По данным современной литературы [1], грибы рода Сandida обнаруживаются в норме в ротовой полости в 30—45% случаев. При патологических состояниях этот показатель значительно изменяется. Следует отметить, что исследователи уделяют основное внимание показателям общего количества грибов и в меньшей степени — их видовому составу. Тем не менее известно, что в норме популяция грибов ротовой полости представлена в 60% C. albicans, в 10—20% C. glabrata, в 10—20% C. krusei [1]. Колонизация их определяется активностью адгезии на эпителиальных клетках слизистой оболочки полости рта. В свою очередь, последняя связана с экспрессией на поверхности эпителиоцитов рецепторов и наличием у соответствующего штамма дрожжевых грибов (ДГ) специфических к этому рецептору лигандов (адгезинов). По данным литературы, экспрессия клеточных рецепторов определяется состоянием макроорганизма [2]. Так, в работах некоторых авторов [2, 3] показано, что адгезия С. albicans является эстрогензависимой и изменяется у женщин в зависимости от физиологических сдвигов.

Цель исследования — изучение степени влияния изменения рецепторного аппарата на формирование адгезивного профиля грибов в соответствующем биоценозе. Для достижения этой цели решались следующие задачи: 1) определение частоты выявления грибов разных видов в полости рта у лиц разного пола и разных возрастных групп; 2) определение связи между патологическими состояниями в ротовой полости и частотой высева ДГ различных видов; 3) проведение сравнительного анализа адгезивной активности ДГ разных видов и разных штаммов, выделенных из указанных групп, по внутреннему стандарту (эпителий одного донора).

Материал и методы. В работе была исследована группа пациентов в возрасте от 18 до 73 лет, включавшая 30 женщин и 22 мужчин (всего 52 человека). Из 30 женщин 26 были детородного возраста и 4 находились в постменопаузальном периоде. У всех пациентов проводилась оценка стоматологического статуса путем определения КПУ (з), состояния тканей пародонта (индексы PI, РМА, SBI), также проводились опрос и осмотр на наличие заболеваний ЖКТ, обложенности языка, вредных привычек (курения), наличия в полости рта ортопедических и/или ортодонтических конструкций.

При посеве на среду Сабуро ротовой жидкости от 52 пациентов было выделено 22 изолята ДГ рода Candida, составивших коллекцию для изучения адгезивной активности. Видовую идентификацию выделенных изолятов проводили, используя хромогенные среды Никерсона. В соответствии с протоколом учитывали окраску выросших колоний на 24, 48 и 72-й часы инкубации. При этом C. albicans формировали колонии зеленого цвета, C. glabrata — розового или бледно-фиолетового, C. krusei — белого. Адгезию грибов на буккальном эпителии постоянного донора (мужчина 27 лет) проводили в соответствии с описанной на кафедре микробиологии и вирусологии РУДН методикой [1, 3], которая соответствует зарубежным аналогам [4].

Статистическая обработка проводилась методами непараметрической статистики с выявлением взаимосвязи исследуемых количественных параметров обсемененности и индексов состояния тканей пародонта (тетрахорический показатель связи) с использованием компьютерной программы Biostat 8.0.

Результаты. При обследовании лиц, составивших случайную выборку, установлено, что частота выявления грибов рода Candida составляет 0,423±0,02. При этом доминирующим видом были C. albicans, частота высева которых составила 0,288±0,06 среди всех обследованных пациентов, C. glabrata высевалась с частотой 0,1±0,04, а C. krusei — 0,09±0,06. Такое распределение частоты выявления ДГ разных видов соответствует норме, приводимой в литературе [1].

Исследованная выборка была неоднородна: в нее входили лица разного возраста, пола и с различным состоянием зубов. В связи с этим была проведена оценка видового состава грибов у лиц в возрастной группе до 20 лет и старше 20 лет. В группе молодых людей частота высева грибов составила 0,33±0,08. При этом из них C. albicans — 0,24±0,07, С. glabrata — 0,06±0,04, C. krusei — 0,03±0,08. В группе лиц старше 20 лет эти показатели составили: общая обсемененность — 0,58±0,1, C. albicans — 0,42±0,1, C. glabrata — 0,16±0,08, C. krusei — 0. Из приведенных данных следует, что с увеличением возраста (от 18 до 73 лет в данном случае) частота выявления грибов возрастает. Вероятно, это связано с усугублением патологических процессов в полости рта. Так, при анализе зависимости частоты высева от значений КПУ (з) при КПУ (з) >6 высев составил 0,8±0,09, в то время как у лиц, у которых КПУ (з) не превышал 6, этот показатель составлял 0,2±0,09. Следует отметить, что наиболее высокие значения КПУ (з) (10—16) были отмечены при смешанном инфицировании C. albicans и C. glabrata. При выявлении только C. albicans КПУ колебался от 1 до 14. Среди женщин частота выделения грибов составила 0,5±0,09, среди мужчин 0,22±0,09, при этом у женщин в постменопаузальном периоде частота высева грибов из ротовой полости достигла 0,75±0,021, в то время как у женщин детородного возраста этот показатель не превышал 0,27±0,087.

