Цель исследования — изучить роль углеводно-дефицитного трансферрина (УДТ) в ранней диагностике алкогольного поражения печени у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС) перед проведением аортокоронарного шунтирования (АКШ).

Проведено комплексное клиническое обследование 70 больных ИБС в возрасте от 45 до 65 лет (средний возраст 56,8±8 лет) с клинической картиной сердечной недостаточности III—IV функционального класса, подтвержденной инструментальными методами исследования (ЭКГ, ЭхоКГ) до проведения операции АКШ. В качестве скрининга применяли метод жидкостной хроматографии УДТ. Диагноз ИБС верифицирован методом коронарографии, которая выполнялась на 3-и сутки после определения в крови УДТ. Больные были разделены на две группы. 1-ю группу (n=45) составили пациенты с клинико-лабораторными маркерами хронической алкогольной интоксикации (ХАИ) без клиники ИБС, не переносившие инфаркта миокарда (ИМ). Злоупотребление алкоголем выявляли с анкетирования по опроснику CAGE, сочетания 6 и более физических и лабораторных признаков ХАИ. Во 2-ю группу (n=25) вошли пациенты с ИБС, перенесшие ИМ, не злоупотребляющие алкоголем. Больные в исследуемых группах были сопоставимы по возрасту, длительности артериальной гипертонии и хронической сердечной недостаточности.

Проведенное исследование показало, что при определении только асиалотрансферрина положительный результат был выявлен у 3 (5,4%) больных ИБС, поступивших в стационар с выраженными проявлениями острого алкогольного гепатита. При определении суммарного количества УДТ патологические изменения диагностированы у 56 (82,3%) больных ИБС. Это подтверждает высокую диагностическую значимость в тестировании хронической алкогольной болезни и ХАИ у пациентов с гиперферментемией, так как алкогольная интоксикация играет важную роль в развитии послеоперационных кардиоцеребральных, печеночно-почечных осложнений.

Определение УДТ представляет важную клиническую и прогностическую значимость в подготовке пациентов с ИБС с отягощенным алкогольным анамнезом к проведению АКШ, так как позволяет выделить группу высокого операционного риска и разработать персонифицированный алгоритм медикаментозной коррекции как на этапах операции, так и в пред- и послеоперационном периодах.

Работа выполнена при поддержке гранта РГНФ № 160600605.

* * *

По накопленным научным данным, оксидативный стресс играет значимую роль в патогенезе ряда состояний, связанных с мужской инфертильностью. Основными источниками активных форм кислорода являются лейкоциты, а антиоксидантная защита обеспечивается спермоплазмой. На сегодняшний день ВОЗ рекомендовал метод оценки радикальной продукции лейкоцитами, предложенный более 30 лет назад, однако к настоящему времени разработаны гораздо более чувствительные и информативные методы оценки свободнорадикальной продукции фагоцитов крови и антиоксидантного профиля плазмы, которые могут быть успешно адаптированы для анализа спермы.

Для оценки локального свободнорадикального гомеостаза в сперме мужчин были применены метод активированной хемилюминесценции с двухстадийной стимуляцией фагоцитов спермы и метод кинетической хемилюминесценции для анализа антиоксидантного профиля спермоплазмы. В качестве показателя активности фагоцитов рассчитывали коэффициент активности К, равный отношению амплитуды хемилюминесценции в максимуме стимулированного ответа к уровню хемилюминесценции до стимуляции. Для описания антиоксидантного профиля использовали три параметра — емкость сильных антиоксидантов, емкость белков и прооксидантная активность альбумина. Для оценки оксидативного стресса в сперматозоидах был применен новый метод люцигенин-активированной хемилюминесценции в присутствии доноров электронов.

Были обследованы 105 пациентов с нормозооспермией, астенозооспермией, астенотератозооспермией, а также лейкоцитоспермией в возрасте от 25 до 37 лет. Для каждой группы определена фагоцитарная активность спермы, радикал-продуцирующая функция сперматозоидов и антиоксидантный профиль. В отличие от плазмы крови, где основной антиоксидантный эффект вносит мочевая кислота и альбумин, антиоксидантный профиль спермоплазмы обусловлен прежде всего аскорбатом. Все полученные данные сопоставлены с показателями спермограммы.

* * *

Атеросклероз и его осложнения являются основной причиной смертности от сердечно-сосудистых заболеваний. Принципиально важную роль в развитии атеросклероза играет активация иммунной системы под действием различных патогенов, в том числе вирусных инфекций, что приводит к дестабилизации бляшек и дальнейшему развитию таких осложнений, как инфаркт миокарда или инсульт.

