Пальцева Е.М.

Лаборатория электронной микроскопии и иммуногистохимии Централизованного патологоанатомического отделения ГБОУ ВПО "Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова" Минздравсоцразвития России

Варламов А.В.

Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского РАМН, Москва

Секачева М.И.

Отделение хирургии печени, желчных путей и поджелудочной железы Российского научного центра хирургии им. акад. Б.В. Петровского РАМН, Москва

Фёдоров Д.Н.

РНЦХ им. акад. Б.В. Петровского РАМН, Москва

Скипенко О.Г.

Российский научный центр хирургии им. Б.В. Петровского РАМН, Москва

Влияние предоперационной лекарственной терапии на экспрессию молекул адгезии в метастазах колоректального рака в печени

Журнал: Архив патологии. 2015;77(3): 10-16

Просмотров : 18

Загрузок : 2

Как цитировать

Пальцева Е. М., Варламов А. В., Секачева М. И., Фёдоров Д. Н., Скипенко О. Г. Влияние предоперационной лекарственной терапии на экспрессию молекул адгезии в метастазах колоректального рака в печени. Архив патологии. 2015;77(3):10-16. https://doi.org/10.17116/patol201577310-16

Авторы:

Пальцева Е.М.

Лаборатория электронной микроскопии и иммуногистохимии Централизованного патологоанатомического отделения ГБОУ ВПО "Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова" Минздравсоцразвития России

Все авторы (5)

Колоректальный рак (КРР) является одним из самых распространенных онкологических заболеваний в мире, занимает 3-е место после рака молочной железы и легких [1]. По разным данным, от 14,5 до 50% пациентов с КРР на момент обращения к врачу уже имеют метастазы в печени и около 50% больных страдают от метастатического поражения печени в ходе заболевания [2]. Единственным потенциально эффективным методом лечения метастазов КРР в печени является хирургический в сочетании с химиотерапевтическим и таргетной терапией. В настоящее время в стандартные схемы предоперационного лечения входят цитотоксические препараты (оксалиплатин или иринотекан), для повышения эффективности терапии в комбинации с ними применяются таргетные препараты, направленно воздействующие на молекулы, участвующие в канцерогенезе. Одним из таргетных препаратов, используемых при КРР, является бевацизумаб, представляющий собой моноклональное антитело к VEGF-A и ингибирующий ангиогенез в ткани опухоли, препятствуя ее росту и метастазированию.

Несмотря на то что механизмы действия каждого отдельного препарата в целом известны, изменения других свойств опухолевых клеток после воздействия различных химиотерапевтических схем остаются неизвестными. В последние годы особое внимание уделяется исследованию адгезивных свойств опухолевых клеток, однако их изменения под действием химиотерапии мало изучены [3].

Одними из основных элементов межклеточной адгезии как в нормальной, так и в опухолевой ткани являются молекулы кадгеринов и катенинов. В эпителиальных тканях в структуре плазматических мембран эпителиоцитов основным белком, обеспечивающим межклеточные взаимодействия, является гликопротеин Е-кадгерин, нарушения экспрессии которого часто наблюдаются при КРР [4]. Многочисленные исследования указывают на клиническую значимость данного белка в развитии КРР. Установлена четкая корреляция снижения или исчезновения экспрессии Е-кадгерина в мембране клеток и появления цитоплазматической экспрессии в клетках первичных аденокарцином со степенью дифференцировки, глубиной прорастания, увеличением стадии опухолевого процесса, с появлением гематогенных метастазов [4—6], поражением регионарных лимфатических узлов [7], со значительным снижением общей выживаемости [8]. Аберрантная цитоплазматическая экспрессия указывает на большую вероятность рецидива заболевания; уменьшение мембранной экспрессии указывает на плохой прогноз при раке толстой кишки [9].

Несмотря на наличие такого большого количества исследований экспрессии Е-кадгерина в клетках КРР и его метастазов, в настоящее время остается практически не изученным влияние на него различных химиотерапевтических и таргетных препаратов. Существуют лишь единичные работы, посвященные изучению изменения адгезивных свойств опухолевых клеток под действием терапии цитотоксическими препаратами [10].

