Булкина Н.В.

Кафедра терапевтической стоматологии ГОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского"

Пудовкина Е.А.

Кафедра терапевтической стоматологии ГОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского"

Захаревич А.М.

Образовательно-научный институт наноструктур и биосистем ФГБОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. Н.Г. Чернышевского"

Матасов М.Д.

Кафедра терапевтической стоматологии ГОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского"

Галушка В.В.

Образовательно-научный институт наноструктур и биосистем ФГБОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. Н.Г. Чернышевского"

Полосухина Е.Н.

Кафедра терапевтической стоматологии ГОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского"

Китаева В.Н.

Кафедра терапевтической стоматологии ГОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского"

Ультрамикроскопическое исследование процессов деминерализации и реминерализации эмали зубов

Авторы:

Булкина Н.В., Пудовкина Е.А., Захаревич А.М., Матасов М.Д., Галушка В.В., Полосухина Е.Н., Китаева В.Н.

Подробнее об авторах

Журнал: Стоматология. 2012;91(3): 11‑14

Просмотров: 1166

Загрузок: 34


Как цитировать:

Булкина Н.В., Пудовкина Е.А., Захаревич А.М., Матасов М.Д., Галушка В.В., Полосухина Е.Н., Китаева В.Н. Ультрамикроскопическое исследование процессов деминерализации и реминерализации эмали зубов. Стоматология. 2012;91(3):11‑14.
Bulkina NV, Pudovkina EA, Zakharevich AM, Matasov MD, Galushka VV, Polosukhina EN, Kitaeva VN. Ultramicroscopic evaluation of teeth enamel de- and remineralization. Stomatology. 2012;91(3):11‑14. (In Russ.)

Актуальная проблема современной стоматологии — процесс деминерализации эмали зубов и научное обоснование применения реминерализующих средств. Эмаль относится к мезопористым веществам, она не содержит клеток и не способна к регенерации при повреждении, однако в ней постоянно происходит обмен минеральных ионов, которые поступают из слюны через поры и адсорбируются на ее поверхности [2].

Реминерализующая терапия — популярный метод профилактики кариеса зубов. В целях реминерализации используются растворы, пасты, гели, содержащие кальций, фосфаты и другие минеральные компоненты [9].

Необходимо изучать средства и методы, которые позволят значительно снизить интенсивность кариеса зубов путем лечебного и профилактического воздействия на ранних стадиях развития кариозного процесса. Во многих исследованиях продемонстрировано успешное применение современного оборудования, в том числе и сканирующей электронной микроскопии, для исследования зубов. Для уточнения механизмов реминерализации важно изучить на ультрамикроскопическом уровне процессы, происходящие в эмали зубов [5—7, 10].

Цель исследования — определение с помощью сканирующей электронной микроскопии характера начальных проявлений деминерализации эмали зубов и возможностей ее реминерализации.

Материал и методы

Исследование проводилось на визуально интактных зубах, удаленных по ортодонтическим и ортопедическим показаниям у лиц 25—30 лет. Удаленные зубы хранили в слюне и термостате при температуре 36 °С. Ежедневно в течение 15 дней дважды в день на зубы наносили на 15 мин гелеобразный реминерализующий состав, содержащий глицерофосфат кальция (кальциевая соль 1,2,3-пропантриол моногидрогенфосфата или дигидрогенфосфата, C3H7CaO6P), хлорид магния и ксилит. Микрофотографии морфологических особенностей эмали получали до обработки минерализующим препаратом и после курса реминерализующей терапии.

Для изучения изменений, происходящих на поверхности эмали зуба, детально исследовали 24 электронные микрофотографии поверхности эмали визуально интактных зубов, полученные с использованием сканирующего электронного микроскопа TESCAN модели MIRA 2 LMU, оснащенного системой энергодисперсионного микроанализа INCA Energy. Разрешающая способность микроскопа — 5 нм, а чувствительность детектора INCA Energy — 133 эВ/10 мм2. Исследование проводилось в режиме высокого вакуума [8]. Для изучения морфологических структур изображения получали с применением техники вторичных (SE) электронов. Регистрация вторичных электронов дает высокое пространственное разрешение, поскольку область их выхода из материала образца лежит ближе к поверхности и имеет значительно меньшие размеры. В сканирующем электронном микроскопе MIRA 2 LMU детектор, регистрирующий вторичные электроны, расположен под некоторым углом относительно оптической оси микроскопа. Такое расположение детектора позволяет эффективно выявлять морфологические особенности. Ближняя к детектору сторона выступа выглядит на изображении светлее, а дальняя — темнее, так как выступающая часть исследуемого объекта заслоняет электронам путь к детектору. Для участков, расположенных дальше от поверхности, ситуация оказывается прямо противоположной, т.е. по взаимному расположению светлых и темных участков при детектировании вторичных электронов можно судить о рельефе поверхности.