Цель исследования — разработка новых методических подходов к изучению иммунных и вирусных механизмов образования и разрыва атеросклеротических бляшек. Для этого нами была разработана методика анализа клеточного состава атеросклеротических бляшек и индивидуального состава экстраклеточных везикул с помощью проточной цитометрии, методика анализа вирусной активности у пациентов с атеросклерозом с помощью количественной полимеразной цепной реакции и методика культивирования атеросклеротических бляшек человека.

С помощью проточной цитометрии мы впервые смогли проанализировать полноценный клеточный состав атеросклеротических бляшек человека и выявили значительную активацию иммунных клеток по сравнению с кровью тех же пациентов. Кроме того, мы показали достоверное преобладание экстраклеточных везикул тромбоцитарного происхождения у пациентов с острым коронарным синдромом (ОКС) по сравнению с добровольцами без ишемической болезни сердца (ИБС). При исследовании вирусной активации мы обнаружили продукцию цитомегаловируса у пациентов с ОКС, которая была достоверно выше, чем у пациентов со стабильной ИБС и у добровольцев без ИБС. Активность других типов вирусов герпеса не отличалась у пациентов с ОКС и контрольной группы. Более того, концентрация цитомегаловирусной ДНК внутри атеросклеротических бляшек достоверно положительно коррелировала с дифференцировкой Т-лимфоцитов, что отражает реакцию иммунных клеток внутри бляшек на инфекцию. В настоящий момент мы исследуем изменения в активации лимфоцитов внутри атеросклеротических бляшек под действием цитомегаловируса с помощью разработанной нами методики культивирования атеросклеротических бляшек человека в условиях ex vivo.

* * *

Первичный скрининг на наличие инфекции, вызванной вирусом гепатита С (ВГС), проводится по выявлению антител к ВГС (АТ-ВГС). Для подтверждения случая гепатита С (ГС) в РФ необходимо выявить РНК вируса в сыворотке (плазме) крови [СП 3.1.3112−13 «Профилактика вирусного гепатита С»]. Целесообразность исследования другого прямого маркера ВГС-инфекции — антигена Core (АГ-Core) — в лабораторной диагностике ГС в настоящее время только изучается.

Цель исследования — выявление АГ-Core в пробах сыворотки крови пациентов с разной величиной коэффициента позитивности (КП) антител к Core (АТ-Core) — антигену ВГС.

АТ-ВГС в пробах сыворотки крови пациентов определяли в иммуноферментных тест-системах (ИФТС) двух российских производителей: ЗАО «Вектор-Бест» (ВБ) и НПО «Диагностические системы» (ДС). АГ-Core выявляли с помощью ИФТС «ВГС-core-антиген-ИФА-БЕСТ» (ВБ). КП вычисляли как отношение величины оптической плотности (ОП) образца к величине ОП критической.

Были сформированы три группы с разной степенью позитивности АТ-Core. 1-я группа включала 6 проб с АТ-Core со средним значением КП 20,48 (95% доверительный интервал (ДИ) 13,88—27,08). В 4 (66,6%) пробах был обнаружен АГ-Core. В пробах сыворотки крови потребителей наркотических препаратов средний КП АГ-Core был равен 19,57, стандартное отклонение 11,66; у новорожденного ребенка КП АГ-Core составлял 1,54.

Во 2-й группе были 7 проб со средним КП АТ-Core 8,14; 95% ДИ 4,94—1,34. АГ-Core обнаружен в трех пробах (42,86%); КП АГ-Core был низким: от 1,03 (в 1 пробе) до 1,37 (в 2 пробах).

В 3-й группе были 68 проб со средним КП АТ-Core 1,59 в ИФТС ВБ, стандартное отклонение 0,87; минимальное значение — 1,04, максимальное — 6,25. Была использована также подтверждающая ИФТС Д.С. При исследовании 9 низкопозитивных проб в разных ИФТС были обнаружены противоречивые (положительные и отрицательные) результаты. АГ-Core обнаружен в 6 (8,82%) пробах из 68, в том числе в 3 пробах с противоречивыми результатами исследования в 2 подтверждающих ИФТС. При сравнении частоты выявления АГ-Core обнаружено, что АГ-Core в 1-й группе обнаруживается в 7 раз чаще, чем в 3-й группе (p<0,005).

В низкопозитивных по АТ-Core пробах обнаружение АГ-Core подтверждает наличие ВГС-инфекции. По-видимому, именно эти пробы целесообразно исследовать на наличие РНК ВГС.