β-Катенин, расположенный в норме преимущественно на клеточной мембране, связывается с внутриклеточным доменом E-кадгерина с одной стороны, с α-катенином и актиновыми волокнами клетки — с другой. Таким образом, β-катенин обеспечивает прочные межклеточные контакты и участвует в организации цитоскелета [11]. При поступлении специфических сигналов его концентрация в цитоплазме увеличивается, и часть молекул транспортируется в ядро, где он обнаруживается только в опухолевых клетках. Ядерный β-катенин активирует транскрипцию ряда генов в Wnt-пути передачи сигналов и таким образом инициирует клеточную пролиферацию [1, 2, 12].

Сегодня во многих работах подтверждается клиническая значимость нарушения экспрессии β-катенина [13]. Наиболее важное прогностическое значение при КРР принадлежит ядерному β-катенину. По результатам ряда работ, накопление белка в ядрах опухолевых клеток коррелирует с глубиной прорастания, поздними стадиями развития КРР, сосудистой инвазией, наличием метастазов в печени и худшим прогнозом выживаемости [5, 7, 14, 15]. Имеются работы, посвященные исследованию, в которых показано накопление β-катенина в ядрах опухолевых клеток в метастазах в печени [11], а также повышенная мембранно-цитоплазматическая экспрессия по сравнению с первичной опухолью [4]. Однако изменение экспрессии β-катенина под действием различных схем лекарственной терапии метастатического КРР остается также неизученным.

Рядом авторов продемонстрировано наличие связи нарушения экспрессии одновременно Е-кадгерина и β-катенина в опухолевых клетках первичных опухолей с клинико-морфологическими параметрами. Так, T. Matsuoka и соавт. [16] отметили снижение степени дифференцировки, увеличение стадии заболевания, сокращение общей выживаемости на фоне уменьшения мембранной экспрессии Е-кадгерина и β-катенина в первичной опухоли. В исследовании A. Filiz и соавт. [17] показано, что редукция мембранного β-катенина и накопление его в цитоплазме ассоциируются со степенью дифференцировки опухоли и вместе со снижением мембранной экспрессии Е-кадгерина достоверно связаны с уменьшением выживаемости после радикального лечения первичной опухоли.

Поскольку снижение содержания или аномальная экспрессия любого из компонентов кадгерин-катенинового комплекса приводит к уменьшению межклеточной адгезии и увеличивает вероятность дальнейшей инвазии и метастазирования, то представляется необходимым изучение межклеточных взаимодействий метастатических опухолей [4, 15—19], а также влияния на них различных схем цитотоксической и таргетной терапии.

Цель исследования — изучение экспрессии Е-кадгерина и β-катенина в метастазах КРР в печени с целью определения воздействия цитотоксических и комбинации цитотоксических и анти-VEGF-препаратов на адгезивные свойства опухолевых клеток.

Материал и методы

Исследование выполнено на операционном материале метастазов КРР в печени, полученном от 73 пациентов РНЦХ им. акад. Б.В. Петровского. Из них 31 пациент (возраст от 27 до 72 лет, медиана возраста 57 лет) получал предоперационную терапию цитотоксическими препаратами в качестве первой линии в режиме FOLFOX6 (оксалиплатин 85 мг/м2, лейковорин 400 мг/м2, 5-фторурацил (5-ФУ) болюсно 400 мг/м2 с последующей 46-часовой инфузией 5-ФУ в дозе 2400 мг/м2) либо в режиме FOLFIRI (иринотекан 180 мг/м2, лейковорин 400 мг/м2, 5-ФУ болюсно 400 мг/м2 с последующей 46-часовой инфузией 5-ФУ в дозе 2400 мг/м2). У 11 больных (возраст от 46 до 75 лет, медиана возраста 57 лет) была проведена комбинированная цитотоксическая и таргетная анти-VEGF-терапия также в качестве первой линии, при которой пациенты получали в 1-й день бевацизумаб в дозе 5 мг/кг. Группу сравнения составил 31 пациент с метастазами в печени (возраст от 39 лет до 71 года, медиана возраста 59 лет), этим больным лекарственная терапия не проводилась.

Материал фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине, осуществляли проводку на гистопроцессоре, после чего заливали в парафин. Для гистологического исследования срезы толщиной 3—4 мкм окрашивали гематоксилином и эозином; для ИГХ-исследования срезы толщиной также 3—4 мкм монтировали на высокоадгезивные предметные стекла. Депарафинирование и ИГХ-исследование проводились по стандартному протоколу в автоматическом режиме в иммуногистохимическом стейнере Bond-Max («Leica»). Использовали первичные антитела к Е-кадгерину («Dako», клон NCH-38, разведение 1:30) и β-катенину («Dako», клон β-катенин-1, разведение 1:200).

