Outcomes of 3D culture of human lacrimal gland cells (pilot study)

Subbot A.M.; Emets E.V.; Safonova T.N.; Zaitseva G.V.

doi:https://doi.org/10.17116/oftalma202614204119

Анастасия Михайловна Суббот

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0000-0002-8258-6011

Елизавета Владимировна Емец

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0009-0009-4800-870X

Татьяна Николаевна Сафонова

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0000-0002-4601-0904

Галина Валерьевна Зайцева

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0000-0001-8575-3076

Результат 3D-культивирования клеток слезной железы человека (пилотное исследование)

Авторы:

Суббот А.М., Емец Е.В., Сафонова Т.Н., Зайцева Г.В.

Подробнее об авторах

Журнал: Вестник офтальмологии. 2026;142(4): 19‑25

DOI: 10.17116/oftalma202614204119

Прочитано: 108 раз

Связаться с автором

Оглавление

Как цитировать:

Суббот А.М., Емец Е.В., Сафонова Т.Н., Зайцева Г.В. Результат 3D-культивирования клеток слезной железы человека (пилотное исследование). Вестник офтальмологии. 2026;142(4):19‑25.
Subbot AM, Emets EV, Safonova TN, Zaitseva GV. Outcomes of 3D culture of human lacrimal gland cells (pilot study). Russian Annals of Ophthalmology. 2026;142(4):19‑25. (In Russ.)
https://doi.org/10.17116/oftalma202614204119

Подписка 2026 Вестник офтальмологии (Russian Annals of Ophthalmology)

Использование инфографики авторами научных работ

Резюме / Abstract:

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Апробировать метод 3D-культивирования клеток слезной железы (СЖ) человека с формированием структур, позволяющих проводить последующее изучение механизмов патогенеза ее заболеваний.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Материал для проведения культурального исследования был отобран в процессе диагностической биопсии при коррекции рецидива пролапса СЖ. Морфологических изменений в ткани СЖ выявлено не было. Клетки из образца ткани выделяли путем последовательной механической и ферментативной диссоциации. Полученные клеточные популяции разделяли дифференциальной трипсинизацией. Сфероиды формировали, заключая клеточную суспензию в купол из концентрированного раствора матригеля. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью двойного окрашивания кальцеином-AM и гомодимером этидия, экспрессию специфичных маркеров (Muc5AC, Na/K-АТФаза, panCK) анализировали методом иммуноцитохимии.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Из послеоперационного материала выведено в культуру достаточное количество жизнеспособных клеток для формирования сфероидов в матригеле. Получены и охарактеризованы сфероиды из эпителиальных и фибробластоподобных клеток СЖ человека. Эпителиальные клетки экспрессируют Muc5AC и Na/K-АТФазу, фибробласты образуют характерные сетчатые структуры в матриксе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Апробированный протокол позволяет формировать жизнеспособные сфероидные структуры, сохраняющие морфофункциональные свойства нативной ткани СЖ. Созданная in vitro модель СЖ человека может быть использована для изучения механизмов патогенеза ее заболеваний, в частности хронического неспецифического дакриоаденита.

Ключевые слова / Keywords:

слезная железа

3D-культивирование

сфероиды

дакриоаденит

Muc5AC

Na/K-АТФаза

Авторы / Authors:

Анастасия Михайловна Суббот

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0000-0002-8258-6011

Елизавета Владимировна Емец

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0009-0009-4800-870X

Татьяна Николаевна Сафонова

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0000-0002-4601-0904

Галина Валерьевна Зайцева

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней имени М.М. Краснова», Москва, Россия

ORCID: 0000-0001-8575-3076

Дата поступления:

23.07.2025

Дата принятия в печать:

22.04.2026

Закрыть метаданные

Литература / References:

