Влияние полиморфизмов генов интерлейкина-10 и интерлейкина-28 на развитие и течение волчаночного нефрита

ВН — волчаночный нефрит

ДИ — доверительный интервал

ИЛ-10 — интерлейкин-10

ИЛ-28 — интерлейкин-28

НС — нефротический синдром

ПВ — «почечная» выживаемость

СКВ — системная красная волчанка

Волчаночный нефрит (ВН) остается прогностически значимым висцеритом при системной красной волчанке (СКВ). Клинические признаки поражения почек наблюдаются у 50—70% больных, при этом морфологические изменения отмечаются почти у всех больных в активную стадию болезни [1].

В настоящее время большое внимание придается персонифицированному подходу к ведению больных. Наряду с клиническими прогностическими факторами развития ВН обсуждаются и генетические особенности пациентов. Наиболее важным механизмом развития ВН является иммунокомплексное воспаление, которое инициируется и поддерживается цитокинами, в том числе интерлейкином-10 (ИЛ-10) и интерлейкином-28 (ИЛ-28).

В ряде исследований отмечена прямая зависимость между повышением уровня ИЛ-10 и показателями активности заболевания [2, 3]. S. Lin и соавт. [4] отмечали увеличение уровня ИЛ-28 в сыворотке крови и продукции мРНК данного гена в мононуклеарных клетках периферической крови у больных СКВ. Однако их роль в процессе развития ВН не определена. Нами ранее показано, что носительство полиморфных вариантов (–1080)G/A гена ИЛ-10 и C/T (rs12979860) и T/G (rs8099917) гена ИЛ-28 ассоциируется с развитием ВН, однако влияние исследуемых мутаций на тяжесть течения ВН остается неизвестным [5].

В связи с этим цель нашей работы состояла в изучении взаимосвязи носительства полиморфных вариантов (–1080)G/A гена ИЛ-10 и C/T (rs12979860) и T/G (rs8099917) гена ИЛ-28 и течения ВН.

В исследование включили 99 больных СКВ в возрасте от 16 до 76 лет (средний возраст 36,8±14,0 года), из них 78 (78,8%) женщин и 21 (21,2%) мужчина славянской этнической группы. Длительность наблюдения составляла у 73 больных 5 лет и более, у 18 больных — от 1 года до 5 лет и у 9 больных 1 год и менее. Диагноз СКВ устанавливали согласно критериям Американской коллегии ревматологов. Всем больным проводили стандартное клинико-лабораторное обследование. Больные В.Н. получали сочетанную иммуносупрессивную терапию преднизолоном и циклофосфаном, в том числе в сверхвысоких дозах. Благоприятным ответом на лечение считали достижение полной или частичной ремиссии нефрита в сроке до 6 мес. Генотипирование проводили молекулярно-генетическими методами (методом полимеразной цепной реакции в реальном времени).

Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета статистических программ Statistica 10 при помощи критерия t Стьюдента, критерия χ². Оценку «почечной» выживаемости^​*​ (ПВ) проводили методом Каплана—Майера. Почечную недостаточность констатировали при повышении уровня креатинина в крови выше 2 мг/дл. Группы сравнивали с помощью логрангового теста с поправкой Йетса.

Среди пациентов с ВН активные формы поражения почек встречались у 62 (91,2%), при этом у 36 (52%) из них поражение почек наблюдалось в дебюте заболевания. У 20 (29,4%) пациентов отмечено быстропрогрессирующее течение заболевания. Среди пациентов с медленнопрогрессирующим течением у 48 (63,2%) ведущим в клинической картине заболевания был нефротический синдром (НС), у 25 (36,8%) — активный мочевой синдром. В первые 6 мес активной терапии положительный эффект достигнут у 29 (42,6%) больных.

При оценке ПВ у пациентов с СКВ в зависимости от полиморфизма гена ИЛ-10 показано, что статистически значимой ассоциации с развитием поражения почек нет, хотя и прослеживается тенденция к увеличению 10-летней ПВ в группе пациентов с мутантным аллелем ИЛ-10 (86% при 95% доверительным интервалом — ДИ от 82 до 90%) по сравнению с аналогичным показателем у пациентов без мутации в данном гене (80% при 95% ДИ от 76 до 84%; р=0,78) (см. рисунок, а).