Затем препараты изучали с помощью световой микроскопии. Интенсивность окрашивания при иммунопероксидазной реакции оценивали полуколичественным методом: – — отсутствие экспрессии, + — слабая, ++ — умеренная и +++ — выраженная интенсивность экспрессии. Для анализа результатов степени выраженности экспрессии были объединены в 2 группы: – и + — низкая, ++ и +++ — высокая экспрессия. При этом исследовали прежде всего локализацию маркеров: мембранная, мембранно-цитоплазматическая, цитоплазматическая для Е-кадгерина и мембранно-цитоплазматическая и ядерная для β-катенина. Визуализацию изображения осуществляли с помощью цифровой камеры («Leica»).

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием точного метода Фишера. Статистическая значимость принималась при p<0,05.

Результаты и обсуждение

При ИГХ-исследовании экспрессии Е-кадгерина в метастазах КРР в печени пациентов, получавших предоперационную терапию цитотоксическими препаратами, выявлена его нормальная мембранная локализация в 32% (10 пациентов) случаев; в остальных 68% (21 пациент) случаев отмечалась мембранно-цитоплазматическая экспрессия. В группе сравнения мембранная экспрессия выявлена у меньшего количества пациентов (16%, или 5 человек), чем в группе леченых больных, а мембранно-цитоплазматическая, напротив, — у большего количества (74%, или 23 человека). Следовательно, мембранная экспрессия отмечалась чаще у пациентов, леченных цитотоксическими препаратами, а патологическая мембранно-цитоплазматическая локализация маркера встречалась чаще в группе нелеченых больных, хотя статистически достоверной разницы между группами не выявлено (р>0,05). Кроме того, в группе больных, не получавших химиотерапевтическое лечение, выявлены отсутствие Е-кадгерина и его аберрантная цитоплазматическая экспрессия в 3 и 6% случаев соответственно (табл. 1).

Таблица 1. Экспрессия Е-кадгерина в метастазах КРР в печени пациентов, получавших предоперационную химиотерапию цитотоксическими препаратами, комбинированную терапию цитотоксическими и анти-VEGF-препаратами, и в контрольной группе Примечание. Здесь и в табл. 2: – — отсутствие иммунопероксидазного окрашивания; + — слабая, ++ — умеренная, +++ — выраженная интенсивность иммунопероксидазного окрашивания; * — р<0,05.

Выраженность экспрессии данного маркера также отличалась в двух группах. У больных, получавших химиотерапевтическое лечение, превалировала низкая мембранная (22% случаев, 7 пациентов), высокая мембранная экспрессия встречалась в 10% (3 пациента) случаев. При этом в контрольной группе отмечалась обратная картина: слабая интенсивность мембранной экспрессии у 3%, выраженная у 13% пациентов (различия недостоверны; р=0,12). Мембранно-цитоплазматическая экспрессия, напротив, у пациентов из группы, получавших химиотерапию, чаще была высокая (58% случаев, 18 человек), чем низкая (10%, 3 человека), так же как и в группе сравнения (выраженная в 45%, слабая в 14% случаев) (см. табл. 1). Однако статистически достоверных различий между данными группами не выявлено (р=0,09).

Таким образом, в нашем исследовании лечение цитотоксическими препаратами привело к некоторому увеличению количества случаев с нормальной мембранной локализацией молекулы адгезии Е-кадгерина по сравнению с группой пациентов, не получавших химиотерапевтическое лечение. В настоящее время существуют лишь единичные работы, посвященные изучению изменения адгезивных свойств опухолевых клеток метастатических очагов КРР под действием терапии цитотоксическими препаратами. Этими авторами получены данные об отсутствии разницы в экспрессии Е-кадгерина в метастазах КРР в печени пациентов, получавших химиотерапевтическое лечение до операции и не получавших его [10]. Вместе с тем усиление адгезивных свойств опухолевых клеток под действием цитотоксической терапии даже у небольшого числа пациентов представляется важным в связи с тем, что эти изменения опухолевой ткани улучшают дальнейший прогноз.