* * *

По данным Международного агентства по изучению рака, злокачественные новообразования предстательной железы занимают второе место в структуре онкологической смертности мужского населения в мире. В России число пациентов с раком предстательной железы (РПЖ) ежегодно увеличивается, с по 2006 по 2016 г. распространенность составила с 47,8 до 138,4 на 100 тыс. населения. Определение простатспецифического антигена (ПСА) в крови является наиболее распространенным методом скрининга РПЖ. Повышение уровня ПСА является показанием к выполнению трансректальной мультифокальной биопсии простаты.

Цель исследования — изучить динамику диагностики РПЖ в медицинских учреждениях ДЗМ. Для статистического анализа использованы отчеты урологических отделений медицинских учреждений ДЗМ.

С 2002 по 2012 г. в медицинских организациях ДЗМ проводилась целевая диспансеризация по раннему выявлению заболеваний предстательной железы. Исследование крови на ПСА осуществлялось всем мужчинам в возрасте 50 лет и старше. Биопсия предстательной железы выполнялась при повышении уровня ПСА выше 4 нг/мл. Это позволило улучшить выявляемость РПЖ в 5 раз. Однако отмечался высокий уровень повторных исследований крови на ПСА и биопсий предстательной железы. Наиболее часто РПЖ диагностировался у пациентов в возрасте 65—75 лет (средний возраст 74,2 года) со II и III стадиями заболевания. Стандартизованный коэффициент заболеваемости на 100 тыс. населения увеличился за этот период с 27,1 до 127,7; с 2013 г. этот показатель постепенно снижался и в 2015 г. составил 103,5 случая.

В 2015 г в соответствии с приказом № 1122 от 25.12.15 «Об организации проведения биопсий предстательной железы в медицинских организациях Департамента здравоохранения Москвы» определен новый порядок маршрутизации пациентов в возрасте 50 лет и старше при ПСА выше 2,5 нг/мл. Это способствовало снижению количества исследований крови на ПСА и биопсий предстательной железы, преимущественно за счет уменьшения повторных манипуляций и как следствие уменьшению количества гистологических исследований.

Полученные данные показали, что с 2002 по 2016 г. в Москве отмечалось улучшение уровня выявляемости РПЖ. Внедрение в практику новой маршрутизации пациентов с подозрением на заболевания предстательной железы позволило повысить качество диагностики РПЖ с наименьшими экономическими затратами.

* * *

Основной задачей гистологического исследования при раке мочевого пузыря является определение гистологических факторов прогноза рецидивирования и прогрессирования. Основными факторами прогноза являются: градация опухоли и наличие инвазии в собственную пластинку слизистой оболочки и мышечный слой. Градирование уротелиальной карциномы является предметом дискуссий с момента внедрения в 1973 г. трехступенчатой системы стадирования уротелиальной карциномы мочевого пузыря. В 1998 г. система стадирования была модифицирована и одобрена Международной ассоциацией уропатологов. В 1999 г. ВОЗ утвердила новую классификацию, эта классификация осталась трехступенчатой (степень 1, степень 2, степень 3). По сравнению с классификацией 1973 г., степень 1 была разделена на папиллярную уротелиальную опухоль с низким потенциалом злокачественности и уротелиальную карциному 1-й степени злокачественности. В классификации 1999 г., которая отличалась как от классификации 1973 г., так и 1998 г., опухоли подразделялись на папиллому, папиллярную уротелиальную опухоль с низким потенциалом злокачественности, уротелиальную карциному 1, 2 и 3-й степени злокачественности. Определение папилломы являлось одинаковым во всех этих классификациях — папиллярная опухоль с деликатной фиброваскулярной стромой, покрытой цитологически, и архитектрурно нормальным уротелием. В классификации ВОЗ 2004 г. неинвазивные уротелиальные опухоли подразделяются на папиллому, папиллярную уротелиальную опухоль с низким потенциалом злокачественности, карциному низкой и высокой степени злокачественности. В 2016 г. вышла новая классификация ВОЗ, в которой появилась новая нозологическая единица — уротелиальная пролиферация с неизвестным злокачественным потенциалом, которая объединила простую и папиллярную гиперплазию уротелия.

В настоящее время большое значение уделяется генетическим исследованиям, на основании которых инвазивные уротеальные раки подразделяются на три подтипа: люминальные, базальные и с немутированным геном р53.

* * *

Радикальная нефрэктомия, или резекция почки, является «золотым стандартом» лечения локализованного рака почки. Точная диагностика, классификация и стадирование играют решающую роль в выборе метода лечения пациентов с раком почки и определения дальнейшего прогноза. Правильная и аккуратная вырезка является первым шагом для постановки точного диагноза и определения стадии почечно-клеточного рака (ПКР).