У больных СКВ с мутантным аллелем гена ИЛ-28 (rs12979860) 10-летняя ПВ была меньше (75% при 95% ДИ от 72 до 78%), чем у пациентов без полиморфного варианта гена (83% при 95% ДИ от 80 до 86%; р=0,049) (см. рисунок, б), а у носителей мутантного аллеля гена ИЛ-28 (rs8099917) — статистически значимо меньше (67% при 95% ДИ от 62 до 72%), чем у пациентов без данной мутации (88% при 95% ДИ от 84 до 92%; р=0,047) (см. рисунок, в).

У больных ВН — носителей мутантного аллеля (–1080) G/A гена ИЛ-10 отмечался больший уровень протеинурии в рамках НС (в среднем 6,1 г/л) по сравнению с таковым у пациентов без мутантного аллеля данного гена (средняя протеинурия 2,9 г/л; p=0,034). Однако при этом носители мутантного аллеля лучше отвечали на лечение (р=0,050). Аллель (–1080) G/A гена ИЛ-10 не связана с распространенностью быстропрогрессирующих форм ВН, общей активностью заболевания, частотой поражения почек в дебюте СКВ. В ходе исследования не удалось выявить статистически значимую ассоциацию с развитием быстропрогрессирующего нефрита, активностью волчаночного процесса в почках, частотой дебюта СКВ с поражениями почек и полиморфизмом гена ИЛ-28 (rs12979860 и rs8099917). Однако имелась тенденция к увеличению частоты возникновения быстропрогрессирующих форм нефрита и более высокой степени активности поражения почек в целом у пациентов с мутантным аллелем гена ИЛ-28 (rs8099917).

Проведенное исследование позволяет констатировать, что больные — носители мутантного аллеля гена ИЛ-10, несмотря на высокий уровень протеинурии, успешнее отвечали на терапию. Замена основания G основанием, А в положении (–1082) гена ИЛ-10 приводит к снижению его продукции [6]. Белок, который кодируется геном ИЛ-10, представляет собой цитокин, продуцируемый в первую очередь моноцитами и в меньшей степени лимфоцитами. Этот белок оказывает плейотропное влияние на процессы стимуляции иммунного ответа организма. Он подавляет экспрессию цитокинов, продуцируемых лимфоцитами Th1, МНС класса II и молекул костимуляторов макрофагов. В то же время белок, кодируемый геном ИЛ-10, стимулирует пролиферацию В-лимфоцитов и продукцию ими антител. Результаты метаанализа [7] показали, что именно носительство (–1082) аллеля G, связанного с более высокой продукцией ИЛ-10, ассоциировано с развитием СКВ. В нашем исследовании выявлена тенденция к увеличению ПВ у больных с мутантным аллелем гена и хорошему ответу на сочетанную терапию глюкокортикостероидами и циклофосфамидом, что косвенно подтверждает ингибирующее влияние продукта гена ИЛ-10 на Т-клеточное звено иммунитета. Полученные нами данные свидетельствуют о более легком течении СКВ у больных с аллелем, А гена ИЛ-10.

ИЛ-28 является представителем интерферонов-λ. Сведения об их ассоциации с СКВ очень малочисленны. В ходе проведенного нами исследования продемонстрирована статистически значимая роль полиморфизма данного цитокина в динамике снижения функции почек. В группах пациентов, которые являлись носителями мутантных аллелей (Т или G) гена ИЛ-28, 10-летняя ПВ оказалась ниже, чем у больных c диким генотипом (CC или ТТ соответственно). Последние работы [8—10] показали, что важное место в патогенезе СКВ занимает регуляторный каскад, в котором участвует ИЛ-28. Органная патология реализуется через механизм гиперактивации T-лимфоцитов CD4⁺, которые увеличивают уровень продукции провоспалительных агентов [11, 12]. Отношение секреции цитокинов Th1/Th2 повышено у пациентов с СКВ и ВН [7—9]. Наши результаты позволяют сделать вывод, что наличие мутантного аллеля гена ИЛ-28 (rs8099917 T/G) или (rs12979860 C/T) является неблагоприятным прогностическим признаком для снижения функции почек у пациентов ВН.

Носительство мутантной аллеля, А гена ИЛ-10 может свидетельствовать о более благоприятном течении поражения почек при СКВ и быстром ответе на терапию. Носительство мутантных аллелей гена ИЛ-28 является неблагоприятным прогностическим признаком и может служить прогностическим фактором тяжелого течения ВН.

Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект № 14−50−00029).