Анализ экспрессии Е-кадгерина в метастазах КРР в печени пациентов, получавших сочетанную терапию цитотоксическими и анти-VEGF-препаратами (бевацизумаб), показал статистически значимые отличия от контрольной группы (р=0,00043). В 1-й группе отмечалась преимущественно нормальная мембранная экспрессия (9 пациентов, 82%), в то время как во 2-й — аномальная мембранно-цитоплазматическая (23 пациента, 74%) (см. рис. 1). В 1-й группе низкая мембранная экспрессия данного маркера отмечалась в 46% случаев, несколько реже — высокая мембранная экспрессия (36%); также выявлено 2 случая мембранно-цитоплазматической экспрессии выраженной интенсивности. При сравнении интенсивности экспрессии в этих двух группах статистически достоверных различий не получено. В группе леченых пациентов не выявлено случаев патологической цитоплазматической экспрессии Е-кадгерина или его отсутствия, в отличие от контрольной группы (см. табл. 1). Таким образом, при лечении бевацизумабом отмечается достоверное снижение количества случаев аномальной цитоплазматической локализации Е-кадгерина.

Экспрессия Е-кадгерина и β-катенина в метастазах колоректального рака в печени. а — умеренная мембранная экспрессия Е-кадгерина при сочетанной терапии цитотоксическими и анти-VEGF-препаратами. ×100; б — выраженная мембранно-цитоплазматическая экспрессия Е-кадгерина у пациента из контрольной группы. ×100; в — умеренная мембранно-цитоплазматическая экспрессия β-катенина у пациента, получавшего предоперационную химиотерапию цитотоксическими препаратами. ×200; г — мембранно-цитоплазматическая и ядерная экспрессия β-катенина при терапии цитотоксическими препаратами. ×200; а—г — иммуногистохимическая окраска.

При сравнении экспрессии Е-кадгерина в группах пациентов, получавших терапию цитотоксическими препаратами в сочетании с анти-VEGF-таргетным препаратом и терапию только цитотоксическими препаратами, выявлено, что в 1-й группе достоверно чаще встречалась мембранная локализация маркера (р=0,01).

Таким образом, добавление к цитотоксической химиотерапии таргетного препарата бевацизумаба привело к тому, что в большинстве метастатических очагов молекула межклеточной адгезии Е-кадгерин приобрела свою нормальную мембранную локализацию, что свидетельствует о положительном влиянии терапии FOLFOX6 в сочетании с таргетным препаратом на адгезивные свойства опухолевых клеток. Следовательно, выявление мембранной экспрессии Е-кадгерина, подавляющего инвазию опухолевых клеток, может служить показателем эффективности сочетанной цитотоксической и таргетной анти-VEGF-терапии.

При исследовании β-катенина в метастазах КРР в печени выявлена аномальная смешанная мембранная и цитоплазматическая локализация, а также в ряде случаев — еще и ядерная. Кроме того, необходимо отметить, что ядерная локализация β-катенина наиболее выражена по периферии метастатических очагов. Анализ экспрессии β-катенина в метастазах КРР в печени пациентов, получавших предоперационную химиотерапию цитотоксическими препаратами, показал, что сочетание мембранно-цитоплазматической и ядерной экспрессии встречалось примерно с такой же частотой, как и мембранно-цитоплазматическая экспрессия (52%, 16 пациентов и 48%, 15 пациентов соответственно) (см. рисунок, в, г). В контрольной группе отмечено некоторое преобладание мембранно-цитоплазматической экспрессии (58%, 18 больных). Отличия между группами недостоверны (р=0,46). При этом у больных, как получавших химиотерапевтическое лечение, так и не получавших его, превалировала высокая интенсивность мембранно-цитоплазматической экспрессии (38 и 55% случаев соответственно). При наличии ядерной локализации β-катенина выявлена его выраженная мембранно-цитоплазматическая экспрессия у 52% (16 человек) леченых пациентов и у 39% (12 человек) из контрольной группы (табл. 2). Отличия в выраженности экспрессии данного маркера статистически достоверных значений не достигли.

