В настоящее время в практике лабораторной службы отечественной медицины все чаще возникает необходимость применения точного и высокопроизводительного оборудования, позволяющего соответствовать вызовам времени. За рубежом разработаны и широко используются коагулометры, способные в автоматическом режиме выполнять необходимые исследования в области диагностики нарушений свертывания крови. Подобные коагулометры позволяют проводить текущий ежедневный контроль качества и построение контрольных карт в автоматическом режиме, независимо от оператора. Тем не менее при эксплуатации автоматических коагулометров зарубежного производства имеются и негативные стороны. Данное оборудование поставляется в комплекте с дорогостоящими импортными реагентами, в приборах имеется довольно сложная система программирования, при этом недостаточно отечественных технических специалистов, способных эффективно обслуживать эту сложную технику. Фирма «Астра-Лаб» (Уфа, Россия) в рамках программы по импортозамещению разработала и в 2014 г. зарегистрировала в Минздраве Р.Ф. первый российский автоматический коагулометр АК-37, предусматривающий использование реагентов также российского производства. Однако исследований, посвященных оценке возможностей этого прибора, пока не проводилось.

Цель настоящей работы — сравнительный анализ результатов оценки различных показателей системы гемостаза, полученных на двух автоматических коагулометрах — отечественном АК-37 и зарубежном СА-1500.

Использованы образцы плазмы крови 88 больных (в случайной выборке), направленных для обследования в лабораторию патологии гемостаза КГБУЗ «Краевая клиническая больница» (Барнаул). В число обследованных пациентов вошли беременные женщины на разных сроках гестации, а также больные, проходившие лечение в стационарах терапевтического, хирургического, пульмонологического и гинекологического профилей Алтайской краевой клинической больницы. В качестве контрольной нормальной плазмы использована свежая пулированная бедная тромбоцитами плазма (БТП), полученная от 10 практически здоровых людей.

Получение исследуемых образцов. Взятие венозной крови осуществляли натощак из локтевой вены в пробирки VACUETTE с буферным раствором цитрата натрия в соотношении 9:1 (9NC Coagulation sodium citrate 3,2%). Кровь центрифугировали при 1400 g в течение 15 мин при комнатной температуре, в результате получали БТП в соответствии с имеющимися рекомендациями [1, 2].

Краткая характеристика АК-37. Прибор автоматически выполняет все необходимые процедуры забора проб и реагентов, их внесение в кюветы, термостатирование, разведение и измерения в соответствии с выбранными методами исследования. Оптическая система отслеживает момент образования фибрина путем постоянного измерения оптической плотности в реакционных кюветах. При выполнении коагуляционных тестов электронный таймер запускается в момент внесения стартового реагента и останавливается при достижении определенного уровня оптической плотности в ответ на образование сгустка. Наряду с этим имеется возможность определения активности антитромбина III (АТ III) и уровня плазминогена (ПГ) амидолитическим методом, с использованием хромогенных субстратов на тромбин и плазмин. Диск пробоподготовки рассчитан на 37 ячеек для проб, 9 позиций для реагентов. Прибор имеет высокую производительность: более 85 тестов в час по оценке протромбинового времени (ПВ) и более 45 тестов при определении активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ). Результаты измерений отражаются на дисплее, автоматически распечатываются и сохраняются в электронном журнале. Предусмотрена возможность калибровки методик ручным и автоматизированным способами. Русскоязычное меню и понятный программный интерфейс просты в восприятии и позволяют легко проводить все необходимые методы исследования.

В настоящей работе сравнивались результаты, полученные на коагулометрах АК-37 и СА-1500.

Для проведения исследований применяли следующие наборы реагентов, выпускаемые фирмой «Технология-Стандарт» (Россия):

— «АПТВ-Эл-тест» — при определении АПТВ. В состав реагентов данного набора включены эллаговая кислота и фосфолипиды из мозга кролика;

— «Техпластин-тест» — при определении ПВ, % по Квику и международного нормализованного отношения (МНО);

— «Тромбо-тест» — при определении тромбинового времени свертывания (ТВ);

— «МультиТех-Фибриноген» — при определении концентрации фибриногена модифицированным методом Clauss;

— «ХромоТех-Антитромбин» — при амидолитическом определении активности АТ III;

— «ХромоТех-Плазминоген» — при определении уровня ПГ амидолитическим методом;

— «Экспресс-Люпус-тест» — в рамках скринингового исследования эффектов волчаночного антикоагулянта (ВА);

— «Парус-тест» — скрининг-тест для выявления нарушений в системе протеина С (ПС).

Статистическую обработку полученных результатов осуществляли с использованием программного обеспечения Microsoft Offiсе Exсel 2003. Результаты исследования оценивали методом вариационной статистики с применением критерия Стьюдента (t). Статистически значимыми принимали различия p<0,05. Для оценки сопоставимости выборок использовали коэффициент корреляции Спирмена.

Информация о результатах определения наиболее часто востребованных показателей системы гемостаза представлена на рис. 1. Как видно, такие показатели, как ПВ и активность по Квику, мало отличались между собой при использовании представленных коагулометров, в то же время результаты АПТВ и ТВ (по средним данным) имели достоверно выраженные различия. Тем не менее наличие таких различий сопровождалось хорошей связью результатов определений одних и тех же параметров.

В частности, определена сильная корреляционная связь при сравнении результатов использования двух коагулометров по всем четырем отмеченным показателям (табл. 1). Очевидно, можно предположить, что полученные различия по средним данным при учете результатов АПТВ и ТВ обусловлены особенностями оптической детекции коагулометров с индивидуальным порогом учета состоявшейся реакции фибринообразования.

При оценке результатов протромбинового теста в последние годы часто применяется такой расчетный показатель данного метода исследования, как МНО, причем и в случаях обследования больных, не получающих антагонисты витамина К. Для расчетов МНО необходимо учитывать, как известно, международный индекс чувствительности (МИЧ) используемого тромбопластина [1, 2]. На рис. 2 представлена диаграмма сопоставимости результатов определения МНО в нашем случае. Отметим, что коэффициент корреляции данных по этому параметру составил 0,91 (р<0,001).

Аналогичные расчеты были проведены и после получения данных о концентрации фибриногена, измеренной на обоих коагулометрах (рис. 3). В этом случае также установлена сильная корреляционная связь (r=0,97; р<0,001).

Далее был выполнен сравнительный анализ результатов определения активности АТ III и нормализованного отношения (НО) в тесте скрининга нарушений в системе П.С. Полученные данные были сопоставимы между собой (рис. 4).

Расчеты показали сильную и достоверную (p<0,001) корреляционную связь между результатами измерений на разных приборах (r=0,86 и 0,84 — при определении активности АТ III и в тесте скрининга нарушений в системе ПС соответственно).

Кроме того, проведено сравнительное изучение результатов определения уровня плазминогена и, НО (при скрининге ВА), показавших хорошую сопоставимость между собой (рис. 5).

В этих случаях также определена сильная и стастистически значимая (p<0,001) корреляционная связь между изучаемыми параметрами на разных коагулометрах (r=0,91 и 0,88 — в случаях определения уровня ПГ и, НО в тесте скрининга ВА соответственно).

При проведении испытаний коагулометра АК-37 изучена воспроизводимость получаемых результатов для всего спектра проводимых исследований. Для этого вычисляли коэффициент вариации (CV) по результатам 10 повторных определений (табл. 2).

В соответствии с полученными результатами как в нормальном, так и в патологическом диапазоне значений CV оказался менее 5%, что отвечает необходимым требованиям.

1. Автоматический коагулометр АК-37 (фирма «Астра-Лаб», Россия) продемонстрировал сопоставимые результаты по ряду наиболее востребованных тестов исследования системы гемостаза с известным аналогом зарубежного производства СА-1500 (фирма «Sysmex», Япония).

2. Показатели системы гемостаза, наиболее часто определяемые в клинико-диагностических лабораториях, при использовании коагулометра АК-37 имеют высокую воспроизводимость (CV не более 5%, с учетом патологического диапазона значений).

3. Опыт работы с автоматическим коагулометром АК-37 позволяет рекомендовать его к широкому использованию в КДЛ для исследования основных параметров системы гемостаза в учреждениях практического здравоохранения.

Возможен конфликт интересов с представителями зарубежных компаний, поставляющих в Россию автоматические коагулометры.

Источник финансирования — ООО фирма «Технология-Стандарт», Барнаул, Россия