Совершенствование методов диагностики воспалительных заболеваний пародонта на основании определения патогенной микрофлоры ротовой полости

Цель исследования — анализ качественного и количественного состава биоценозов ротовой полости для расширения возможности диагностики и прогнозирования течения воспалительных заболеваний пародонта.

Материал и методы. В состав исследования вошли 288 пациентов без тяжелой общесоматической патологии в возрасте от 21 года до 63 лет. Пациенты были разделены на две группы: 204 пациента с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) и 84 пациента без патологии пародонта. Степень тяжести устанавливали на основании глубины пародонтальных карманов и степени деструкции костной ткани. Также учитывались гигиенический индекс Silness—Loe, индекс кровоточивости Muhlemanna, степень подвижности зубов, степень рецессии десны, гноетечение из пародонтальных карманов, наследственная отягощенность, табакокурение, пол, возраст пациента. С целью проведения анализа содержимое пародонтальных карманов извлекали из наиболее глубоких участков с помощью стерильных бумажных эндодонтических штифтов. Для выявления инфекционных агентов, анализа транскриптов и оценки количества геномной ДНК пациента (в качестве нормировочного показателя) экстракцию ДНК из биологического материала проводили с помощью комплектов для экстракции ДНК Проба-ГС и Проба-Рапид, а также традиционным методом экстракции смесью фенол—хлороформ. Содержание специфических последовательностей A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythensis и T. denticola анализировали с помощью ПЦР в реальном времени, используя набор Дентофлор.

Результаты. На основании проведенного статистического анализа установлено, что у пациентов с патологической подвижностью зубов существует положительная корреляция (p<0,05) с P. gingivalis (p=0,014214) и T. forsythensis (p=0,046234). Это наблюдение позволяет предполагать, что в размножении P. gingivalis и T. forsythensis существенную роль играет механический фактор, обеспечивающий достаточное пространство для размножения в поддесневом слое пародонта. При анализе выборок с кровоточивостью десен выявлена положительная корреляция с P. gingivalis (p=0,004625), P. intermedia(p=0,028619) и T. Denticola (p=0,025127). При анализе групп пациентов с генетической отягощенностью по материнской линии и без нее выявлено существенное превышение колонизации P. Gingivalis (p=0,006257) и P. intermedia(p=0,004595) у пациентов с неблагоприятной наследственностью. P. gingivalis и T. forsythensis являются значимым фактором гноетечения у женщин, что не характерно для мужчин. Гиперколонизация P. intermedia проявляет тенденцию протекать одновременно с T. forsythensis (p=0,02). Пародонт здоровых мужчин в большей мере колонизирован T. denticola, чем пародонт здоровых женщин. Наиболее частой причиной возникновения пародонтита у мужчин можно считать T. forsythensis (p=0,036522). Анализ показывает бóльшую представленность патогенов P. Gingivalis (p=0,000124), P. intermedia (p=0,015864), T. forsythensis (p=0,001895) и T. denticola (p=0,000511) в тканях пародонта у женщин с ХГП, чем без поражения пародонта. Возникновение пародонтита у женщин в первую очередь коррелирует с патогеном P. Gingivalis, который совершенно не значим для мужчин. В целом различия в представленности в тканях пародонта бактериальных патогенов в норме и при патологии существенно больше выражены у женщин, чем у мужчин. С возрастом увеличивается степень колонизации пародонта P. gingivalis (p=0,0005): другие патогены такой тенденции не показывали. У некурящих пациентов в отличие от курящих выражена представленность в тканях пародонта A. actinomycetemcomitans. Для некурящих пациентов характерна высокая прочность комплекса T. forsythensis—T. denticola (p=10^–8), тогда как у курящих пациентов он распадается (p=0,46). Вместо него у курящих пациентов формируется прочный комплекс P. gingivalis — T. denticola (p=0,0001), не выявленный ни в какой другой исследованной подгруппе.

Выводы. Установлено, что обсемененность пародонта P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythensis и T. denticola ассоциирована с наличием воспаления. При этом наиболее опасным патогеном оказалась P. gingivalis (p=0,00004), за ней следуют T. forsythensis (p=0,00009) и T. denticola (p=0,0001), а замыкает ряд P. intermedia (p=0,004). При этом T. forsythensis и T. denticola образуют четко оформленный комплекс. P. gingivalis является диагностически значимым показателем, так как содержание этого пародонтопатогена последовательно возрастает при прогрессировании патологического процесса. Степень обсемененности A. actinomycetemcomitans оказалась полностью не зависимой от тяжести заболевания.