Bannier-Hélaouët M, Post Y, Korving J, Trani Bustos M, Gehart H, Begthel H, Bar-Ephraim YE, van der Vaart J, Kalmann R, Imhoff SM, Clevers H. Exploring the human lacrimal gland using organoids and single-cell sequencing. Cell Stem Cell. 2021;28(7):1221-1232.e7. https://doi.org/10.1016/j.stem.2021.02.024
Tóth-Molnár E, Ding C. New insight into lacrimal gland function: Role of the duct epithelium in tear secretion. Ocul Surf. 2020;18(4):595-603. https://doi.org/10.1016/j.jtos.2020.07.002
Singh S, Chopra P, Necker F, Scholz M, Liphardt AM, Schuster L, Paulsen F, Bräuer L. Internal vascular anatomy of the human lacrimal gland: A protocol based on cadaver dissection and three-dimensional micro-computed tomography. Ann Anat. 2024;252:152207. https://doi.org/10.1016/j.aanat.2023
Kuony A, Brezak M, Mège RM, Sumbalova Koledova Z. Organotypic 3D Cell Culture of the Embryonic Lacrimal Gland. Methods Mol Biol. 2024; 2764:145-156. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-3674-9_10
Singh S, Basu S. The human lacrimal gland: Historical perspectives, current understanding, and recent advances. Curr Eye Res. 2020;45(10):1188-1198. https://doi.org/10.1080/02713683.2020.1774065
Andrew NH, McNab AA, Selva D. Review of 268 lacrimal gland biopsies in an Australian cohort. Clin Exp Ophthalmol. 2015;43(1):5-11. https://doi.org/10.1111/ceo.12371
Derbel A, Salah RB, Boukhzar R, Frikha F, Marzouk S, Bahloul Z. Dacryoadenitis: do not forget ANCA vasculitis. Rom J Ophthalmol. 2024;68(2): 187-190. https://doi.org/10.22336/rjo.2024.35
Spindle J, Tang SX, Davies B, Wladis EJ, Piozzi E, Pellegrini M, Lally SE, Shields C, Shinder R. Pediatric Idiopathic Orbital Inflammation: Clinical Features of 30 Cases. Ophthalmic Plast Reconstr Surg. 2016;32(4):270-274. https://doi.org/10.1097/IOP.0000000000000494
Jowett GM, Coales I, Neves JF. Organoids as a tool for understanding immune-mediated intestinal regeneration and development. Development. 2022; 149(8):dev199904. https://doi.org/10.1242/dev.199904
Halliday LA, Wood JPM, Chidlow G, Casson RJ, Selva D, Sun MT. Establishing human lacrimal gland cultures from biopsy-sized tissue specimens. Eye (Lond). 2023;37(1):62-68. https://doi.org/10.1038/s41433-021-01872-9
Shubha Tiwari, Rohini M Nair, Praseeda Vamadevan, Mohammad Javed Ali, Milind N Naik, Santosh G Honavar, Geeta K Vemuganti. Establishing and characterizing lacrispheres from human lacrimal gland for potential clinical application. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2018;256(4):717-727. https://doi.org/10.1007/s00417-018-3926-8
Jeong SY, Choi WH, Jeon SG, Lee S, Park JM, Park M, Lee H, Lew H, Yoo J. Establishment of functional epithelial organoids from human lacrimal glands. Stem Cell Res Ther. 2021;12(1):247. https://doi.org/10.1186/s13287-021-02133-y
Abdal Dayem A, Bin Jang S, Lim N, Yeo HC, Kwak Y, Lee SH, Shin HJ, Cho SG. Advances in lacrimal gland organoid development: Techniques and therapeutic applications. Biomed Pharmacother. 2025;183:117870. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2025.117870
Rodboon T, Yodmuang S, Chaisuparat R, Ferreira JN. Development of high-throughput lacrimal gland organoid platforms for drug discovery in dry eye disease. SLAS Discov. 2022;27(3):151-158. https://doi.org/10.1016/j.slasd.2021.11.002
СафоноваТ.Н., Зайцева Г.В. Клеточные технологии как основа разработки регенераторных принципов лечения заболеваний слезной железы. Вестник офтальмологии. 2024;140(2.2):158-165. https://doi.org/10.17116/oftalma2024140022158
Lu Q, Yin H, Grant MP, Elisseeff JH. An In Vitro Model for the Ocular Surface and Tear Film System. Sci Rep. 2017;7(1):6163. https://doi.org/10.1038/s41598-017-06369-8
Fini ME, Jeong S, Gong H, Martinez-Carrasco R, Laver NMV, Hijikata M, Keicho N, Argüeso P. Prog Retin Membrane-Associated Mucins of the Ocular Surface: New Genes, New Protein Functions and New Biological Roles in Human and Mouse. Eye Res. 2019;75:100777. https://doi.org/10.1016/j.preteyeres.2019.100777
Flavio Mantelli, Pablo Argüeso. Functions of ocular surface mucins in health and disease. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2008;8(5):477-483. https://doi.org/10.1097/ACI.0b013e32830e6b04