По данным литературы [2, 4—6], кандидоз является самой частой сопутствующей инфекцией при протезировании. Выявление таких видов, как C. glabrata и C. krusei, является весьма неблагоприятным признаком, так как, по некоторым данным, представители именно этих видов довольно часто являются устойчивыми к фунгицидным препаратам — нистатину и производным кетоконазола [4, 6].

В связи с этим мы проанализировали высеваемость разных видов ДГ в изучаемой выборке у лиц с ортопедическими и ортодонтическими конструкциями, а также у лиц без каких-либо конструкций в полости рта. Установлено, что только у лиц с ортопедическими конструкциями в полости рта имела место смешанная инфекция. Была выявлена прямая зависимость частоты высева ДГ с наличием у пациентов ортопедических конструкций. Тетрахорический показатель связи [7] в данном случае составил 0,45. Более высокий показатель связи отмечен при обложенности языка (0,58), поскольку она является признаком кандидоза.

В меньшей степени на обсемененность ротовой полости ДГ влияли ортодонтические конструкции. Тетрахорический показатель связи не превышал 0,22. Несколько большая зависимость была отмечена с заболеваниями пародонта: показатель связи при этом составил 0,31. В том же порядке проявлялась связь с заболеваниями ЖКТ и у курящих лиц (0,34 и 0,32 соответственно).

Принимая во внимание, что показатель связи частоты высева Candida spp. может быть ассоциирован с адгезивной активностью этих грибов и, следовательно, с их колонизацией на слизистой полости рта, был проведен анализ индекса адгезии грибов, составляющих коллекцию клинических изолятов от обследованных больных. Внутренним стандартом являлось количество адгезированных на одном эпителиоците постоянного донора дрожжевых клеток. В общей выборке индекс адгезии Candida spp. составил 7,2±0,4. При анализе адгезивной активности грибов разных видов индекс адгезии C. glabrata составил 8,44±0,45, что значительно превышало аналогичный показатель C. albicans (6,05±0,39).

При исследовании выделенных грибов без разделения их по видам не было выявлено разницы по индексу адгезии изолятов у мужчин и женщин. В то же время C. albicans, выделенные у женщин, адгезировались менее активно, чем выделенные у мужчин. Индекс адгезии у них составил 5,6±0,33, в то время как для изолятов от мужчин он определялся на уровне 6,7±0,38. Для C. glabrata эта зависимость была обратной: более активно адгезировались изоляты от женщин (8,9±0,50), чем от мужчин (7,7±0,49). Как было отмечено ранее этот высокоадгезирующий вид C. glabrata чаще встречается у женщин, чем у мужчин. Вероятно, что у данной группы пациентов формируются популяции, имеющие адгезины, комплементарные к эстрогензависимым рецепторам, экспрессируемым на эпителиальных клетках слизистой оболочки полости рта.

Вывод. Из приведенных данных следует, что наиболее часто встречающимся видом грибов, колонизирующим ротовую полость, является C. albicans, реже — C. Krusei и C. glabrata, которые, по данным литературы, часто обладают устойчивостью к фунгицидным препаратам. Установлена достоверная связь между степенью обсемененности ротовой полости ДГ и патологическими изменениями в ротовой полости. Максимальное влияние показано для значений индекса КПУ и наличия ортопедических стоматологических конструкций. С увеличением возраста частота выделения ДГ увеличивается. ДГ рода Candida различных видов имеют различную адгезивную активность. Наиболее высокий показатель индекса адгезии отмечен у C. glabrata и в меньшей степени — у C. albicans. Высокоадгезирующие виды ДГ чаще встречаются у женщин.