Количественное определение серотонина в крови и моче методом высоко-эффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией

В организме человека серотонин участвует в огромном количестве физиологических процессов, которые являются результатом его функции в качестве нейротрансмиттера в ЦНС и сердечно-сосудистой системе. Ряд заболеваний сопровождается патологическими изменениями в метаболизме серотонина. Разработанная хроматографическая методика позволяет проводить рутинный ВЭЖХ-анализ серотонина в крови и моче. Эта методика может помочь в подтверждении таких заболеваний как депрессия, шизофрения или карциноидный синдром. Определение серотонина или его метаболита 5-гидроксииндолуксусной кислоты является сегодня стандартным диагностическим тестом при подозрении на карциноидный синдром. Материал и методы. Разработана методика по количественному определению серотонина в крови и моче. Она позволяет быстро и точно определять серотонин в сыворотке/плазме/цельной крови или моче. Используемый метод анализа — высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) с электрохимической детекцией (ЭХ). Аналитическое оборудование: хроматограф и детектор фирмы Shimadzu (Япония). Хроматографическая колонка Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18 3,5 мкм, скорость потока 1,0 мл/мин, рабочий потенциал 400—500 мВ (относительно Ag/AgCl электрода). Время хроматографического анализа проб крови составляет 10 минут, тогда как время анализа проб мочи не превышает 8 минут. Извлечение серотонина из крови/мочи происходит посредством твердофазной экстракции. Результаты. Степень извлечения серотонина из мочи составляет 99%. Степень извлечения из плазмы составляет 95%. Калибровочная зависимость линейна в определяемом диапазоне значений 5—1000 мкг/л и для мочи и для крови. Нижний предел количественного определения составляет 3 мкг/л серотонина в моче/крови. При проведении внутрилабораторного контроля качества обращает на себя внимание достаточно низкий коэффициент внутри- и межсерийной вариации — не более 3%. Вывод. Теперь для диагностики таких болезней как депрессия, шизофрения или карциноидный синдром можно использовать простой, дешевый и быстрый метод ВЭЖХ/ЭХ. Пробоподготовка проста в исполнении, а методика дает возможность определять серотонин и в крови и в моче. Так, для диагностики карциноидного синдрома определение серотонина в сыворотке является более чувствительным маркером, чем секреция серотонина или его метаболита — 5-гидроксииндолуксусной кислоты в моче.