* Сообщение 1 опубликовано в №4 2012 г.

Судебно-химическая экспертиза отравлений человека фальсифицированными лекарственными средствами затруднена из-за влияния на анализ неизвестных компонентов недоброкачественных лекарственных средств и продуктов их метаболизма. В то же время доля фальсифицированных и недоброкачественных лекарственных средств на фармацевтическом рынке России по разным данным колеблется от 0,1 до 40% [1, 2]. Фальсификации подвергаются широко применяемые, имеющие доверие врачей и потребителей препараты, в том числе препараты для лечения сердечно-сосудистых заболеваний. Высокая эффективность бета-блокатора метопролола, доказанная в крупных клинических исследованиях и признанная в руководствах лечения [3], способствует увеличению частоты назначений оригинального препарата и стимулирует появление воспроизведенных лекарственных средств.

Для выявления недоброкачественной или фальсифицированной продукции может быть использован банк данных по оценке межсерийной воспроизводимости метода ближней ИК-спектроскопии (БИК-спектров) производителя [4].

Экспрессность и высокая воспроизводимость результатов анализа БИК-методом, основанным на достижениях статистической обработки данных, позволяет применять его для выявления межсерийных различий между лекарственными средствами, выпускаемыми разными производителями [5, 6].

Цель работы — оценка межсерийной дисперсии таблеток метопролола сукцината разных производителей методом БИК-спектроскопии.

Были изучены девять серий таблеток Беталок ЗОК 100 мг (LA 5376, LB 5388, LE 5411, LF 5421, LH 5443, LI 5450, MC 5497, ME 5524, MH 5542; «АстраЗенека», Швеция) и шесть серий таблеток Метозок 200 мг (10508, 20508, 30508, 40508, 50508, 60508; «Акрихин», Россия). Таблетки Беталок ЗОК согласно сертификату качества соответствовали стандартам USP. Качество таблеток Метозок подтверждено производителем в соответствии с фармакопейной статьей предприятия.

Исследования были проведены на БИК-спектрометре ANTARIS II («Thermo Scientific», США). Спектры диффузного отражения получены с использованием интегрирующей сферы; разрешение 4 см^-1, количество сканирований 16, область измерения от 4000 до 10 000 см^-1.

Таблетку препарата помещали на окно интегрирующей сферы, фиксировали ее и снимали спектры диффузного отражения с обеих сторон образца. С целью получения более достоверного результата для каждой серии получали по девять БИК-спектров. Оптимальные условия записи спектров подбирали с учетом соотношения сигнал—шум и минимального времени записи одного спектра. На одно измерение требовалось в среднем около 20 с. Периодически проводилось автоматическое измерение фонового спектра воздуха.

Обработку результатов осуществляли хемометрическими методами с помощью программы TQ AnalystTM. Каждая отдельная серия препарата принималась за отдельный класс. Оценку спектральных различий между препаратами разных производителей, сериями метопролола сукцината одного производителя, а также между таблетками с разным содержанием действующего вещества проводили методом дискриминантного анализа по 10 главным компонентам. В процессе калибровки для каждой сравниваемой группы/класса программное обеспечение TQ AnalystTM позволяло вычислить усредненный спектр, который вычитался из отдельных спектров. По величине отклонений на каждой частоте диапазона создавался спектр дисперсии. Графически величины значения дисперсии представляют в виде спектральных расстояний в единицах Маhalonobis’а, которые используют для ранжирования исследуемых классов. При этом, чем ближе значение расстояния к нулю, тем выше спектральное соответствие [6].

Для компенсации влияний, вызванных непостоянной толщиной слоя, изменениями плотности образцов и размеров частиц, была использована заложенная в программе математическая функция мультипликативной коррекции рассеяния (Multiplicative Signal Correction pathlength — MSC). Кроме того, благодаря данной функции компенсируются влияния возрастных изменений.

Для выявления значимых различий между сериями калибровочную модель строили с помощью дифференциальной спектроскопии по данным первых производных БИК-спектров.

Методом дискриминантного анализа обнаружено, что максимальное расстояние Маhalonobis’а между сериями таблеток Беталок ЗОК 100 мг достигало 8,4 ед. Как оказалось, это значение было отражением как межсерийных различий, так и особенностей лекарственной формы таблеток с модифицированным высвобождением. Таблетка покрыта пленочной оболочкой и состоит из множества пеллет, внутри которых содержится метопролол сукцинат. Именно неоднородные по диаметру пеллеты вызывают изменения в плотности образца, которые и приводят к спектральным различиям. Для снижения влияния этого фактора были проведены математические процедуры мультипликативной коррекции рассеивания и анализ данных по первым производным спектров.

Результат такой модификации дискриминантного анализа позволил исключить различия, связанные с особенностями структуры лекарственной формы (рис. 1).

На рис. 2

Кроме того, методом дискриминантного анализа был получен дополнительный показатель спектральной дисперсии путем сравнения двух групп, одна из которых представляла спектры отдельной серии препарата, а вторая — усредненный спектр из библиотеки спектров остальных серий. В качестве примера (рис. 3)

Сравнение спектров отдельной серии препарата Метозок с усредненным библиотечным спектром также показало незначительное межсерийное спектральное различие: 10508 — 1,89, 20508 — 1,89, 30508 — 1,72, 40508 — 1,64, 50508 — 1,53, 60508 — 1,84 ед. Маhalonobis’а.

Таким образом, проведенные исследования позволили оценить межсерийную воспроизводимость качества таблеток метопролола сукцината разных производителей. При этом для таблеток Беталок ЗОК процедура мультипликативной коррекции рассеивания и анализ первой производной спектров позволили исключить влияние структурного фактора лекарственной формы.

Полученные значения спектрального расстояния в единицах Маhalonobis’а хорошо коррелируют с указанными в литературе пороговыми величинами, свидетельствующими об отсутствии достоверных различий между образцами [6, 7]. Таким образом, доказано, что исследуемые лекарственные препараты характеризуются высоким уровнем воспроизводимости серийного качества.