Почка с опухолью должна быть доставлена целиком без надрезов и вместе тканями, окружающими почку. Во время вырезки гистологического материала необходимо взять на исследование одну секцию на каждый сантиметр максимального диаметра. Также необходимо взять фрагменты опухоли, расположенные рядом с чашечно-лоханочной системой, перинефральной жировой клетчаткой, жировой клетчаткой синуса почки. При мультифокальном поражении рекомендовано исследовать минимум 5 наибольших по размеру опухолей. Также исследуется нормальная почечная паренхима вблизи и на расстоянии от опухоли. Макроскопическое распознавание структур синуса, как правило, не вызывает сложностей. Иногда опухолевые узлы в клетчатке синуса трудно интерпретировать макроскопически, в таком случае ISUP рекомендует исследование минимум трех блоков из клетчатки синуса. Если инвазия в клетчатку синуса очевидна или не определяется (при маленьких периферических опухолях), 1 блока достаточно для подтверждения макроскопической оценки. Лоханка почки, перинефральная жировая клетчатка, особенно, если опухоль, прилежит близко к ним. На исследование берутся края резекции почечной вены и артерии, даже если они макроскопически не изменены (у почечной вены стенка тоньше, чем у артерии). Далее вена и артерия рассекаются разрезом и забираются все измененные участки. На исследование берется край резекции мочеточника; хирургические края резекции в случае парциальной нефрэктомии (край резекции паренхимы почки и край резекции перинефральной жировой клетчатки).

* * *

Цель исследования — оценить распространенность наиболее часто встречающихся возбудителей ИППП (хламидийная инфекция, гонококковая инфекция, трихомониаз и инфекция, вызванная M. genitalium) среди студенческой молодежи Москвы методом ПЦР в режиме реального времени.

В анонимном исследовании у студентов Москвы брали образцы первой порции мочи (n=281) и соскобы из уретры (n=391) (для лиц мужского пола) и вагинальное отделяемое (для лиц женского пола) (n=328). Никто из обследованных жалоб на дискомфорт в урогенитальной области не предъявлял. Для проведения диагностики ИППП методом ПЦР в режиме реального времени использовали тест нового поколения, созданный в соответствии с современными научными знаниями об урогенитальных инфекциях (мультипрайма), содержащий в одном препарате возможности обнаружения 4 патогенных возбудителей ИППП.

Согласно полученным данным, частота инфицирования M. genitalium, C. trachomatis, N. gonorrhoeae, T. vaginalis у молодых людей обоего пола составила 0,3, 6,3, 0,3 и 0,2% соответственно.

Впервые удалось получить данные о распространенности бактериальных ИППП среди студенческой молодежи Москвы. При этом ни в одном из выявленных случаев инфицирования обследованные не предъявляли жалоб на клинические проявления. Для предупреждения неблагоприятных последствий не пролеченных вовремя ИППП необходима просветительская работа среди молодежи об опасности случайных половых контактов и возможностях раннего диагностирования ИППП.

* * *

Количественное определение регуляторных белков и кодирующих их генов при ремиссии, компенсации и прогрессирования когнитивных расстройств позволит создать новые диагностические и прогностические маркеры (3D-маркеры) для визуализация когнитивных расстройств при различных патологиях ЦНС. В первую очередь речь идет о 3D-маркерах, позволяющих на основе специфического математического анализа выявлять комплекс параметров, связанных друг с другом в неочевидной форме.

В клинической лаборатории Центра, кроме широкого спектра традиционных лабораторных исследований, используются современные методы определения в динамике концентрации более 40 специфических белков, в том числе EDN1, LPL, VEGFA, APOC, NGF, ADIPOQ, NTF3, NRG1, APOB, BDNF-AS, ANGPTL3, ANGPTL4. У тех же пациентов производят генотипирование соответствующих генов. Последующая интегральная математическая обработка данных позволяет выявить оригинальные маркеры когнитивных расстройств. Более чем у 100 больных был проведен количественный анализ регулирующих белков и анализ генов, обеспечивающих их экспрессию.

В опубликованной в 2018 г. статье Джошуа Кохен (Joshua D. Cohen) и соавторы показали, что при интегральной обработке ряда лабораторных показателей крови можно обнаружить 8 наиболее распространенных типов рака в неметастатической стадии путем оценки уровня циркулирующих белков и мутаций в ДНК. Специфичность теста CancerSEEK составила более 99%.

Промежуточные результаты наших исследований показывают, что комплексные молекулярно-генетические и клеточные исследования дают возможность эффективно оценивать состояние больных с когнитивными расстройствами.

