin H, Grant MP, Elisseeff JH. An In Vitro Model for the Ocular Surface and Tear Film System. Sci Rep. 2017;7(1):6163. https://doi.org/10.1038/s41598-017-06369-8
- Fini ME, Jeong S, Gong H, Martinez-Carrasco R, Laver NMV, Hijikata M, Keicho N, Argüeso P. Prog Retin Membrane-Associated Mucins of the Ocular Surface: New Genes, New Protein Functions and New Biological Roles in Human and Mouse. Eye Res. 2019;75:100777. https://doi.org/10.1016/j.preteyeres.2019.100777
- Flavio Mantelli, Pablo Argüeso. Functions of ocular surface mucins in health and disease. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2008;8(5):477-483. https://doi.org/10.1097/ACI.0b013e32830e6b04
Рекомендуем статьи по данной теме:
Многоликость проявлений псевдотумора орбиты у шестилетнего ребенка (клиническое наблюдение).Вестник офтальмологии. 2024;140(5):106-111


