Введение
Актуальность проблемы острого панкреатита определяется высокой заболеваемостью, большой продолжительностью лечения, значительным уровнем послеоперационной летальности при деструктивных формах [4, 5]. Тяжелое состояние больных и летальные исходы при остром панкреатите уже в ранние сроки, определяемые часами с момента начала заболевания, обусловлены тяжелым панкреатогенным эндотоксикозом. Печень оказывается первым органом-мишенью, на который приходится основной удар токсичных продуктов в виде массивного поступления в кровь воротной вены токсинов, активированных панкреатических и лизосомальных ферментов, биологически активных веществ [2, 6], что в последующем приводит к развитию недостаточности печеночной функции различной степени выраженности. В настоящее время важная роль в насыщении организма эндотоксинами придается энтеральной недостаточности, которая потенцирует степень эндогенной интоксикации и обусловливает дальнейшее прогрессирование синдрома полиорганной недостаточности [3]. Патогенетический подход к терапии острого панкреатита, основанный на изучении его молекулярных механизмов, является одним из наиболее перспективных в повышении эффективности лечения [1, 8]. С учетом значимости функциональной недостаточности печени и кишечника в прогрессировании синдрома эндогенной интоксикации становится очевидной необходимость своевременной гепато- и энетеропротекторной терапии [7], которая может быть наиболее адекватной при углубленных знаниях патогенеза острого панкреатита.
Цель работы - изучение влияние нового мембранопротектора ремаксола (комплексный инфузионный отечественный препарат, содержащий янтарную кислоту, рибоксин, никотинамид, метионин, натрий, калий, магния хлорид) на показатели функционально-метаболических характеристик печени и кишечника в аспекте оценки эффективности препарата в коррекции синдрома эндогенной интоксикации при остром панкреатите.
Материал и методы
В основу работы положены экспериментальные исследования на взрослых беспородных половозрелых собаках обоего пола массой от 7,8 до 12,1 кг, разделенных на 2 группы. 1-я группа (n=15) – контрольная: животным с целью воспроизведения синдрома эндогенной интоксикации моделировали острый панкреатит по способу В.М. Буянова и соавт. (1989). Собакам под тиопентал-натриевым наркозом (0,04 г на 1 кг массы) выполняли срединную лапаротомию, пунктировали желчный пузырь, забирали желчь с последующим лигированием места пункции. Затем желчь вводили в паренхиму вертикальной части поджелудочной железы по 0,6 мл в 5 точек. В контрольные сроки (1-е, 3-и, 5-е сутки) животным осуществляли биофизические исследования, забор крови, биопсию ткани печени, кишечника. В динамике заболевания исследовали функционально-метаболические параметры печени и кишечника, определяли состав мембранных липидов, содержание маркеров эндотоксикоза. В послеоперационном периоде животным проводили инфузионную терапию (внутривенные введения 5% раствора глюкозы и 0,89% раствора натрия хлорида из расчета 50 мл на 1 кг массы животного). 2-я группа (n=15) - опытная: при развитии синдрома эндогенной интоксикации оценивали эффективность ремаксола (внутривенные введения препарата из расчета 15 мл/кг) в коррекции патологических изменений изучаемых показателей гомеостаза.
Проводили определение молекул средней массы (О.И. Пикуза, Л.З. Шакирова; 1994 г.), общей и эффективной концентрации альбумина - ОКА, ЭКА (Ю.А. Грызунов, Г.Е. Добрецов, 1994 г.), мочевины в сыворотке крови (Р. Досон и соавт., 1991 г.), креатинина, билирубина (метод Яффе), активности аланиновой и аспарагиновой аминотрансфераз в сыворотке крови (Р. Досон и соавт., 1991 г.), вено-венозный градиент определяли по методу Лендиса; регистрировали окислительно-восстановительный потенциал, устанавливали коэффициент диффузии кислорода на основе учета темпа падения диффузного тока восстановления по уравнению И.М. Эпштейна, использовали хроматографические методы анализа липидов (тонкослойная хроматография); количественное определение липидов, изучение показателей интенсивности ПОЛ (Д.Ю. Егоров, А.В. Козлов, 1988 г.) и активности фосфолипазы А2.
Результаты
Экспериментально установлено, что при выбранной модели у всех животных возникал острый панкреатит с соответствующими макро- и микроскопическими проявлениями (рис. 1),
Формирование синдрома эндогенной интоксикации сопровождалось модификацией функционально-метаболических параметров печени, что проявилось накоплением в крови продуктов азотистого обмена, билирубина, «печеночных» ферментов и кишечника: проницаемость сосудов микроциркуляторного русла кишечника для воды и белка была повышена, коэффициент диффузии кислорода снижался на 27,9-58,1% (p<0,05), электрогенез уменьшался на 25,1-68,0% (p<0,05).
Известно, что функциональная активность паренхиматозных клеток зависит от количества и состава липидов тканевых структур [2]. Данный факт нашел подтверждение и в этой серии экспериментов при выявлении существенных липидных дестабилизаций тканевых структур печени и кишечника на фоне эндогенной интоксикации. Это сопровождалось интенсификацией основных липидмодифицирующих процессов.