* * *

Цель исследования — изучение взаимосвязей между различными параметрами (клиническими, биохимическими, метаболическими, сосудисто-воспалительными, молекулярно-генетическими) и развитием повторного ишемического инсульта, а также разработка прогностической модели для определения вероятности его возникновения.

В исследование были последовательно включены 196 пациентов в возрасте старше 25 лет (муж/жен 115 (58,7%)/81 (41,3%), средний возраст 56±10 лет), которые перенесли первый ишемический инсульт и поступили в специализированные неврологические стационарные отделения ГБУЗ ЦПРИН Москвы для проведения нейрореабилитации. Проводились однократно оценка основных антропометрических, клинических, биохимических и метаболических параметров; маркеров сосудистого воспаления и эндотелиальной дисфункции; проводилось генотипирование однонуклеотидных полиморфизмов генов: IL8, ADIPOQ, ADIROR, APOB, APOC-IV, BDNF, GRM3 с использованием готовых зондов TaqMan. Наблюдение за пациентами продолжалось в среднем 36 мес.

За время наблюдения у 58 больных произошли повторные И.И. По результатам корреляционного анализа, с повторным ишемическим инсультом статистически значимо были связаны следующие исходные параметры: рост, масса тела, пол, сахарный диабет, инсулин, адипонектин, ТГ, СРБ-sh, глюкоза, мочевая кислота, IL-4, VEGF-A. Для построения прогностической модели использовали метод бинарной логистической регрессии. Общий процент согласия модели по всем пациентам составил 82,7%. В соответствии с полученными данными была построена ROC-кривая, площадь под ROC-кривой составила 0,875 (ДИ 0,824—0,926).

На основании данных, полученных в настоящем исследовании, была создана модель вероятности развития повторного ИИ.

* * *

Цель исследования — изучить взаимосвязи между полиморфными вариантами генов: АРОЕ, MTHFR, IL8, IL6, TNF-а, VEGFA, ADIPOQ, ADIROR, APOB, APOА-V, APOC-IV, LPL, LP(a), BDNF, GRM1, GRM3 и развитием первого ишемического инсульта (ИИ).

Исследованы частоты аллелей и генотипов для 20 однонуклеотидных полиморфных вариантов генов у 435 пациентов, которые перенесли первый ИИ, и 229 человек, не переносивших инсульт, соответствующих по полу, возрасту, месту проживания и национальности. Генотипирование полиморфизмов проводили с использованием готовых зондов TaqMan.

Для полиморфизмов АРОВ (rs676210) и IL8 (rs1803205) было получено значимое различие между группами в распределении минорных аллелей и генотипов.

Обнаружена достоверная связь между однонуклеотидными полиморфизмами генов АРОВ (rs676210) и IL8 (rs1803205) с развитием первого ИИ в изучаемых группах.

* * *

Цель исследования — изучение взаимосвязей между различными параметрами (клинико-антропометрическими, биохимическими, метаболическими, сосудисто-воспалительными, молекулярно-генетическими) и развитием первого ишемического инсульта, а также разработка прогностической модели для определения вероятности его возникновения.

Исследованы 196 пациентов, которые перенесли первый ишемический инсульт, и 119 человек, не переносивших инсульт, соответствующих по возрасту, месту проживания и национальности. Проводилась оценка основных антропометрических, клинических, биохимических и метаболических параметров; маркеров сосудистого воспаления и эндотелиальной дисфункции. Проводилось генотипирование однонуклеотидных полиморфизмов генов IL8, ADIPOQ, ADIROR, APOB, APOC-IV, BDNF, GRM3 с использованием готовых зондов TaqMan.

По результатам корреляционного анализа, с первым ишемическим инсультом статистически значимо были связаны параметры: масса тела, ИМТ, ОТ, гомоцистеин, инсулин, адипонектин, цистатин С, АроА1, Аро В, ОХЛ, ХС-ЛВП, ХС-ЛНП, ТГ, СРБ-sh, глюкоза, мочевая кислота, IL-1b, IL-4, IL-6, IL-8, ФНО-α, VEGF-A. Для построения прогностической модели использовали метод бинарной логистической регрессии. Процент согласия модели с «обучающей выборкой» составил 90,7%. Процент согласия модели с «независимой выборкой» составил 87,1%, общий процент согласия модели по всем пациентам составил 89,8%. В соответствии с полученными данными была построена ROC-кривая, площадь под ROC-кривой составила 0,92.

На основании данных, полученных в настоящем исследовании, была создана модель вероятности развития первого ИИ.