Ферментативная активность лимфоцитов при хронических риносинуситах, ассоциированных с хламидийной инфекцией

В последние три десятилетия происходит процесс активного накопления знаний о хламидийной инфекции, многочисленными исследованиями подтверждено участие хламидий в этиопатогенезе заболеваний урогенитального тракта, респираторного тракта, сердечно-сосудистой, пищеварительной и нервной систем, опорно-двигательного аппарата [6, 7, 10]. Это обусловлено тем, что в настоящее время наблюдается изменение инфекционной структуры основных возбудителей воспалительных заболеваний, в том числе и верхних дыхательных путей. Повышение этиологической значимости хламидий связано со многими причинами: значительным ухудшением экологической обстановки и увеличением стрессовых ситуаций, ведущих к снижению иммунитета человека, частым и бесконтрольным применением противомикробных препаратов, нарушающих эубиоз естественной микрофлоры слизистых оболочек.

Для оториноларингологов большой интерес приставляют два вида хламидий - Сhlamydia trachomatis и Chlamydophila pneumoniae [7, 14]. Частота выявления хламидий при патологии ЛОР-органов, по данным литературы, колеблется в значительных пределах - от 3 до 52% [3, 5, 7]. Это в значительной степени обусловлено различной структурой проведенных исследований и степенью достоверности и обобщаемости полученных данных, особенностями контингента обследованных лиц, величиной выборок, используемыми методами верификации хламидийной инфекции, неоднозначной трактовкой результатов исследования. Необходимо отметить, что расширение представлений о клинико-эпидемиологических проявлениях хламидийной инфекции привело к обоснованной трансформации мышления у многих ученых и врачей различных специализаций и пересмотру прежних суждений и взглядов на степень опасности для человека этого микроорганизма.

В последние годы накапливается все больше сведений о ключевой роли иммунной системы в развитии инфекционных патологических процессов, в том числе и хламидийного генеза. В основном сейчас активно изучаются иммунопатологические аспекты при урогенитальном хламидиозе [2, 4, 9]. Различные патофизиологические нарушения при воспалительных процессах в организме человека любой локализации могут приводить к нарушению функциональной активности универсальных систем гомеостаза, в том числе и иммунного, в основе которых лежит нарушение метаболизма ферментов в иммунокомпетентных клетках - лимфоцитах. На сегодняшний день особенности метаболических реакций лимфоцитов при хронической патологии верхнего респираторного тракта инфекционного генеза практически не изучены.

Поэтому, цель нашего исследования состояла в изучении активности ферментов лимфоцитов у взрослых лиц с хроническими воспалительными заболеваниями носа и околоносовых пазух, обусловленными хламидийной инфекцией.

Материал и методы исследования. Под нашим наблюдением находилось 221 взрослых больных в возрасте от 15 до 60 лет с обострением хронического гайморита и гиперчувствительного неаллергического ринита (различные формы вазомоторного ринита), направленных в стационар, вследствие неэффективности лечения в поликлинических условиях. Группу контроля составили соматически здоровые лица в количестве 50 человек, не имеющие ЛОР-заболеваний. Средний возврат лиц, составляющих группу больных и здоровых лиц, составил соответственно 34,1±1,1 и 32±2 года.

Нами определялись два вида хламидий - Chlamydia trachomatis и Chlamydophila pneumoniae; для их верификации применялись: полимеразно-цепная реакция с использованием тест-систем «ВектоХлами-ДНК-амли» («Вектор-Бест») и прямой иммунофлюоресцентный анализ с использованием тест-систем «Хламислайд» («Лабдиагностика») с меченными флюоресцеином поликлональными хламидийными антителами против основного белка наружной мембраны Chlamydia trachomatis и Chlamydophila pneumoniae. Клиническим материалом для прямого диагностирования хламидийной инфекции носа и околоносовых пазух служили мазки-соскобы со слизистой оболочки общего и среднего носовых ходов, а также мазки отпечатки с биоптатов (полипов, грануляций и т.д.), взятых из гайморовых пазух во время операции.

Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16 и CD72 (ТОО «Сорбент», г. Москва). Концентрацию иммуноглобулинов классов А, М, G в сыворотке крови оценивали методом радиальной иммунодиффузии в геле [13].

Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови проводили биолюминесцентным методом [8]. Активность дегидрогеназ выражали в ферментативных единицах (1 Е = 1 мкмоль/мин на 10⁴ клеток) [1].

При проведении статистического анализа для сравнения групп использовался непараметрический критерий множественного сравнения Краскелла - Уоллиса, при выявлении отличий проводилось попарное сравнение групп по тесту Манна - Уитни. Оценка значимости различий относительных величин частоты в независимых группах проводилась по z-критерию. Анализируемые количественные переменные представлены в виде медианы (Ме) и интерквартильного интервала (ИКИ), качественные признаки - в виде относительной частоты и 95% доверительного интервала (ДИ).

Результаты исследования и их обсуждение. Результаты проведенных исследований показали высокую частоту выявления хламидийной инфекции у больных с хроническими заболеваниями носа и околоносовых пазух. Так, положительные результаты на наличие хламидийной инфекции имели место у 33% больных (у 74 из 221 человек, 95% ДИ 27-40%). При этом значительно чаще обнаруживалась Chlamydophila pneumoniae (27%, 95% ДИ 22-33%). Chlamydia trachomatis была идентифицирована только у 14 больных (6%, 95% ДИ 4-10%). У 6 человек наблюдалось одновременное инфицирование обоими видами хламидий (3%, 95% ДИ 1-5%).

У больных с хроническими заболеваниями носа и околоносовых пазух, независимо от инфицирования хламидиями, имеют место Т-иммунодефицитные состояния. Но у лиц с хламидийной инфекцией, в отличие от больных с неподтвержденным хламидиозом, не наблюдается активации гуморального звена иммунитета.

При анализе ферментативной активности лимфоцитов крови у больных независимо от наличия или отсутствия хламидийной инфекции также установлены сходные изменения.

Снижение активности НАДФИЦДГ, а также МДГ и НАДИЦДГ - ферментов, характеризующих интенсивность субстратного потока по циклу трикарбоновых кислот [1, 12], позволяет предположить, что у больных в лимфоцитах крови уменьшается интенсивность аэробного дыхания и обменных процессов в митохондриальном компартменте. Наблюдаемое повышение активности НАДФМДГ в группах больных, возможно, необходимо в целях компенсации недостаточности метаболических реакций в цикле Кребса в качестве шунтирования ряда ферментативных реакций цикла лимонной кислоты [1, 15]. Снижение активности НАДФН-ГДГ, фермента определяющего НАДФН-зависимый отток субстратов с цикла трикарбоновых кислот, также можно рассматривать как компенсаторную реакцию, направленную на повышение интенсивности аэробного дыхания.

Между тем, необходимо отметить, что у больных без хламидийной инфекции выявляются более выраженные изменения внутриклеточного обмена веществ в лимфоцитах крови по сравнению с лицами, у которых была верифицирована хламидийная инфекция. Так, у этих больных имеет место сниженная активность анаэробной и аэробной реакций ЛДГ и НАДН-зависимой реакции МДГ, что позволяет предположить уменьшение интенсивности анаэробного окисления глюкозы и снижение наработки субстратов для метаболических реакций цикла Кребса. В то же время, снижение активности НАДН-ГДГ, по-видимому, является реакцией, направленной на сохранение пула субстратов в метаболоне цикла трикарбоновых кислот. Кроме того, у больных без хламидийной инфекции снижается активность ГР - фермента, характеризующего состояние глутатион-зависимой антиоксидантной системы [11].

Особенностью метаболизма лимфоцитов у больных с хламидийной инфекцией является снижение активности Г3ФДГ. Этот фермент характеризует уровень переноса продуктов липидного катаболизма на реакции анаэробного окисления глюкозы [1]. Следовательно, у больных с хламидийной инфекцией снижена субстратная стимуляция гликолиза, что также может определяться высоким уровнем субстратного потока по гликолитическому пути.

Проведенные нами исследования показали высокую частоту выявления хламидийной инфекции у больных с хроническими заболеваниями носа и околоносовых пазух (в 33% случев), причем инфицированность слизистой оболочки Chlamydophila pneumoniae наблюдалась значительно чаще, чем Chlamydia trachomatis (более чем в 4 раза).

При исследовании уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови установлено, что у больных ЛОР-заболеваниями, независимо от наличия хламидийной инфекции, метаболизм клеток иммунной системы характеризуется снижением активности реакций, определяющих уровень аэробного дыхания. В целом, метаболическая реакция лимфоцитов более выражена у больных без хламидийной инфекции и дополнительно определяется пониженной активностью анаэробной энергетики и глутатион-зависимой антиоксидантной системы.