Таблица 2. Экспрессия β-катенина в метастазах КРР в печени пациентов, получавших предоперационную химиотерапию цитотоксическими препаратами, комбинированную терапию цитотоксическими и анти-VEGF-препаратами, и в контрольной группе

Сопоставление содержания β-катенина после проведения сочетанной терапии цитотоксическими препаратами и бевацизумабом с контрольной группой выявило большее количество случаев без ядерной экспрессии в первой группе, чем во второй (64 и 58% случаев соответственно; р>0,05). У пациентов, получавших сочетанную терапию, так же как и у нелеченых пациентов, превалировала высокая мембранно-цитоплазматическая экспрессия данного маркера как при наличии ядерной экспрессии (36% случаев), так и при ее отсутствии (55% случаев). Низкое содержание β-катенина не обнаружено у пациентов с ядерной экспрессией и отмечено лишь в 9% случаев без ядерной экспрессии (см. табл. 2). Статистически достоверных различий между данными группами в зависимости от интенсивности экспрессии также не выявлено.

Сравнение содержания β-катенина в двух группах пациентов, получавших предоперационную терапию, достоверной разницы не показало (р=0,49).

По данным разных авторов, интенсивность иммунореактивности β-катенина при КРР, как правило, выраженная в большинстве случаев и колеблется от 62% [20] до 77% [1] в первичных опухолях и достигает 93% в метастазах в печени [4], что согласуется с нашими данными. При этом аномальная ядерная локализация белка часто присутствует как в первичных опухолях, составляя, по данным разных авторов, от 42% [20] до 80% [1], так и в метастатических отсевах в печени, доходя до 100% [11]. В нашем исследовании ядерная экспрессия β-катенина выявлена у 42% пациентов, не проходивших предоперационную терапию, у 52% больных, леченных цитотоксическими препаратами, и у 36%, получавших сочетанную терапию. Нам не удалось найти в литературе сведений о влиянии изучаемых химиотерапевтических и таргетных препаратов на содержание β-катенина в опухолевых клетках. По нашим данным, добавление анти-VEGF-препарата приводило к некоторому уменьшению количества случаев с ядерной локализацией белка по сравнению как с контрольной группой, так и с группой пациентов, получавших цитотоксическую терапию.

Нами проведен анализ соотношения локализации и интенсивности экспрессии Е-кадгерина и β-катенина в метастазах КРР в печени во всех трех группах. Для изучения соотношения интенсивности экспрессии Е-кадгерина и β-катенина были выделены 4 подгруппы: высокая экспрессия обоих маркеров (Е-кадгерин+/β-катенин+), высокая экспрессия Е-кадгерина при низкой β-катенина (Е-кадгерин+/β-катенин–), низкая экспрессия Е-кадгерина при высокой β-катенина (Е-кадгерин–/β-катенин+), низкая экспрессия обоих белков (Е-кадгерин–/β-катенин–) (табл. 3). Статистически достоверных различий между группами нами не обнаружено. Во всех трех группах преобладала выраженная экспрессия обоих маркеров. В контрольной группе также в значительном количестве случае отмечено сочетание слабой экспрессии Е-кадгерина с высокой β-катенина (36% пациентов).

Таблица 3. Соотношение интенсивности экспрессии Е-кадгерина и β-катенина в опухолевых клетках метастазов КРР в печени пациентов, получавших предоперационную химиотерапию цитотоксическими препаратами, комбинированную терапию цитотоксическими и анти-VEGF-препаратами, и в контрольной группе Примечание. + — высокая экспрессия, – — низкая экспрессия.

Для сопоставления их локализации в опухолевых клетках было выделено 7 вариантов сочетания экспрессии Е-кадгерина/β-катенина (табл. 4). В группе пациентов, леченных цитотоксическими препаратами, так же как и в контрольной группе, превалировала аномальная мембранно-цитоплазматическая локализация Е-кадгерина в сочетании либо с мембранно-цитоплазматической экспрессией β-катенина (36% в первой группе и 46% — во второй), либо с наличием его мембранной, цитоплазматической и ядерной локализации (32 и 29% соответственно). При добавлении к терапии таргетного анти-VEGF-препарата начинало преобладать сочетание нормальной мембранной локализации Е-кадгерина с мембранно-цитоплазматической экспрессией β-катенина (46% случаев; р=0,009 по сравнению с контрольной группой), несколько реже — в сочетании с ядерной локализацией β-катенина (36% пациентов; р=0,06 по сравнению с группой контроля). При сравнении локализации данных белков в опухолевых клетках в группах пациентов, получавших терапию цитотоксическими препаратами в сочетании с анти-VEGF-препаратом и терапию только цитотоксическими препаратами, выявлено, что в 1-й группе достоверно чаще встречалась мембранная экспрессия Е-кадгерина в сочетании с мембранно-цитоплазматической β-катенина (р=0,04) и снижалось количество случаев мембранной экспрессии Е-кадгерина в сочетании с ядерной локализацией β-катенина (р=0,04).