Проведенные исследования выявили достоверную корреляционную зависимость (r=0,75-0,98) между нарушениями функционально-метаболического статуса печени и кишечника и выраженностью синдрома эндогенной интоксикации, что подтверждает необходимость своевременной коррекции обнаруженных расстройств с включением в терапию острого панкреатита гепато- и энтеропротекторного компонента.
Экспериментально установлено, что включение ремаксола в терапию не только предупреждало прогрессирование острого панкреатита, но и способствовало сравнительно быстрому купированию воспалительных явлений в поджелудочной железе (рис. 2),
Восстановление функционального состояния печени и кишечника на фоне применения ремаксола тесно коррелировало со снижением выраженности дислипидных явлений в биомембранах клеточных структур печени и кишечника. На фоне применения апробируемого препарата была зафиксирована положительная динамика состава липидов тканевых структур печени уже в 1-е сутки терапии (табл. 1).
В ткани кишечника содержание суммарных фосфолипидов, холестерола, эфиров холестерола, триацилглицеролов и фосфатидилхолина было выше данных контроля и существенно не отличалось от нормы (за исключением двух последних фракций); содержание фосфатидилинозита возрастало относительно контроля на 30,0-71,2% (p<0,05), фосфатидилсерина - на 23,2-48,2% (p<0,05); удельный вес свободных жирных, лизофосфолипидов, моноацилглицеролов и диацилглицеролов был достоверно ниже контрольных данных (рис. 4).
На фоне применения ремаксола в комплексном лечении острого панкреатита интенсивность процессов перекисного окисления липидов была менее выражена. В опытной группе животных в ткани кишечника содержание диеновых конъюгатов было ниже данных группы контроля на 22,6% (p<0,05), малонового диальдегида - на 21,6-28,5% (p<0,05), активность фосфолипазы А2 снижалась на 22,4-29,9% (p<0,05), активность супероксиддисмутазы возрастала на 18,1-32,3% (p<0,05). В ткани печени на фоне применения ремаксола активность фосфолипазы А2 была ниже контроля на 18,43-28,52% (р<0,05). Удельный вес диеновых конъюгатов, малонового диальдегида и индуцированного малонового диальдегида снижался относительно контроля на 13,11-39,51, 28,95-43,46 и 40,11-47,28% (р<0,05) соответственно и от контроля достоверно не отличался. Активность супероксиддисмутазы была выше контроля на 15,98-30,84% (р<0,05).
Исследования показали, что на фоне применения ремаксола восстановление функционально-метаболических показателей кишечника и печени коррелировало со снижением выраженности интоксикационного синдрома: содержание молекул средней массы (λ=254 и 280 нм) достоверно уменьшалось относительно контроля на 14,8-37,0% и 18,3-41,4% (р<0,05) соответственно; индекс токсичности плазмы крови на фоне применения ремаксола был достоверно ниже контроля на 21,5-41,2% (р<0,05) (табл. 2).
Обсуждение
Экспериментально установлено, что применение ремаксола в терапии острого панкреатита приводит к уменьшению воспалительных явлений в поджелудочной железе, обусловливает снижение выраженности эндогенной интоксикации, что было зафиксировано в виде уменьшения концентрации в плазме крови токсичных продуктов гидрофильной и гидрофобной природы. Корреляционный анализ показал, что важную роль в реализации детоксикационного эффекта ремаксола играют выявленные гепато- и энтеропротекторные эффекты препарата.
Применение ремаксола способствовало восстановлению функционального потенциала печени. Так, снижение содержания неутилизированных продуктов в плазме крови на фоне терапии острого панкреатита ремаксолом являлось фактическим доказательством восстановления метаболизма данных веществ в печени. Кроме того, применение апробируемого препарата приводило к восстановлению пигментрегулирующей функции печени, что проявилось снижением концентрации общего билирубина в плазме крови. Уменьшение активности в крови печеночных ферментов - аланин- и аспартатаминотрансферазы следует расценивать как снижение интенсивности воспалительных и цитолитических процессов в печени, что свидетельствует о значительном гепатопротекторном эффекте препарата. Использование ремаксола в комплексном лечении острого экспериментального панкреатита позволило ограничить нарушения функциональных параметров кишечника за счет восстановления трофики, микроциркуляции и биоэнергетики тканей органа.
Следует отметить, что механизмом коррекции печеночной и кишечной дисфункции ремаксола явилась его способность восстанавливать липидный метаболизм тканевых структур органов. Мембранопротекторное действие препарата в отношении клеточных структур исследованных органов проявляется за счет его способности снижать интенсивность процессов перекисного окисления липидов, фосфолипазной активности, повышать антиоксидантный энзимный потенциал, предотвращая прогрессирование печеночной и энтеральной недостаточности с начальных стадий заболевания. Подчеркнем, что положительный эффект ремаксола проявляется уже с первых суток применения.
Таким образом, применение ремаксола в терапии острого панкреатита способствует уменьшению воспалительных явлений в органе, эффективной коррекции синдрома эндогенной интоксикации, что определяется способностью препарата предупреждать развитие печеночной и энтеральной недостаточности, корригируя начальные проявления дисфункции печени и кишечника.
Выраженный гепато- и энтеропротекторный эффект ремаксола обусловлен мембраностабилизирующим действием за счет его способности уменьшать интенсивность процессов перекисного окисления липидов и активность фосфолипазы А2, улучшать трофику, электрогенез и диффузионную способность тканей для кислорода.