Роль в микробиоценозе в норме и при хроническом генерализованном пародонтите

Актуальность. Формирование бактериальных биопленок вносит существенный вклад в развитие хронического пародонтита и других болезней пародонта. Ведущая роль в механизме прогрессирования пародонтита, с позиций микробных экосистем, отводится пародонтопатогенам, в то же время малоизученным остается вопрос выявления роли представителей нормофлоры, рассматриваемой как критерий здорового пародонта.

Цель исследования — изучить влияние Veillonella parvula на состояние микробиоценоза пародонта в норме и при хроническом генерализованном пародонтите (ХГП).

Материал и методы. Исследование проводили на клинической базе кафедры ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова». Основная группа включала 78 пациентов с диагнозом «ХГП», группа контроля — 75 пациентов без патологии пародонта (средний возраст — 42,6±11,3 года), из них 61 мужчина и 92 женщины. По данным клинического обследования состояния тканей пародонта и данным ортопантомографии устанавливали диагноз «ХГП». Для проведения микробиологического исследования проводился забор содержимого пародонтального кармана (зубодесневой бороздки) с помощью стерильных бумажных эндодонтических штифтов (размером № 25) в 2 повторностях. При помощи метода ПЦР в реальном времени осуществляли качественный и количественный анализ соотношения исследуемых бактерий во рту. Был использован набор реагентов Дентофлор (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия), состоящий из специфичных праймеров и специфичного к последовательности продукта флюоресцентно-меченого зонда типа TaqMan к 5 пародонтопатогенным агентам A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythensis, T. denticola, и разработанный в рамках работы комплект для детекции V. parvula. В качестве гена-мишени для идентификации V. parvula и родственного ей, но не идентичного вида Veillonella spp., был выбран ген лактат-пермеазы. Участок ДНК выбранного гена из полногеномной последовательности коллекционного штамма V. parvula DSM 2008 был получен из базы данных NCBI GenBank, где он хранится под номером доступа Sequence: NC_013520.1. Интерпретация результатов проводилась с учетом такого параметра, как «пороговый уровень обсемененности», позволяющий отличить патологическую обсемененность пародонта (ассоциированную с развитием заболевания) от нормальной, встречающейся у лиц без поражения пародонта. Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета Statistica 8.0 для Windows с использованием корреляционного анализа по методу Спирмана.

Результаты. По данным клинического осмотра и ортопантомограммам пациентов установлено, что 64,8% респондентов имели среднюю степень тяжести ХГП и 35,2% — тяжелую. Полученные данные свидетельствуют, что уровень обсемененности пародонта V. parvula в основной и контрольной группах существенно отличается. Количество кандидатного представителя нормофлоры у здоровых пациентов было существенно выше, чем в основной группе — суммарное значение основной группы составило 4908,5, а контрольной — 6872,5, что косвенно подтверждает протективную роль V. parvula на пародонте. Гендерных отличий при количественной оценке обсемененности V. parvula не обнаружено. Проведенный анализ выявил неодинаковый характер взаимодействия V. parvula с основными пародонтопатогенами. Так, наиболее сильные обратные связи получены с пародонтопатогенами P. gingivalis — 0,25; T. forsythensis, P. intermedia — по 0,27. При оценке корреляционных зависимостей парных взаимодействий основных пародонтопатогенов и V. parvula установлено наличие статистически достоверных обратных корреляций V. parvula со всеми исследуемыми пародонтопатогенами, за исключением A. Actinomycetemcomitans.

Вывод. Высокая обсемененность пародонта представителями нормофлоры у пациентов без патологических изменений пародонта не только не свидетельствует о нарушениях, но и может рассматриваться, как критерий здоровья. Исследованный представитель микробиоценоза пародонта V. parvula имеет строгую ассоциацию с отсутствием болезней пародонта и обратные связи с обсемененностью основными пародонтопатогенами.