Таблица 4. Соотношение локализации Е-кадгерина и β-катенина в опухолевых клетках метастазов КРР в печени пациентов, получавших предоперационную химиотерапию цитотоксическими препаратами, комбинированную терапию цитотоксическими и анти-VEGF-препаратами, и в контрольной группе Примечание. м-ц — мембранно-цитоплазматическая, м — мембранная, ц — цитоплазматическая локализация; – — отсутствие экспрессии; * — р<0,05.

Нарушение экспрессии и соответственно функции любого из элементов комплекса Е-кадгерин/β-катенин приводит к нарушению межклеточных контактов, накоплению β-катенина в ядре и повышению его транскрипционной активности. В несвязанном с E-кадгерином состоянии β-катенин может функционировать как фактор транскрипции. Накапливаясь в цитоплазме, β-катенин участвует в трансдукции сигнала, формируя активные транскрипционные комплексы с другими белками, которые перемещаются в ядро и трансактивируют определенные гены Wnt-пути передачи сигналов. В результате стимулируется пролиферация клеток и увеличивается их способность к инвазии [1, 4, 11, 12]. В нашем исследовании в метастазах КРР в печени как пациентов, не получавших предоперационную терапию, так и леченных по схеме FOLFOX6, в большинстве случаев отмечено нарушение кадгерин-катенинового комплекса, а именно наличие аберрантной цитоплазматической экспрессии Е-кадгерина и цитоплазматической и ядерной β-катенина. Такие изменения приводят к нарушению межклеточной адгезии и функционированию β-катенина в качестве транскрипционного фактора, усиливающего пролиферацию опухолевых клеток. Добавление таргетного анти-VEGF-препарата к цитотоксической терапии приводило к восстановлению нормальной локализации Е-кадгерина в клетках и снижению количества случаев ядерной экспрессии β-катенина. При восстановлении мембранной локализации Е-кадгерина в клетке его внутриклеточный домен связывается с β-катенином и последний перестает функционировать в качестве транскрипционного фактора, а взаимодействует с актиновыми микрофиламентами и участвует в организации межклеточных контактов. Следовательно, бевацизумаб оказывает положительное влияние на кадгерин-катениновый комплекс в клетках метастатического КРР.

Заключение

В проведенном исследовании экспрессии Е-кадгерина в метастазах КРР в печени выявлено достоверное увеличение количества случаев нормальной мембранной локализации Е-кадгерина, что улучшает адгезивные свойства опухолевых клеток в группе пациентов, получавших сочетанную предоперационную терапию цитотоксическими и таргетным анти-VEGF-препаратом, по сравнению как с контрольной группой, так и с пациентами, леченными только цитотоксическими препаратами.

Сопоставление локализации Е-кадгерина и β-катенина в опухолевых клетках показало, что добавление к терапии таргетного анти-VEGF-препарата приводило к преобладанию сочетания нормальной мембранной локализации Е-кадгерина с мембранно-цитоплазматической экспрессией β-катенина по сравнению с контрольной группой и с пациентами, получавшими только FOLFOX6, а также достоверно снижало количество случаев мембранной экспрессии Е-кадгерина в сочетании с аномальной ядерной локализацией β-катенина по сравнению с группой, получавшей только цитотоксическую химиотерапию.

Таким образом, добавление бевацизумаба к лекарственной терапии метастатического КРР положительно влияет на кадгерин-катениновый комплекс, приводя к усилению межклеточных контактов и подавлению функционирования β-катенина в качестве транскрипционного фактора, увеличивающего пролиферацию опухолевых клеток.

Работа выполнена в рамках проекта, поддержанного Российским фондом фундаментальных исследований, № 14−04−00844.

Участие авторов:

Сбор и обработка материала: Е.М.П., А.В.В., М.И.С., Д.Н.Ф.

Статистическая обработка: А.В.В.

Написание текста: Е.М.П.

Редактирование: О.Г. С.

Конфликт интересов отсутствует.

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо с ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail