Развитие хирургии немыслимо без фундаментальных знаний об этиопатогенезе болезней. Привлечение параклинических наук в процесс познания позволяет установить новые закономерности развития заболеваний, причинно-следственные связи событий, наметить «уязвимые» точки потенциально возможного активного влияния на патологический процесс с целью его своевременной коррекции или прерывания прогрессирования [1—3]. В связи с этим важны познания не только в рамках структурных и функциональных нарушений на органном, тканевом, клеточном, но и на субклеточном, молекулярном, генном уровнях [4—6].

В последние годы в хирургии широко обсуждаются вопросы по установлению роли перекисного окисления мембранных липидов в патогенезе различных заболеваний. Доказана его значимость в развитии и прогрессировании многих болезней, в том числе и ургентных, определен ряд путей их коррекции [7—9]. Универсальность патогенного воздействия этого агента на организм обусловлена основным объектом действия — клеточной мембраной. Безусловно, дезорганизация структуры фосфолипидного бислоя мембран (а в последующем и функциональные расстройства со стороны клетки) является одним из первичных, инициирующих этапов [10]. Таким образом, в настоящее время оксидативному стрессу (это собирательное понятие патологических процессов на основе перекисного окисления липидов) отводится важнейшая роль в патогенезе многих заболеваний [11, 12].

Следует признать, что большинство исследователей [7, 10, 13] неправомерно ассоциируют перекисное окисление липидов с мембранодестабилизирующим или даже мембранодеструктивным процессом. Избыточная интенсивность липопероксидации по ряду причин, в частности из-за структурной антиоксидантной способности, далеко не всегда приводит к такому роду поражениям биомембраны. Между тем точные знания о структурной организации и функциональном состоянии биомембран клеток при различных заболеваниях обусловливают программу по предотвращению дисрегуляционных процессов, лежащих в основе развития осложнений и летальности.

Цель исследования — обосновать существование системного мембранодестабилизирующего дистресс-синдрома путем изучения фосфолипидного бислоя мембран клеток различных органов при ургентных хирургических болезнях живота.

Работа основывается на клинико-лабораторных данных и экспериментальных исследованиях.

Экспериментальный раздел. Опыты проведены на 90 беспородных собаках массой 12,2±0,93 кг, разделенных на группы: в 1-й (n=15) моделировали каловый перитонит путем введения 20% каловой взвеси в брюшную полость, во 2-й (n=15) — панкреонекроз путем инъекций аутожелчи в ткани поджелудочной железы в 12 точках, в 3-й (n=15) — острую обтурационную кишечную непроходимость путем лигирования тонкой кишки, в 4-й (n=15) — постгеморрагическую анемию путем кровопускания из бедренной вены, в 5-й (n=15) — механическую желтуху путем лигирования холедоха, 6-я (n=15) — здоровые животные.

Эксперименты поставлены в соответствии с требованиями к работе с экспериментальными животными (Федеральный закон от 01.01.97 «О защите животных от жестокого обращения», приказ Минздрава России от 19.06.03 «Об утверждении правил лабораторной практики»), одобрены локальным этическим комитетом. Опыты проводили под внутривенной анестезией с использованием тиопентал-натрия (0,04 г/кг). Этапы наблюдения — 1-е, 3-и и 5-е сутки. Производили забор крови, на аутопсии выполнена биопсия ткани печени, почек, толстой и тонкой кишки, сердца, легких, селезенки, головного мозга.

Состав липидов определяли путем экстрагирования, фракционирования и денситометрии на денситометре Model GS-670 (BIO-RAD, США) с соответствующим программным обеспечением (PhosphorAnalyst/PS Sowtware). Активность липопероксидации и фосфолипазных систем определяли по содержанию диеновых конъюгатов, малонового диальдегида активности фосфолипазы А₂ и супероксиддисмутазы. Синдром эндогенной интоксикации оценивали по содержанию молекул средней массы, общей и эффективной концентрации альбумина с последующим расчетом резерва связывания альбумина и индекса токсичности плазмы. Определяли некоторые функциональные характеристики тромбоцитов и эритроцитов. За физиологическую норму приняты показатели, исследованные у 15 здоровых животных.

Клиническая часть. Клинико-лабораторные исследования проведены у пациентов с острым перитонитом, вызванным перфорацией полого органа или аппендицитом (23), тяжелым панкреатитом (24), кишечной непроходимостью (20), постгеморрагической анемией (18), острым холециститом (20), желудочно-кишечным кровотечением (16), механической желтухой неопухолевого происхождения (18). Большинство больных были оперированы. Объем и характер хирургических вмешательств определялись основным заболеванием. В раннем послеоперационном периоде (до 5 сут) оценивали состав липидов плазмы и форменных элементов крови, показатели эндогенной интоксикации, перекисного окисления липидов, фосфолипазную активность, состав липидов тканей резецированных органов. Кроме того, определяли агрегационную активность тромбоцитов, некоторые функциональные характеристики эритроцитов (деформабельность, неспецифическую проницаемость, структурно-функциональное состояние гемоглобина по РАМАН-спектроскопии на рамановском спектрометре in via Basis фирмы «Renishaw»). За физиологическую норму приняты показатели 20 здоровых лиц.

Функциональное состояние различных органов в клинике и эксперименте оценивали в динамике по рутинным оценочным тестам. Полученные цифровые данные обрабатывали общепринятыми методами статистики с определением достоверности различий между данными в группах на основе расчета критерия Стьюдента и χ². Вычисляли среднюю арифметическую выборочной совокупности (М), ошибку средней арифметической (m). В каждой серии определяли достоверность различий (р) по отношению к норме, корреляционные связи между различными показателями по коэффициенту корреляции r. Выявленные закономерности и связи изучаемых параметров между группами и признаками были значимыми при вероятности безошибочного прогноза р=95% и более.

Использован объективный способ оценки состояния фосфолипидного бислоя мембран клеток тканевых структур различных органов при разной патологии. Отметим, что такого рода исследования очень трудоемки, включают экстрагирование, фракционирование липидов с последующей их качественной и количественной оценкой путем денситометрии. Только благодаря этому объективному способу определения состава основных мембранообразующих липидов возможно достаточно полно оценить структурное состояние биомембраны клеток. Использование же методик по оценке, в частности, агрегационной активности тромбоцитов, степени деформации и сорбционной способности эритроцитов, кислородтранспортной функции гемоглобина, а также работы различных органов в процессе болезни по рутинным показателям и определение сопряженности органов с состоянием фосфолипидного бислоя мембран позволяет установить и некоторые показатели их функционального состояния.

В эксперименте на всевозможных моделях нам удалось изучить состав липидов тканевых структур различных органов (печень, почки, толстая и тонкая кишка, сердце, легкие, селезенка, головной мозг). Отметим, что такого рода исследования были проведены в динамике.

Оказалось, что при всех изученных неотложных заболеваниях живота, которые существенно различаются как по этиологическому фактору, так и по патогенезу, не только в самом органе поражения, но и в форменных элементах крови (табл. 1),

Особого внимания заслуживает факт, что мембранодестабилизирующие явления возникают в самые ранние сроки острых заболеваний — в наших исследованиях уже через одни сутки. Подчеркнем важный для хирургии факт: темп изменений липидного состава различных органов в начале болезни был выше, чем рост эндогенной интоксикации.

Во многом аналогичные результаты получены в клинических исследованиях в отношении форменных элементов крови и тканевых структур резецированных органов.

И в эксперименте, и в клинических исследованиях детальный анализ характера модификаций липидов и сопоставление их с факторами, участвующими в регуляции липидного обмена, показал, что ведущими факторами патогенеза неотложных хирургических заболеваний являются избыточная интенсификация перекисного окисления мембранных липидов и выраженная фосфолипазная активность (табл. 3).

Отметим, что повышенная активизация этих агентов при различных острых заболеваниях живота регистрируется не только в крови, но и в самих тканевых структурах исследованных органов (!).

Немаловажным для хирургии является и установленный факт избыточной липопероксидации и активизации фосфолипазы на самых ранних сроках, что свидетельствует об их триггерной роли.

Безусловный интерес представляет результат корреляционного анализа. Оказалось, что между качественным и количественным составом липидов различных органов и тканей и липидмодифицирующими агентами (перекисное окисление липидов и фосфолипазная активность) при всех исследованных заболеваниях существует корреляционная связь (r=0,745—0,937), тогда как с показателями эндогенной интоксикации она прослеживается не всегда и корреляционная зависимость не всегда носит достоверный характер. В частности, особо заметный диссонанс отмечен при постгеморрагической анемии, когда в форменных элементах крови и тканях различных органов уже через сутки возникают существенные изменения липидного состава и повышенная активность липидмодифицирующих агентов, а уровень прироста содержания токсических продуктов гидрофильной и гидрофобной природы в плазме крови в этот срок сравнительно небольшой.

Результаты оценки функций различных органов и систем, а также форменных элементов крови при различных ургентных болезнях органов живота показывают, что их функциональный статус сопряжен с изменениями состава липидов в их тканевых структурах. Доказательством явилась установленная сопряженность показателей функционирования различных органов с модификациями липидного состава в их тканях. Особо убедительно это отмечалось по отношению к агрегационной способности тромбоцитов и кислородтранспортной функции эритроцитов (r=0,812—0,971). В связи с этим акцентируем внимание на тканях головного мозга, где указанные липидмодифицирующие процессы протекают быстро, что, безусловно, и является основой ухудшения общего состояния.

В эксперименте и в клинических исследованиях установлено, что в 1-е сутки раннего послеоперационного периода дестабилизация фосфолипидного бислоя клеток различных органов и форменных элементов крови более выражена, чем до операции, что лежит в основе ухудшения состояния больного (хирургическая агрессия). При благоприятном течении болезни происходило восстановление липидного состава, при прогрессировании заболевания — еще большие модификации, достигающие максимальной выраженности при наступлении смерти (танатогенетическая роль).

Оценка в динамике модификаций липидного состава при ургентных заболеваниях органов брюшной полости, которая объективно отражает тяжесть поражения, позволяет прогнозировать течение болезни. Наиболее доступным объектом исследования являются эритроциты. Установлено, и это подтверждают известные данные, что при остром заболевании органов живота модификация состава фосфолипидного бислоя красных кровяных телец соответствует изменениям в биомембранах клеток органа поражения [4]. Поэтому диагностика системных мембранодестабилизирующих явлений в организме при различных болезнях возможна по оценке состава липидов эритроцитов. В частности, нами предложен и успешно применяется в клинике индекс хаотропности липидного состава эритроцитов (патент № 2470309), по которому возможно не только оценить степень тяжести основного заболевания, но и прогнозировать его течение.

Проведенное экспериментально-клиническое исследование показывает, что при острых хирургических заболеваниях (перитонит, панкреатит, кишечная непроходимость, холецистит, механическая желтуха, постгеморрагическая анемия) возникают выраженные нарушения липидного обмена, которые регистрируются не только на организменном уровне (в форменных элементах крови), но и в клетках различных органов — печени, почках, сердце, легких, кишечнике, селезенки, головном мозге. Подчеркнем, что такого рода нарушения возникают при всех исследованных нами болезнях и во всех изученных органах, но степень их выраженности различна. Безусловно, это является основой развития содружественных дисрегуляционных изменений, в том числе важнейшего для хирургии — синдрома системного воспалительного ответа.

Для хирургии важно еще и то, что липидные модификации — это не только основа угнетения функционального состояния различных органов и систем, но и важнейший фактор интоксикационного процесса, поскольку его продукты, особенно лизоформы фосфолипидов и свободные жирные кислоты, весьма токсичны. Результаты этой работы объясняют пародоксальные ситуации в хирургии, когда после купирования воспалительного очага и синдрома эндогенной интоксикации, т. е. создания условий для выздоровления, происходит прогрессирующее ухудшение состояния больных, вследствие сохраняющихся системных мембранодестабилизирующих явлений, на фоне оксидативного стресса и активности фосфолипаз.

Следовательно, имеются веские основания для определения патологического процесса модификации состава фосфолипидного бислоя мембран клеток различных органов и тканей при острых хирургических заболеваниях, сопряженного с оксидативным и фосфолипазиндуцированным стрессом как системного мембранодестабилизирующего дистресс-синдрома.

Системный мембранодестабилизирующий дистресс-синдром — это совокупность патологических процессов на основе нарушения фосфолипидного бислоя мембран клеток органа поражения и органов-мишеней вследствие оксидативных и фосфолипазиндуцированных явлений, приводящая к нарушению их функционального состояния вплоть до полиорганной недостаточности.

Полученные данные имеют не только академическое, но и прикладное значение. Игнорировать их на данном этапе развития науки, особенно хирургии, когда дальнейшее совершенствование лечебных схем невозможно без знаний параклинических фундаментальных дисциплин, было бы ошибкой. Таким образом, в анализе развития и прогрессирования системных поражений при ургентных заболеваниях органов живота значимая роль должна отводиться не только синдрому эндогенной интоксикации, но и системному мембранодестабилизирующему дистресс-синдрому.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

The authors declare no conflicts of ineterest.

Сведения об авторах

Власов А.П. — https://orcid.org/0000-0003-4731-2952

Трофимов В.А. — https://orcid.org/0000-0003-1294-1417

Власова Т.И. — https://orcid.org/0000-0002-2624-6450

Власов П.А. — https://orcid.org/0000-0002-4389-3449

Мышкина Н.А. — https://orcid.org/0000-0003-4622-9444

Автор, ответственный за переписку: Власов А.П. — e-mail.ru: vap.61@yandex.ru