Результаты и обсуждение

При анализе изображений установлено, что микрорельеф эмали — неоднородный, имеются углубления и впадины, а также характерные валики [4]. Кроме того, поверхность эмали характеризуется наличием небольших углублений округлой формы диаметром до 2 мкм, в центре которых находится выход эмалевых призм. Видны естественные борозды, царапины и микротрещины шириной до нескольких долей микрометра (рис. 1),

Рисунок 1. Неоднородность поверхности эмали зуба. Ув. 2000.
которые окружают группы из 20—30 призм, создавая в совокупности структуру в виде сот [1].

Анализ микрофотографии визуально интактного зуба выявил наличие очага деминерализации эмали, расположенного в пришеечной области. При изучении изображения границы здоровой эмали и участка деминерализации (рис. 2)

Рисунок 2. Граница области деминерализации и участка интактной поверхности эмали. Ув. 1000.
обнаруживается отчетливая разница микрорельефа этих зон, связанная в первую очередь с количеством отверстий-пор. На участке деминерализации эмали их значительно больше — примерно в 8—10 раз, что обусловливает проникновение в эмаль микроорганизмов и прогрессирование процессов деминерализации эмали с последующим образованием дефекта.

На микрофотографиях, полученных после проведения курса реминерализующей терапии, заметно, что поры заполнены, поверхность эмали стала более однородной [3], уменьшилась микропористость (рис. 3).

Рисунок 3. Поверхность эмали зуба после реминерализующей терапии. а — ув. 2000; б — ув. 5000.

При морфологическом исследовании изображений обработанной реминерализующим составом области дефекта, полученных с помощью специальной техники (сканирующий электронный микроскоп), обнаружены интересные результаты. Изображения, полученные с применением техники вторичных (SE) и отраженных (BSE) электронов [8], различались (рис. 4, а).

Рисунок 4. Изображение области дефекта после реминерализации, полученное с применением техники вторичных и отраженных электронов. а — слева изображение, полученное с применением техники SE, справа — BSE. Ув. 245; б — изображение участка деминерализации, полученное с использованием техники вторичных электронов (SE); в — изображение того же участка дефекта, полученное с применением техники отраженных электронов (BSE).

На расстояниях поля зрения (размеры сканируемой области) на BSE-изображении наблюдается значительная однородность цвета картинки, т.е. контраст отсутствует. Это свидетельствует об однородности состава на протяжении всей рассматриваемой области — зоны дефекта. Преимущественная независимость цвета картинки от рельефа поверхности свидетельствует о том, что дефект имеет одинаковый состав на некоторой глубине деминерализации, так как контрастность изображения в неупруго отраженных электронах зависит не только от морфологии рельефа, но и от химического состава образца. Как известно, контрастность на BSE-изображении определяется, помимо морфологии, средней атомной массой элементов, входящих в состав образца. Но если увеличить изображение (см. рис. 4, а), в некоторых областях BSE-изображения (рис. 4, в) обнаруживаются темные островки, которых нет в аналогичном месте на изображении полученных с применением техники вторичных электронов (SE) (см. рис. 4, б). Изображение полученное с помощью техники вторичных электронов, дает информацию исключительно о структуре поверхности, поэтому отсутствие темных мест на SE-картинке свидетельствует об отсутствии в этом месте резких перепадов рельефа. Следовательно, темные островки на BSE-картинке — это области с другим химическим составом, нежели светлые. Чем темнее цвет на изображении, полученном с помощью техники вторичных электронов, тем больше в среднем атомный номер химических элементов в этой области.

Изложенное позволяет сделать следующие выводы:

1. Изучение структуры эмали зуба с помощью сканирующего электронного микроскопа дает возможность выявить истинную картину изменений, характерных для начальной стадии деминерализации, и оценить результаты реминерализующей терапии.

2. В визуально интактных зубах могут иметься очаги ранней деминерализации, которые клинически определить не представляется возможным.

3. В связи с этим для предотвращения развития кариеса зубов целесообразно профилактическое применение препаратов, содержащих минеральные компоненты.

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо со ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail

Мы используем файлы cооkies для улучшения работы сайта. Оставаясь на нашем сайте, вы соглашаетесь с условиями использования файлов cооkies. Чтобы ознакомиться с нашими Положениями о конфиденциальности и об использовании файлов cookie, нажмите здесь.